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锰致体外培养鸡胚脑神经元凋亡机理的研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 前言第11-15页
   ·锰中毒与氧化应激第11-12页
   ·锰中毒与线粒体损伤及能量代谢障碍第12-13页
   ·锰中毒与钙稳态失衡第13页
   ·锰中毒与α-突触核蛋白第13-14页
   ·锰中毒与细胞凋亡第14页
   ·试验目的与意义第14-15页
2 材料与方法第15-22页
   ·主要仪器与试剂第15-16页
     ·主要仪器第15页
     ·主要试剂第15-16页
     ·试验药品第16页
   ·鸡胚脑神经细胞的制备、培养及处理第16页
   ·检测项目与方法第16-21页
     ·鸡胚神经元的鉴定第16页
     ·MnCl_2 对神经细胞活性影响的检测第16页
     ·MnCl_2 对神经细胞凋亡的形态学观察第16-17页
     ·MnCl_2 致鸡胚脑神经元氧化应激的检测第17-18页
     ·MnCl_2 致神经细胞凋亡的检测第18页
     ·流式细胞仪检测线粒体膜电位(Δψm)第18页
     ·线粒体呼吸链复合物活性检测方法第18-19页
     ·MnCl_2 对神经细胞内[Ca~(2+)]i 浓度影响的检测第19页
     ·神经细胞内CaM、α-syn 基因mRNA 表达量的检测第19-21页
   ·实验数据分析与统计第21-22页
3 试验结果与分析第22-42页
   ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元活性影响的检测结果第22-23页
     ·WST-1 比色法检测结果第22页
     ·LDH 活性的检测结果第22-23页
   ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元凋亡的检测结果第23-30页
     ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元凋亡形态学检测结果第23-27页
     ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元DNA 损伤的检测结果第27-28页
     ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元 PS 影响的检测结果第28-30页
   ·MnCl_2 致鸡胚脑神经元氧化应激的检测结果第30-31页
     ·细胞内ROS 含量的检测结果第30-31页
     ·细胞内GSH 含量的检测结果第31页
   ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元线粒体功能影响的检测结果第31-33页
     ·锰致鸡胚脑神经元Δψm 的检测结果第31-32页
     ·线粒体呼吸链复合物活性检测结果第32-33页
   ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元内[Ca~(2+)]_i 影响的检测结果第33-34页
   ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元内CaM、α-syn mRNA 表达影响的检测结果第34-42页
     ·鸡胚脑神经元总RNA 提取与鉴定结果第34页
     ·CaM、α-syn 和GAPDH 基因PCR 产物鉴定结果第34-37页
     ·实时定量PCR 检测结果第37-42页
4 讨论第42-49页
   ·鸡胚脑神经元分离、培养及鉴定第42页
   ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元活性的影响第42-43页
     ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元抑制率的影响第42-43页
     ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元培养上清中 LDH 活性的影响第43页
   ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元凋亡的影响第43-45页
     ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元凋亡形态学的影响第43-44页
     ·MnCl_2 致鸡胚脑神经元 DNA 损伤的影响第44-45页
     ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元磷脂酰丝氨酸的影响第45页
   ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元氧化应激的影响第45-46页
     ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元内 ROS 含量的影响第45-46页
     ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元内 GSH 含量的影响第46页
   ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元线粒体损伤及能量代谢的影响第46-47页
     ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元线粒体膜电位的影响第46-47页
     ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元线粒体呼吸链复合物的影响第47页
   ·锰对鸡胚脑神经元内[Ca~(2+)]_i 及CaM 基因mRNA 表达的影响第47-48页
   ·MnCl_2 对鸡胚脑神经元内 α-syn mRNA 表达的影响第48-49页
5 结论第49-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-58页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第58页

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