摘要 | 第3-8页 |
ABSTRACT | 第8-14页 |
第一章 前言 | 第17-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-39页 |
2.1 实验材料 | 第22-26页 |
2.1.1 实验动物 | 第22页 |
2.1.2 主要实验仪器 | 第22-24页 |
2.1.3 实验耗材 | 第24-25页 |
2.1.4 主要实验试剂 | 第25-26页 |
2.2 主要溶液配制 | 第26-27页 |
2.3 细胞培养 | 第27-30页 |
2.3.1 THP1细胞培养 | 第27-28页 |
2.3.2 原代细胞培养 | 第28-30页 |
2.4 实验分组及给药 | 第30页 |
2.5 ELISA检测细胞上清TNF-α表达 | 第30-31页 |
2.6 Western-Blot检测EGFR的磷酸化蛋白水平 | 第31-34页 |
2.6.1 收集蛋白样品(所有操作均在冰上进行) | 第31-32页 |
2.6.2 蛋白定量 | 第32页 |
2.6.3 样品蛋白变性 | 第32页 |
2.6.4 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第32-34页 |
2.7 siRNA基因沉默mig6表达 | 第34-35页 |
2.7.1 mig6的siRNA oligo序列 | 第34页 |
2.7.2 siRNA转染及给药 | 第34-35页 |
2.8 PCR检测细胞mig6表达水平 | 第35-38页 |
2.8.1 RNA提取(Trizol提取RNA法) | 第35-36页 |
2.8.2 逆转录PCR | 第36-37页 |
2.8.3 荧光实时定量PCR(Q-PCR) | 第37-38页 |
2.9 统计学分析 | 第38-39页 |
第三章 实验结果 | 第39-45页 |
3.1 LPS不同作用时间对原代巨噬细胞mig6的影响 | 第39-40页 |
3.2 抑制EGFR磷酸化对LPS诱导BMDM细胞mig6表达的影响 | 第40-41页 |
3.3 抑制mig6表达对LPS诱导BMDM细胞中EGFR的磷酸化和TNF-α生成的影响 | 第41-43页 |
3.4 mig6过表达对LPS诱导BMDM细胞生成TNF-α的影响 | 第43-45页 |
第四章 实验讨论 | 第45-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-71页 |
英文缩略语名词对照表 | 第71-72页 |
攻读学位期间的成果 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |