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猪戊型肝炎病毒的分子流行病学调查及ORF2区的克隆和表达

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
缩略词(ABBREVIATION)第10-12页
第1章 文献综述第12-28页
   ·戊型肝炎病毒的发现第12页
   ·戊型肝炎的流行病学特点第12-15页
   ·戊型肝炎的临床特征第15页
   ·戊型肝炎病毒的分子生物学特性第15-20页
     ·HEV的形态及理化特性第15-16页
     ·HEV的分类第16页
     ·HEV的血清型及基因型第16-17页
     ·HEV的基因组及各基因的功能第17-18页
     ·HEV类病毒颗粒的结构第18-19页
     ·戊型肝炎病毒抗原表位研究进展第19-20页
   ·HEV的细胞培养第20-21页
   ·HEV的动物模型第21-23页
     ·非人类灵长类戊肝动物模型第21-22页
     ·家猪动物动物模型第22页
     ·其它动物模型第22-23页
   ·HEV疫苗的研制第23-24页
   ·戊型肝炎的诊断方法第24-28页
     ·ELISA第25页
     ·RT-PCR第25-26页
     ·免疫荧光(IFA)第26页
     ·免疫电镜(IEM)第26页
     ·血清中和试验第26-27页
     ·免疫印迹第27页
     ·其他检测方法第27-28页
第2章 研究的目的和意义第28-29页
第3章 华中地区猪戊型肝炎(HEV)的分子流行病学调查第29-45页
   ·试验材料第29-32页
     ·样品的采集与处理第29页
     ·质粒、菌株和细胞系第29页
     ·生化试剂(盒)第29-30页
     ·培养基及溶液的配制第30-32页
   ·试验方法第32-36页
     ·血清学检测第32-33页
     ·RT-nPCR的检测第33-34页
     ·基因的克隆及序列分析第34-36页
     ·HEV的细胞培养及间接免疫荧光第36页
   ·试验结果与分析第36-43页
     ·血清学调查结果第36-37页
     ·RT-PCR结果第37-38页
     ·粪便及肛拭子中HEV RNA的检测结果第38-40页
     ·遗传进化分析第40-41页
     ·接毒细胞的HEV RNA的检测及间接免疫荧光结果第41-43页
   ·讨论第43-45页
第4章 猪戊型肝病毒ORF2全长基因及截短的ORF2基因在大肠杆菌中的表达第45-66页
   ·试验材料第45-48页
     ·主要试剂与材料第45-46页
     ·常用的溶液及培养基的配制第46-48页
   ·试验方法第48-54页
     ·ORF2全长基因及截短的ORF2基因克隆策略第48-49页
     ·基因的克隆第49-52页
     ·表达载体的构建与鉴定第52页
     ·重组蛋白表达与纯化第52-54页
   ·结果与分析第54-62页
     ·目的基因(ORF2、VLP1、VLP2、NE)的克隆第54-58页
     ·原核表达载体pET-ORF2、pET-VLP1、pET-VLP2、pET-NE的构建及鉴定第58页
     ·SDS-PAGE鉴别不同重组菌的表达第58-61页
     ·Western blot分析第61-62页
   ·讨论第62-66页
结论第66-67页
参考文献第67-78页
致谢第78-79页

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