| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 PED流行病学特征 | 第11-12页 |
| 1.2 PEDV病原学特性 | 第12-13页 |
| 1.2.1 PEDV的分类及理化性质 | 第12-13页 |
| 1.2.2 PEDV体外培养特性 | 第13页 |
| 1.3 PEDV基因组结构特征 | 第13-16页 |
| 1.3.1 PEDV非编码区生物学功能 | 第13-14页 |
| 1.3.2 PEDV非结构蛋白生物学功能 | 第14-15页 |
| 1.3.3 PEDV结构蛋白生物学功能 | 第15-16页 |
| 1.4 PEDV的致病机理 | 第16页 |
| 1.5 PED临床症状与病理变化 | 第16-17页 |
| 1.6 PED的诊断与防治 | 第17-18页 |
| 1.6.1 PED的诊断 | 第17页 |
| 1.6.2 PED的防治 | 第17-18页 |
| 1.7 研究目的和意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 病料 | 第19页 |
| 2.1.2 细胞、毒株和菌株 | 第19页 |
| 2.1.3 主要实验试剂及培养基的配制 | 第19-20页 |
| 2.1.4 实验仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.1.5 实验所用到的鉴定引物 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-29页 |
| 2.2.1 疑似病料的采集和处理 | 第21-22页 |
| 2.2.2 病理组织学切片制作与观察 | 第22页 |
| 2.2.3 病毒样品的RT-PCR鉴定 | 第22-23页 |
| 2.2.4 猪小肠上皮细胞（IPEC-J2）的病毒分离鉴定 | 第23-24页 |
| 2.2.5 PEDV HLJ株间接免疫荧光鉴定 | 第24页 |
| 2.2.6 PEDV HLJ株透射电镜观察 | 第24页 |
| 2.2.7 PEDV HLJ株毒力测定和生长曲线测定 | 第24页 |
| 2.2.8 PEDV HLJ株全基因组片段RT-PCR分段扩增 | 第24-25页 |
| 2.2.9 目的基因的克隆及序列测定 | 第25-27页 |
| 2.2.10 PEDV全基因组序列的生物信息学分析 | 第27页 |
| 2.2.11 PEDV HLJ株S蛋白的结构分析 | 第27-28页 |
| 2.2.12 数据统计 | 第28-29页 |
| 3 结果 | 第29-47页 |
| 3.1 临床症状和病理组织学观察 | 第29页 |
| 3.2 疑似PEDV病料RT-PCR检测 | 第29-30页 |
| 3.3 PEDV的分离鉴定 | 第30-33页 |
| 3.3.1 细胞病变观察 | 第30页 |
| 3.3.2 细胞上清液RT-PCR鉴定 | 第30-32页 |
| 3.3.3 PEDV HLJ株的间接免疫荧光鉴定 | 第32页 |
| 3.3.4 PEDV HLJ株的电镜观察 | 第32-33页 |
| 3.4 PEDV HLJ株TCID_(50)的测定和生长曲线 | 第33页 |
| 3.5 PEDV HLJ株全基因组RT-PCR分段扩增 | 第33-34页 |
| 3.6 PEDV HLJ株各基因片段重组质粒PCR鉴定 | 第34页 |
| 3.7 PEDV HLJ株生物信息学分析 | 第34-47页 |
| 3.7.1 全基因组序列拼接 | 第34-35页 |
| 3.7.2 基因组结构分析 | 第35-38页 |
| 3.7.3 序列同源性分析 | 第38-40页 |
| 3.7.4 系统进化树分析 | 第40-43页 |
| 3.7.5 PEDV S蛋白结构分析 | 第43-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 4.1 PEDV HLJ株的分离鉴定 | 第47页 |
| 4.2 PEDV全基因组分段扩增 | 第47-48页 |
| 4.3 PEDV HLJ株生物信息学分析 | 第48页 |
| 4.4 PEDV S蛋白结构分析 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第59页 |
