| 摘要 | 第1-7页 |
| abstract | 第7-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-42页 |
| 第一节 人类8型疱疹病毒(HHV-8)概述 | 第13-15页 |
| ·HHV-8/HHV-8的流行病学 | 第13-14页 |
| ·HHV-8的结构及其基因组的特征 | 第14-15页 |
| 第二节 人类8型疱疹病毒的基因表达 | 第15-17页 |
| ·HHV-8在感染细胞中经历潜伏和裂解周期 | 第15页 |
| ·HHV-8潜伏期的基因表达 | 第15-16页 |
| ·HHV-8裂解基因的表达 | 第16-17页 |
| 第三节 复制与转录激活蛋白调控HHV-8从潜伏到裂解的转换 | 第17-27页 |
| ·ORF50/RTA蛋白简介 | 第17-18页 |
| ·ORF50/RTA蛋白活性的调节 | 第18-20页 |
| ·ORF50/RTA蛋白的分子内调节机制 | 第18-19页 |
| ·ORF50/RTA蛋白活性的共价修饰调节 | 第19-20页 |
| ·ORF50/RTA表达的调节 | 第20-21页 |
| ·RTA激活下游靶基因表达的机制 | 第21-26页 |
| ·RTA直接参与病毒DNA复制 | 第26-27页 |
| ·阻断RTA表达和活性成为治疗HHV-8感染性疾病的新靶标 | 第27页 |
| 第四节 影响HHV-8从潜伏向裂解周期转换的重要早期蛋白 | 第27-30页 |
| ·K8/K-bZIP蛋白 | 第27-29页 |
| ·ORF57/Mta蛋白 | 第29-30页 |
| 第五节 干扰素调节因子7是宿主抗病毒防御反应的关键调节因子 | 第30-38页 |
| ·干扰素 | 第30页 |
| ·干扰素调节因子 | 第30-31页 |
| ·干扰素调节因子7 | 第31-34页 |
| ·IRF-7的分子结构 | 第32-33页 |
| ·IRF-7的活性受共价修饰调节 | 第33-34页 |
| ·IRF-7以二聚体的形式发挥转录激活功能 | 第34页 |
| ·IRF-7是宿主免疫防御反应的关键调节因子 | 第34-38页 |
| ·IRF-7介导了抗病毒的IFN信号放大级联 | 第34-36页 |
| ·IRF-3/IRF-7协同调控IFN亚型的差异表达 | 第36页 |
| ·IRF-7从整体上介导依赖于干扰素的防御机制 | 第36-37页 |
| ·IRF-7参与其他细胞应答反应 | 第37页 |
| ·病毒通过抑制IRF-7的活性干扰宿主抗病毒的干扰素反应 | 第37-38页 |
| ·IRF-7抑制病毒基因的表达 | 第38页 |
| 第六节 本文的立论依据 | 第38-42页 |
| ·HHV-8 RTA蛋白调控ORF57基因表达机制的研究现状 | 第38-39页 |
| ·IRF-7抑制RTA对ORF57启动子的激活 | 第39-40页 |
| ·本文的目的及意义 | 第40-42页 |
| 第二章 材料和方法 | 第42-50页 |
| 第一节 实验材料 | 第42-46页 |
| ·细胞 | 第42页 |
| ·菌株 | 第42页 |
| ·质粒 | 第42-44页 |
| ·引物 | 第44-45页 |
| ·PCR引物 | 第44页 |
| ·形成接头的序列 | 第44-45页 |
| ·试剂 | 第45页 |
| ·软件 | 第45-46页 |
| 第二节 实验方法 | 第46-50页 |
| ·PCR扩增目的DNA片段 | 第46页 |
| ·质粒的提取 | 第46页 |
| ·DNA的酶切及连接反应 | 第46页 |
| ·接头的磷酸化 | 第46-47页 |
| ·载体的去磷酸化 | 第47页 |
| ·细胞的培养与转染 | 第47-48页 |
| ·293T细胞的复苏、分板与冻存 | 第47页 |
| ·细胞转染 | 第47-48页 |
| ·荧光素酶活性测定 | 第48页 |
| ·蛋白免疫印迹实验 | 第48-49页 |
| ·Native-page分离非变性蛋白及检测 | 第49-50页 |
| 第三章 结果与分析 | 第50-90页 |
| 第一节 S系列报告质粒对RTA激活和IRF-7抑制的应答 | 第50-61页 |
| ·质粒S1的构建 | 第51-53页 |
| ·质粒S2的构建 | 第53-55页 |
| ·质粒S3的构建 | 第55-56页 |
| ·质粒S4的构建 | 第56页 |
| ·质粒S5的构建 | 第56页 |
| ·质粒S6的构建 | 第56-60页 |
| ·S系列质粒对RTA激活和IRF-7抑制的应答 | 第60-61页 |
| 第二节 L系列质粒对RTA激活和IRF-7抑制的应答 | 第61-68页 |
| ·质粒L1的构建 | 第62-63页 |
| ·质粒L2的构建 | 第63-64页 |
| ·质粒L3的构建 | 第64-65页 |
| ·质粒L4的构建 | 第65-66页 |
| ·质粒L5的构建 | 第66-67页 |
| ·L系列质粒对RTA激活和IRF-7抑制的应答 | 第67-68页 |
| 第三节 C系列质粒对RTA激活和IRF-7抑制的应答 | 第68-87页 |
| ·质粒C1的构建 | 第70-72页 |
| ·质粒C2的构建 | 第72-74页 |
| ·质粒C3的构建 | 第74-76页 |
| ·质粒C4的构建 | 第76-78页 |
| ·质粒C5的构建 | 第78-80页 |
| ·质粒C6的构建 | 第80-82页 |
| ·质粒C7的构建 | 第82-84页 |
| ·质粒C8的构建 | 第84-86页 |
| ·C系列质粒对RTA激活和IRF-7抑制的应答 | 第86-87页 |
| 第四节 Native-page检测IRF-7的多聚化 | 第87-90页 |
| 第四章 讨论 | 第90-96页 |
| ·RTA激活ORF57基因是HHV-8裂解复制中的关键环节 | 第90-91页 |
| ·ORF57启动子中的多个RRE共同介导RTA的激活 | 第91-92页 |
| ·IRF-7能通过结合RRE2抑制RTA对上游和下游RRE的激活 | 第92页 |
| ·应答元件的数目和元件间的距离影响RTA激活和IRF-7抑制的效果 | 第92-93页 |
| ·IRF-7存在多聚化形式 | 第93-94页 |
| ·展望 | 第94-96页 |
| 第五章 结论 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 附录 | 第112-114页 |
