中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
1 前言 | 第11-17页 |
·锰的雄性生殖毒性 | 第11-14页 |
·锰对睾丸形态学的影响 | 第11-12页 |
·锰对睾丸生殖功能的影响 | 第12-13页 |
·锰对睾丸酶活性的影响 | 第13页 |
·锰的遗传毒性 | 第13-14页 |
·线粒体凋亡途径的研究进展 | 第14-16页 |
·线粒体通透性的转变和膜电位的崩溃 | 第14页 |
·线粒体细胞色素C 的释放 | 第14-15页 |
·Bcl-2 蛋白家族在线粒体凋亡途径中的调控作用 | 第15-16页 |
·锰与细胞凋亡 | 第16页 |
·试验研究的目的与意义 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-24页 |
·主要仪器与试剂 | 第17-18页 |
·主要仪器 | 第17页 |
·主要试剂 | 第17-18页 |
·鸡支持-生精细胞的制备、鉴定及处理 | 第18页 |
·鸡支持-生精细胞的分离和培养 | 第18页 |
·鸡支持-生精细胞的鉴定 | 第18页 |
·检测项目与方法 | 第18-23页 |
·锰致鸡支持-生精细胞活性的影响 | 第18-19页 |
·锰致鸡支持-生精细胞凋亡的形态学观察 | 第19-20页 |
·细胞DNA 损伤的检测 | 第20页 |
·流式细胞仪检测线粒体膜电位(Δψm) | 第20页 |
·Western blot 检测胞浆内Cyt-c 蛋白表达 | 第20-21页 |
·线粒体呼吸链复合物活性检测 | 第21页 |
·分光光度法检测Caspase-9,3 活性 | 第21页 |
·鸡支持-生精细胞Bak、Bcl-x 和Caspase-3 基因mRNA 表达量的检测 | 第21-23页 |
·实验数据分析与统计 | 第23-24页 |
3 试验结果与分析 | 第24-42页 |
·鸡支持-生精细胞体外培养及鉴定结果 | 第24页 |
·锰对鸡支持-生精细胞活性影响的检测结果 | 第24-27页 |
·细胞增殖抑制率检测结果 | 第24-25页 |
·乳酸脱氢酶(LDH)活性的检测结果 | 第25-26页 |
·细胞脱落计数和脱落细胞活性的检测结果 | 第26-27页 |
·锰致鸡支持-生精细胞凋亡的形态学检测结果 | 第27-30页 |
·MnCl_2 作用鸡支持-生精细胞形态学观察 | 第27页 |
·AO/EB 双荧光染色检测结果 | 第27-29页 |
·透射电镜对细胞超微结构观察结果 | 第29-30页 |
·锰致鸡支持-生精细胞DNA 损伤的检测结果 | 第30-32页 |
·DNA Ladder 检测结果 | 第30-31页 |
·脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测结果 | 第31-32页 |
·MnCl_2 致鸡支持-生精细胞线粒体损伤的检测结果 | 第32-34页 |
·锰对鸡支持-生精细胞Δψm 影响的检测结果 | 第32-33页 |
·鸡支持-生精细胞胞浆内Cyt-c 蛋白表达检测结果 | 第33-34页 |
·锰对鸡支持-生精细胞线粒体呼吸链复合物活性影响的检测结果 | 第34页 |
·MnCl_2 对鸡支持-生精细胞Caspase-9,3 活性影响的检测结果 | 第34-35页 |
·MnCl_2 对鸡支持-生精细胞Bak、Bcl-x 和Caspase-3 基因mRNA 表达量影响的检测结果 | 第35-42页 |
·Bak、Bcl-x 和Caspase-3 基因PCR 产物鉴定结果 | 第35-38页 |
·实时定量PCR 检测结果 | 第38-42页 |
4 讨论 | 第42-51页 |
·鸡支持-生精细胞体外培养及鉴定 | 第42页 |
·锰对鸡支持-生精细胞活性影响 | 第42-43页 |
·锰对鸡支持-生精细胞增殖抑制率的影响 | 第42页 |
·锰对鸡支持-生精细胞上清液中LDH 活性的影响 | 第42-43页 |
·锰对鸡支持-生精细胞贴壁性能和脱落细胞活性的影响 | 第43页 |
·锰致鸡支持-生精细胞凋亡形态学的影响 | 第43-45页 |
·光学显微镜观察锰致鸡支持-生精细胞凋亡形态学变化 | 第43-44页 |
·透射观察锰致鸡支持-生精细胞凋亡形态学变化 | 第44-45页 |
·锰致鸡支持-生精细胞DNA 损伤的影响 | 第45-46页 |
·DNA Ladder 法检测锰致鸡支持-生精细胞DNA 损伤的影响 | 第45页 |
·TUNEL 法检测锰致鸡支持-生精细胞DNA 损伤的影响 | 第45-46页 |
·锰对鸡支持-生精细胞线粒体损伤的影响 | 第46-48页 |
·锰对鸡支持-生精细胞Δψm 的影响 | 第46页 |
·锰对鸡支持-生精细胞胞浆内Cyt-c 蛋白表达的影响 | 第46-47页 |
·锰对鸡支持-生精细胞线粒体呼吸链复合物活性的影响 | 第47-48页 |
·锰对鸡支持-生精细胞Caspase-9,3 活性和Caspase-3 基因mRNA 表达量的影响 | 第48-49页 |
·锰对鸡支持-生精细胞Bak、Bcl-x mRNA 表达量的影响 | 第49-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-64页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第64页 |