摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第15-43页 |
1.1 植物花器官发育研究现状 | 第15-27页 |
1.1.1 影响花器官起始的途径及相关基因 | 第15-21页 |
1.1.2 花发育的模式及相关基因 | 第21-27页 |
1.2 植物花器官逆转及研究进展 | 第27-38页 |
1.2.1 植物花器官逆转 | 第27-30页 |
1.2.2 影响花器官逆转的因素 | 第30-35页 |
1.2.3 花器官逆转相关基因研究 | 第35-38页 |
1.3 柳枝稷的研究与利用现状 | 第38-40页 |
1.3.1 柳枝稷作为能源作物的研究进展 | 第39页 |
1.3.2 柳枝稷的生物学研究进展 | 第39-40页 |
1.4 转录组技术在功能基因挖掘中的应用 | 第40-41页 |
1.5 本研究的目的、意义及技术路线 | 第41-43页 |
1.5.1 研究的目的与意义 | 第41-42页 |
1.5.2 技术路线 | 第42-43页 |
第二章 柳枝稷体外花器官逆转诱导及鉴定 | 第43-56页 |
引言 | 第43页 |
2.1 试验材料 | 第43-44页 |
2.1.1 供试植物材料 | 第43页 |
2.1.2 试剂与耗材 | 第43页 |
2.1.3 仪器设备 | 第43-44页 |
2.2 试验方法 | 第44-45页 |
2.2.1 柳枝稷植株培养及外植体取材 | 第44页 |
2.2.2 柳枝稷体外组织培养 | 第44页 |
2.2.3 柳枝稷穗芽解剖结构分析 | 第44页 |
2.2.4 柳枝稷穗芽组织学分析 | 第44-45页 |
2.2.5 柳枝稷穗芽细胞学分析 | 第45页 |
2.3 结果与分析 | 第45-53页 |
2.3.1 柳枝稷幼穗体外培养 | 第45-47页 |
2.3.2 体外培养柳枝稷幼穗解剖学分析 | 第47-50页 |
2.3.3 不同类型再生芽的组织学特征对比与分析 | 第50-52页 |
2.3.4 不同类型再生芽的细胞学特征对比与分析 | 第52-53页 |
2.4 讨论与结论 | 第53-56页 |
2.4.1 FL芽来自花器官逆转 | 第53-54页 |
2.4.2 体外培养和6-BA可能是影响花器官逆转的关键因素 | 第54页 |
2.4.3 幼嫩的花器官更容易发生逆转 | 第54-56页 |
第三章 利用RNA-seq研究柳枝稷体外花器官逆转相关基因 | 第56-81页 |
引言 | 第56页 |
3.1 试验材料 | 第56-59页 |
3.1.1 供试植物材料 | 第56页 |
3.1.2 试剂与耗材 | 第56-57页 |
3.1.3 仪器设备 | 第57页 |
3.1.4 载体与菌株 | 第57-59页 |
3.2 试验方法 | 第59-66页 |
3.2.1 柳枝稷体外培养及取材 | 第59页 |
3.2.2 RNA提取及m RNA测序 | 第59页 |
3.2.3 基因表达分析及差异表达基因挖掘 | 第59-61页 |
3.2.4 差异表达基因功能注释 | 第61页 |
3.2.5 部分差异表达基因的qPCR定量验证 | 第61-62页 |
3.2.6 目的基因ORF扩增及过表达载体构建 | 第62-65页 |
3.2.7 拟南芥沾花法转基因 | 第65-66页 |
3.3 结果与分析 | 第66-78页 |
3.3.1 柳枝稷幼穗体外培养及取材时期的选择 | 第66-67页 |
3.3.2 RNA测序及新转录本的挖掘 | 第67-69页 |
3.3.3 差异表达基因鉴定 | 第69-70页 |
3.3.4 差异表达基因的qPCR验证 | 第70-71页 |
3.3.5 差异表达基因的Gene Ontology注释 | 第71-72页 |
3.3.6 差异表达基因的COG注释 | 第72-73页 |
3.3.7 差异表达基因的KEGG注释 | 第73-75页 |
3.3.8 差异表达基因中的转录因子分析 | 第75页 |
3.3.9 部分差异表达基因功能验证 | 第75-78页 |
3.4 讨论与结论 | 第78-81页 |
3.4.1 转录组分析获得了517 个与花逆转相关的基因 | 第78页 |
3.4.2 花器官正向发育与花逆转的关系 | 第78-79页 |
3.4.3 外源细胞分裂素对其他激素的影响 | 第79-80页 |
3.4.4 花逆转是多个生物学进程共同作用的结果 | 第80-81页 |
第四章 柳枝稷花逆转相关基因PvSTK1 的功能研究 | 第81-99页 |
引言 | 第81页 |
4.1 试验材料 | 第81-82页 |
4.1.1 供试植物材料 | 第81页 |
4.1.2 试剂与耗材 | 第81页 |
4.1.3 仪器设备 | 第81-82页 |
4.1.4 载体与菌株 | 第82页 |
4.2 试验方法 | 第82-84页 |
4.2.1 PvSTK1 基因的生物信息学分析 | 第82-83页 |
4.2.2 PvSTK1 的表达模式分析 | 第83页 |
4.2.3 拟南芥花粉活力鉴定 | 第83页 |
4.2.4 拟南芥子房发育观察 | 第83页 |
4.2.5 PvSTK1 在拟南芥中的表达及亚细胞定位 | 第83-84页 |
4.2.6 转PvSTK1 拟南芥中基因表达模式分析 | 第84页 |
4.2.7 不同浓度6-BA对拟南芥花发育的影响 | 第84页 |
4.3 结果与分析 | 第84-95页 |
4.3.1 PvSTK1 的克隆及生物信息学分析 | 第84-86页 |
4.3.2 PvSTK1 的表达模式分析 | 第86-87页 |
4.3.3 PvSTK1 基因过量表达对拟南芥生长发育的影响 | 第87-90页 |
4.3.4 PvSTK1 蛋白的亚细胞定位 | 第90页 |
4.3.5 过表达PvSTK1 对拟南芥基因表达模式的影响 | 第90-92页 |
4.3.6 体外施加6-BA对拟南芥花发育的影响 | 第92-94页 |
4.3.7 体外施加6-BA对拟南芥基因表达模式的影响 | 第94-95页 |
4.4 讨论与结论 | 第95-99页 |
4.4.1 PvSTK1 是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 | 第95-96页 |
4.4.2 PvSTK1 通过降低开花促进基因、提高开花抑制基因表达量影响拟南芥花发育 | 第96-97页 |
4.4.3 PvSTK1 与高浓度6-BA抑制拟南芥花发育的异同点分析 | 第97页 |
4.4.4 PvSTK1 是新的抑制花发育的基因 | 第97-99页 |
第五章 结论 | 第99-101页 |
附录 | 第101-106页 |
参考文献 | 第106-120页 |
致谢 | 第120-121页 |
个人简历 | 第121页 |