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刺参体色发生生理特征与调控机制的基础研究

摘要第5-8页
abstract第8-11页
第1章 绪论第18-34页
    1.1 色素沉积及体色多态性研究进展第18-23页
        1.1.1 色素细胞及其所含色素是决定动物体色的关键因素第19-20页
        1.1.2 动物体色研究已深入至分子水平并进入基因编辑时代第20-22页
        1.1.3 色素研究的应用前景第22-23页
    1.2 棘皮动物色素调控研究进展第23-28页
        1.2.1 色素研究进展第23-26页
        1.2.2 色素合成关键基因研究进展第26-28页
    1.3 不同体色刺参研究进展第28-31页
        1.3.1 不同体色刺参的生理特征及生态适应性第28-30页
        1.3.2 刺参色素沉积及体色多态性调控机制亟待系统深入研究第30-31页
    1.4 研究目的、意义与研究思路第31-33页
        1.4.1 研究目的与意义第31-32页
        1.4.2 科学问题第32页
        1.4.3 研究内容与技术路线第32-33页
        1.4.4 预期成果第33页
    1.5 本章小结第33-34页
第2章 刺参色素种类、含量及黑色素细胞比较研究第34-46页
    2.1 研究背景第34-36页
    2.2 材料与方法第36-39页
        2.2.1 样品采集与处理第36页
        2.2.2 透射电镜切片的制作过程第36页
        2.2.3 黑色素分析第36-37页
        2.2.4 虾青素分析第37页
        2.2.5 β-胡萝卜素分析第37页
        2.2.6 鸟嘌呤分析第37页
        2.2.7 蝶酸分析第37-38页
        2.2.8 玉米黄素和叶黄素分析第38页
        2.2.9 黄体酮分析第38页
        2.2.10 番茄红素分析第38页
        2.2.11 数据分析第38-39页
    2.3 实验结果第39-42页
        2.3.1 白刺参色素种类少于其他色型刺参第39页
        2.3.2 刺参色型越深则色素含量越高第39-41页
        2.3.3 黑色素小体分泌到细胞外的黑色素颗粒含量第41-42页
    2.4 讨论第42-43页
        2.4.1 色素是刺参体色形成的一项决定性因素第42-43页
        2.4.2 黑色素对于刺参体色起到关键作用第43页
    2.5 本章小结第43-46页
第3章 刺参体色发生各阶段生长生理特性比较研究第46-58页
    3.1 研究背景第46-47页
    3.2 材料与方法第47-49页
        3.2.1 刺参养殖及样品收集处理第47页
        3.2.2 生长率、成活率及色素沉积第47-48页
        3.2.3 组织切片的制作与观察第48-49页
        3.2.4 透射电镜切片的制作过程第49页
        3.2.5 数据分析第49页
    3.3 实验结果第49-55页
        3.3.1 成活率和生长率第49-52页
        3.3.2 组织学观察分析第52-53页
        3.3.3 色素细胞第53-55页
    3.4 讨论第55-57页
        3.4.1 不同色型刺参间的生长差异第55-56页
        3.4.2 不同色型刺参间的黑色素细胞、黑色素差异第56-57页
    3.5 本章小结第57-58页
第4章 刺参体色发生三阶段转录组分析第58-92页
    4.1 研究背景第58-59页
    4.2 材料与方法第59-65页
        4.2.1 样品收集及处理第59-61页
        4.2.2 RNA提取、文库制备及Illumina测序第61-62页
        4.2.3 转录组数据质控和组装第62页
        4.2.4 基因功能注释第62页
        4.2.5 差异表达基因鉴定及富集分析第62-63页
        4.2.6 Real time PCR鉴定第63-65页
        4.2.7 SSR和 SNP检测第65页
    4.3 实验结果第65-86页
        4.3.1 De novo转录组测序和组装第65-66页
        4.3.2 转录组数据的功能注释和分类第66-72页
        4.3.3 白、青、紫刺参色素沉积过程差异表达基因的鉴定与验证第72-75页
        4.3.4 差异表达基因的功能富集第75-84页
        4.3.5 SSRs和SNPs的鉴定第84-86页
    4.4 讨论第86-90页
        4.4.1 黑色素合成和黑素瘤第87-88页
