中文摘要 | 第4-8页 |
ABSTRACT | 第8-12页 |
第一章 文献综述 | 第17-35页 |
1.1 组学的研究进展及应用 | 第17-24页 |
1.1.1 转录组与转录组学 | 第18-21页 |
1.1.2 蛋白质组学 | 第21-23页 |
1.1.3 代谢组等其它类别的组学 | 第23-24页 |
1.2 多倍体动物育性机制的研究 | 第24-27页 |
1.2.1 四倍体鱼育性的研究及应用 | 第24-26页 |
1.2.2 三倍体鱼育性的研究及应用 | 第26-27页 |
1.3 转录组学在精子发生中的研究及进展 | 第27-29页 |
1.4 蛋白质组学在精子蛋白质组成的研究 | 第29-31页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第31-35页 |
第二章 雄性三倍体不育分子机制的研究 | 第35-84页 |
2.1 实验材料 | 第35-37页 |
2.1.1 材料 | 第35页 |
2.1.2 主要药品、试剂和酶 | 第35-36页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第36-37页 |
2.2 实验方法 | 第37-53页 |
2.2.1 构建cDNA文库及转录组测序 | 第37-47页 |
2.2.2 转录组数据生物信息学分析 | 第47-51页 |
2.2.3 实时荧光定量PCR分析 | 第51-52页 |
2.2.4 精巢组织的电镜观察 | 第52-53页 |
2.3 实验结果与分析 | 第53-76页 |
2.3.1 不同倍性鱼精巢RNA-seq测序与组装结果 | 第53-55页 |
2.3.2 不同倍性鱼精巢转录基因注释结果统计 | 第55-62页 |
2.3.3 二、三倍体鱼差异表达基因 | 第62-64页 |
2.3.4 四、三倍体鱼差异表达基因 | 第64-65页 |
2.3.5 二、四倍体与三倍体鱼共同差异表达基因 | 第65-69页 |
2.3.6 鞭毛合成基因在三种不同倍性鱼的表达模式 | 第69-71页 |
2.3.7 转录因子在三种不同倍性鱼的表达模式 | 第71-73页 |
2.3.8 实时荧光定量PCR对三倍体精巢中差异表达基因的验证 | 第73-75页 |
2.3.9 不同倍性鱼精巢组织电镜观察 | 第75-76页 |
2.4 讨论 | 第76-84页 |
2.4.1 三种鱼精巢基因表达模式分析 | 第76-77页 |
2.4.2 三倍体中差异表达基因对精子发生的影响 | 第77-78页 |
2.4.3 三倍体中鞭毛合成基因差异表达对精子发生的影响 | 第78-82页 |
2.4.4 三倍体中转录因子差异表达对精子发生的影响 | 第82-84页 |
第三章 雄性四倍体鱼繁殖特性改变的分子机制研究 | 第84-125页 |
3.1 二、四倍体鱼精巢转录组分析 | 第84-92页 |
3.1.1 实验材料 | 第84页 |
3.1.1.1 材料 | 第84页 |
3.1.1.2 主要药品、试剂和酶 | 第84页 |
3.1.1.3 主要仪器设备 | 第84页 |
3.1.2 实验方法 | 第84页 |
3.1.3 实验结果与分析 | 第84-88页 |
3.1.3.1 二、四倍体鱼差异表达基因 | 第84-86页 |
3.1.3.2 二、四倍体鱼精巢差异表达基因的注释 | 第86-88页 |
3.1.4 讨论 | 第88-92页 |
3.1.4.1 四倍体中差异表达基因可能对精子发生的影响 | 第88-92页 |
3.2 雄性四倍体鱼精子和鲤鱼单倍体精子蛋白质组学分析 | 第92-125页 |
3.2.1 实验材料 | 第92-97页 |
3.2.1.1 材料 | 第92页 |
3.2.1.2 主要药品、试剂和酶 | 第92-93页 |
3.2.1.3 主要配制溶液方法 | 第93-97页 |
3.2.1.4 主要仪器设备 | 第97页 |
3.2.2 实验方法 | 第97-106页 |
3.2.2.1 精液中精子的分离和收集 | 第97-98页 |
3.2.2.2 不同倍性精子DNA含量测定 | 第98-99页 |
3.2.2.3 不同倍性精子活力测定 | 第99页 |
3.2.2.4 不同倍性精子总蛋白的提取和纯化 | 第99-100页 |
3.2.2.5 不同倍性精子提取总蛋白浓度的测定 | 第100-101页 |
3.2.2.6 SDS-PAGE双向凝胶电泳 | 第101-106页 |
3.2.3 实验结果与分析 | 第106-116页 |
3.2.3.1 不同倍性精子DNA含量检测 | 第106-107页 |
3.2.3.2 不同倍性精子活力检测 | 第107-108页 |
3.2.3.3 两种精子的差异表达蛋白2-DE图谱的构建及分析 | 第108-110页 |
3.2.3.4 两种倍性精子差异蛋白质谱结果 | 第110-112页 |
3.2.3.5 转录组CDS序列进行差异蛋白质进一步鉴定 | 第112-115页 |
3.2.3.6 差异蛋白质的注释分析 | 第115-116页 |
3.2.4 讨论 | 第116-125页 |
3.2.4.1 不同倍性精子生理学差异 | 第116-117页 |
3.2.4.2 两种不同倍性精子差异蛋白质功能分析 | 第117-125页 |
第四章 总结 | 第125-130页 |
参考文献 | 第130-152页 |
博士学习期间撰写、发表的主要论文 | 第152-153页 |
致谢 | 第153-155页 |