多拉菌素的突变生物合成及发酵条件优化
| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第11-33页 |
| ·聚酮类抗生素及其突变生物合成研究 | 第11-15页 |
| ·聚酮类抗生素概述 | 第11-12页 |
| ·聚酮类抗生素的突变生物合成研究 | 第12-15页 |
| ·阿维菌素的研究进展 | 第15-27页 |
| ·阿维菌素简介 | 第15页 |
| ·阿维菌素结构类似物及衍生物 | 第15-19页 |
| ·阿维菌素的生物合成及基因结构 | 第19-25页 |
| ·阿维链霉菌的基因工程改造 | 第25-27页 |
| ·多拉菌素的研究概况 | 第27-29页 |
| ·多拉菌素的抗虫机制 | 第28页 |
| ·多拉菌素的抗虫谱 | 第28页 |
| ·多拉菌素在兽医临床中的应用 | 第28-29页 |
| ·阿维链霉菌的代谢调控及发酵研究 | 第29-31页 |
| ·立题依据与目的意义 | 第31-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-43页 |
| ·材料 | 第33-37页 |
| ·菌株和质粒 | 第33-34页 |
| ·培养基 | 第34-35页 |
| ·缓冲液及试剂 | 第35-36页 |
| ·抗生素 | 第36页 |
| ·酶及化学试剂 | 第36页 |
| ·仪器设备 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-43页 |
| ·菌种培养及保藏 | 第37页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒转化 | 第37-38页 |
| ·大肠杆菌质粒 DNA 的小量提取 | 第38页 |
| ·PCR 扩增 | 第38页 |
| ·DNA 连接 | 第38-39页 |
| ·目的DNA 片段的回收 | 第39页 |
| ·DNA 测序 | 第39页 |
| ·链霉菌质粒的少量提取(碱裂解法) | 第39-40页 |
| ·链霉菌总 DNA 的小量提取 | 第40页 |
| ·阿维链霉菌原生质体的制备 | 第40-41页 |
| ·阿维链霉菌原生质体的转化及再生(小规模转化法) | 第41页 |
| ·电泳 | 第41页 |
| ·阿维菌素的摇瓶发酵工艺 | 第41页 |
| ·阿维菌素和多拉菌素发酵单位的测定 | 第41-42页 |
| ·数据计算及统计方法 | 第42-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-64页 |
| ·多拉菌素突变生物合成菌株的构建 | 第43-52页 |
| ·bkdFGH 基因缺失载体的构建 | 第43-46页 |
| ·重组质粒pLJ04 的转化 | 第46页 |
| ·双交换突变株的筛选 | 第46-48页 |
| ·bkdFGH 基因缺失突变株的验证 | 第48-49页 |
| ·bkdFGH 基因缺失突变株的环己羧酸前体发酵 | 第49-52页 |
| ·bkdFGH 基因缺失突变株的稳定性考察 | 第52页 |
| ·缺失突变株发酵条件的优化 | 第52-64页 |
| ·环己羧酸的添加测试试验 | 第52-53页 |
| ·氮源的测试试验 | 第53-58页 |
| ·碳源的测试试验 | 第58-59页 |
| ·无机盐对多拉菌素产量的影响 | 第59-61页 |
| ·微量元素对多拉菌素产量的影响 | 第61-62页 |
| ·利用正交试验选择培养基的最适配比 | 第62-64页 |
| 4 讨论 | 第64-66页 |
| ·多拉菌素的突变生物合成 | 第64页 |
| ·bkdFGH 基因缺失突变株的发酵条件优化 | 第64-66页 |
| 5 结论 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第75页 |
