摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略词(ABBREVIATION) | 第10-12页 |
第1章 文献综述 | 第12-28页 |
·戊型肝炎病毒的发现 | 第12页 |
·戊型肝炎的流行病学特点 | 第12-15页 |
·戊型肝炎的临床特征 | 第15页 |
·戊型肝炎病毒的分子生物学特性 | 第15-20页 |
·HEV的形态及理化特性 | 第15-16页 |
·HEV的分类 | 第16页 |
·HEV的血清型及基因型 | 第16-17页 |
·HEV的基因组及各基因的功能 | 第17-18页 |
·HEV类病毒颗粒的结构 | 第18-19页 |
·戊型肝炎病毒抗原表位研究进展 | 第19-20页 |
·HEV的细胞培养 | 第20-21页 |
·HEV的动物模型 | 第21-23页 |
·非人类灵长类戊肝动物模型 | 第21-22页 |
·家猪动物动物模型 | 第22页 |
·其它动物模型 | 第22-23页 |
·HEV疫苗的研制 | 第23-24页 |
·戊型肝炎的诊断方法 | 第24-28页 |
·ELISA | 第25页 |
·RT-PCR | 第25-26页 |
·免疫荧光(IFA) | 第26页 |
·免疫电镜(IEM) | 第26页 |
·血清中和试验 | 第26-27页 |
·免疫印迹 | 第27页 |
·其他检测方法 | 第27-28页 |
第2章 研究的目的和意义 | 第28-29页 |
第3章 华中地区猪戊型肝炎(HEV)的分子流行病学调查 | 第29-45页 |
·试验材料 | 第29-32页 |
·样品的采集与处理 | 第29页 |
·质粒、菌株和细胞系 | 第29页 |
·生化试剂(盒) | 第29-30页 |
·培养基及溶液的配制 | 第30-32页 |
·试验方法 | 第32-36页 |
·血清学检测 | 第32-33页 |
·RT-nPCR的检测 | 第33-34页 |
·基因的克隆及序列分析 | 第34-36页 |
·HEV的细胞培养及间接免疫荧光 | 第36页 |
·试验结果与分析 | 第36-43页 |
·血清学调查结果 | 第36-37页 |
·RT-PCR结果 | 第37-38页 |
·粪便及肛拭子中HEV RNA的检测结果 | 第38-40页 |
·遗传进化分析 | 第40-41页 |
·接毒细胞的HEV RNA的检测及间接免疫荧光结果 | 第41-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
第4章 猪戊型肝病毒ORF2全长基因及截短的ORF2基因在大肠杆菌中的表达 | 第45-66页 |
·试验材料 | 第45-48页 |
·主要试剂与材料 | 第45-46页 |
·常用的溶液及培养基的配制 | 第46-48页 |
·试验方法 | 第48-54页 |
·ORF2全长基因及截短的ORF2基因克隆策略 | 第48-49页 |
·基因的克隆 | 第49-52页 |
·表达载体的构建与鉴定 | 第52页 |
·重组蛋白表达与纯化 | 第52-54页 |
·结果与分析 | 第54-62页 |
·目的基因(ORF2、VLP1、VLP2、NE)的克隆 | 第54-58页 |
·原核表达载体pET-ORF2、pET-VLP1、pET-VLP2、pET-NE的构建及鉴定 | 第58页 |
·SDS-PAGE鉴别不同重组菌的表达 | 第58-61页 |
·Western blot分析 | 第61-62页 |
·讨论 | 第62-66页 |
结论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-78页 |
致谢 | 第78-79页 |