        4.4.2 Wnt信号通路、Notch信号通路、c AMP信号通路和Ras信号通路第88-89页
        4.4.3 上皮细胞发育和表皮生长因子应答第89页
        4.4.4 生长因子的活性和生长第89-90页
    4.5 本章小结第90-92页
第5章 紫刺参体色发生三阶段蛋白质组学分析第92-110页
    5.1 研究背景第92-93页
    5.2 材料与方法第93-96页
        5.2.1 样品收集及处理第93-94页
        5.2.2 蛋白质提取,消化和IBT标记第94页
        5.2.3 肽分级分离和LC-MS/ MS分析第94-95页
        5.2.4 蛋白质鉴定和定量第95页
        5.2.5 Gene Ontology(GO)和 Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)通路分析第95-96页
        5.2.6 差异表达蛋白的验证第96页
    5.3 实验结果第96-104页
        5.3.1 蛋白质组数据总体分析第96-100页
        5.3.2 差异蛋白GO和 KEGG通路富集分析第100-103页
        5.3.3 Real time PCR验证第103-104页
    5.4 讨论第104-108页
        5.4.1 黑色素合成、黑色素小体、黑素瘤和色素生物合成第104-106页
        5.4.2 表皮发育和Ras信号通路第106-107页
        5.4.3 Wnt信号通路、紫外线应对通路和酪氨酸代谢第107-108页
    5.5 本章小结第108-110页
第6章 刺参体色发生时阶段代谢组分析第110-124页
    6.1 研究背景第110-111页
    6.2 材料与方法第111-112页
        6.2.1 样品收集第111页
        6.2.2 样品处理及代谢物提取第111页
        6.2.3 UHPLC-QTOF-MS分析第111-112页
        6.2.4 数据处理及代谢物鉴定第112页
        6.2.5 差异代谢物筛选第112页
    6.3 实验结果第112-121页
        6.3.1 UHPLC-QTOF-MS分析结果概述第112-113页
        6.3.2 不同色型刺参间差异代谢物比较分析第113-119页
        6.3.3 差异代谢物KEGG富集分析第119-121页
    6.4 讨论第121-122页
    6.5 本章小结第122-124页
第7章 MITF基因在不同色型刺参中的差异研究第124-148页
    7.1 研究背景第124-126页
    7.2 材料与方法第126-131页
        7.2.1 样品收集第126页
        7.2.2 Real time PCR分析第126-127页
        7.2.3 原位杂交分析第127-128页
        7.2.4 Western Blot分析第128页
        7.2.5 免疫组化分析第128-129页
        7.2.6 多态性分析第129-130页
        7.2.7 ChIP-seq分析第130-131页
    7.3 实验结果第131-143页
        7.3.1 刺参体壁MITF基因表达分析第131-134页
        7.3.2 MITF基因SNP多态性位点及比较分析第134-137页
        7.3.3 MITF的结合序列分析第137-143页
    7.4 讨论第143-145页
    7.5 本章小结第145-148页
第8章 不同色型刺参杂交、自交家系子代分析第148-154页
    8.1 研究背景第148-149页
    8.2 材料与方法第149-150页
        8.2.1 材料收集及暂养驯化第149页
        8.2.2 实验设计第149-150页
        8.2.3 养殖管理第150页
        8.2.4 实验取样第150页
        8.2.5 体重及体色发生阶段分析第150页
    8.3 实验结果第150-152页
        8.3.1 家系子代体色统计分析第150-151页
        8.3.2 家系子代体重统计分析第151-152页
    8.4 讨论第152-153页
    8.5 本章小结第153-154页
第9章 总结与展望第154-158页
    9.1 研究总结第154页
    9.2 创新性第154-155页
    9.3 存在问题第155页
    9.4 研究展望第155-158页
参考文献第158-180页
致谢第180-184页
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果第184-187页

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