| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第12-14页 |
| 第1章 猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪A群轮状病毒多重RT-PCR检测方法的建立及临床应用 | 第14-35页 |
| 1 文献综述 | 第14-24页 |
| ·猪传染性胃肠炎病毒分子生物学特性及诊断方法研究进展 | 第14-18页 |
| ·猪传染性胃肠炎概述 | 第14页 |
| ·猪传染性胃肠炎的临床症状及病理变化 | 第14-15页 |
| ·猪传染性胃肠炎病毒的分子生物学特征 | 第15-16页 |
| ·猪传染性胃肠炎诊断方法研究进展 | 第16-18页 |
| ·猪流行性腹泻病毒分子生物学特性及诊断方法研究进展 | 第18-20页 |
| ·猪流行性腹泻概述 | 第18页 |
| ·猪流行性腹泻的临床症状及病理变化 | 第18-19页 |
| ·猪流行性腹泻病毒的分子生物学特征 | 第19页 |
| ·猪流行性腹泻检测技术研究进展 | 第19-20页 |
| ·猪轮状病毒分子生物学特性及诊断方法研究进展 | 第20-24页 |
| ·轮状病毒概述 | 第20-21页 |
| ·猪轮状病毒的临床症状及病理变化 | 第21页 |
| ·轮状病毒的分子生物学特征 | 第21-22页 |
| ·猪轮状病毒检测技术研究进展 | 第22-23页 |
| ·猪轮状病毒的培养特性 | 第23-24页 |
| 2 研究的目的与意义 | 第24页 |
| 3 材料与方法 | 第24-27页 |
| ·病毒 | 第24页 |
| ·临床病料 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24-25页 |
| ·引物设计合成 | 第25页 |
| ·病料的处理 | 第25页 |
| ·RNA的提取 | 第25页 |
| ·反转录合成cDNA | 第25-26页 |
| ·单项PCR扩增cDNA模板 | 第26页 |
| ·单项PCR最佳退火温度及引物浓度的确定 | 第26页 |
| ·多重RT-PCR反应条件优化 | 第26页 |
| ·多重PCR引物浓度及退火温度的优化 | 第26页 |
| ·多重PCR特异性和敏感性试验 | 第26页 |
| ·多重RT-PCR检测方法的初步临床应用 | 第26页 |
| ·多重RT-PCR产物测序及序列分析 | 第26-27页 |
| ·多重PCR检测结果的判定 | 第27页 |
| 4 结果 | 第27-33页 |
| ·单项PCR退火温度及引物浓度的确定 | 第27-28页 |
| ·多重PCR反应条件的优化 | 第28-29页 |
| ·多重PCR最终反应条件 | 第29页 |
| ·多重RT-PCR的特异性 | 第29-30页 |
| ·多重RT-PCR的敏感性 | 第30页 |
| ·多重RT-PCR初步临床检测结果与常规RT-PCR比较 | 第30-31页 |
| ·多重RT-PCR产物的序列分析 | 第31页 |
| ·TGEV、PEDV和PGAR的流行病学调查 | 第31-33页 |
| 5 讨论 | 第33-35页 |
| 第2章 猪A群轮状病毒的分离与鉴定 | 第35-48页 |
| 1 研究的目的与意义 | 第35-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-37页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·病料 | 第36页 |
| ·细胞、宿主菌与载体 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·引物 | 第36-37页 |
| 3 方法 | 第37-42页 |
| ·细胞培养液配制 | 第37页 |
| ·病料的处理及接种 | 第37页 |
| ·病毒的RT-PCR鉴定 | 第37页 |
| ·RNA的提取 | 第37-38页 |
| ·反转录合成cDNA | 第38页 |
| ·PCR扩增cDNA模板 | 第38页 |
| ·DNA回收 | 第38-39页 |
| ·克隆质粒的构建 | 第39页 |
| ·构建质粒的PCR鉴定 | 第39页 |
| ·构建质粒的酶切鉴定 | 第39-40页 |
| ·VP6和VP7基因的测序 | 第40页 |
| ·VP6基因序列分析 | 第40-42页 |
| 4 结果与分析 | 第42-47页 |
| ·病毒的分离 | 第42-43页 |
| ·病毒的RT-PCR鉴定 | 第43页 |
| ·VP6和VP7基因的RT-PCR扩增 | 第43页 |
| ·VP6和VP7克隆质粒的构建与鉴定 | 第43-44页 |
| ·VP6基因序列测序结果 | 第44页 |
| ·VP7基因序列测序结果 | 第44页 |
| ·VP6基因序列的同源性分析 | 第44-45页 |
| ·VP7基因序列的同源性分析 | 第45-47页 |
| 5 讨论 | 第47-48页 |
| 第3章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-59页 |
| 附录 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
