| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 立题背景 | 第11-12页 |
| 1.2 高等植物中的AsA合成途径 | 第12-13页 |
| 1.3 GGP基因及其启动子表达调控的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.4 植物启动子 | 第16-20页 |
| 1.4.1 植物启动子的克隆方法 | 第17-18页 |
| 1.4.1.1 利用基因组文库筛选启动子 | 第17页 |
| 1.4.1.2 利用启动子探针质粒载体筛选启动子 | 第17页 |
| 1.4.1.3 利用启动子捕获方法分离和鉴别启动子 | 第17页 |
| 1.4.1.4 利用PCR技术克隆启动子 | 第17-18页 |
| 1.4.2 植物启动子的功能分析方法 | 第18页 |
| 1.4.3 植物启动子的功能验证 | 第18-20页 |
| 1.5 研究的目的意义及主要内容 | 第20-21页 |
| 1.5.1 研究的目的意义 | 第20页 |
| 1.5.2 研究的主要内容 | 第20-21页 |
| 1.5.2.1 刺梨GGP基因和启动子序列的克隆及其结构分析.. | 第20页 |
| 1.5.2.2 刺梨GGP启动子及其不同部分的活性分析 | 第20页 |
| 1.5.2.3 刺梨GGP启动子主要作用元件的功能验证 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-35页 |
| 2.1 试验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 菌种及质粒 | 第21-22页 |
| 2.1.3 主要试验仪器设备 | 第22页 |
| 2.1.4 主要化学试剂 | 第22页 |
| 2.2 试验设计 | 第22-24页 |
| 2.2.1 刺梨GGP基因和启动子全长序列的克隆及其序列分析 | 第22页 |
| 2.2.2 刺梨GGP启动子全长的活性分析 | 第22-23页 |
| 2.2.3 刺梨GGP启动子缺失表达载体的构建及其活性分析 | 第23页 |
| 2.2.4 刺梨GGP启动子主要作用元件的功能验证 | 第23-24页 |
| 2.2.4.1 光响应元件的功能验证 | 第23页 |
| 2.2.4.2 温度响应元件的功能验证 | 第23-24页 |
| 2.2.4.3 ABA和MeJA激素响应元件的功能验证 | 第24页 |
| 2.3 试验方法 | 第24-35页 |
| 2.3.1 核酸的提取 | 第24-25页 |
| 2.3.2 First-StrandcDNA合成 | 第25页 |
| 2.3.3 GGP基因gDNA的克隆 | 第25-26页 |
| 2.3.4 GGP基因启动子的克隆 | 第26-27页 |
| 2.3.5 GGP基因全长启动子的构建及其活性检测 | 第27-30页 |
| 2.3.5.1 表达载体的构建 | 第27-29页 |
| 2.3.5.2 GV3101农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第29页 |
| 2.3.5.3 农杆菌介导的启动子融合载体在烟草中的瞬时表达. | 第29-30页 |
| 2.3.6 GGP基因启动子缺失体构建、鉴定及活性检测 | 第30-31页 |
| 2.3.7 双荧光素酶活性的测定 | 第31-32页 |
| 2.3.7.1 所用试剂及储存方法 | 第31-32页 |
| 2.3.7.2 操作方法 | 第32页 |
| 2.3.8 AsA测定 | 第32页 |
| 2.3.9 胁迫处理 | 第32-33页 |
| 2.3.10 刺梨果实中在不同处理下GGP基因的表达分析 | 第33-34页 |
| 2.3.11 试验数据处理方法 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-51页 |
| 3.1 核酸的浓度和纯度 | 第35页 |
| 3.2 GGP基因gDNA克隆与序列分析 | 第35-36页 |
| 3.3 GGP基因启动子克隆与序列分析 | 第36-40页 |
| 3.4 GGP启动子及其缺失表达载体的构建 | 第40-41页 |
| 3.5 烟草中GGP启动子全长及缺失体活性分析 | 第41-42页 |
| 3.6 不同胁迫处理下烟草中GGP启动子全长及缺失体活性分析 | 第42-46页 |
| 3.7 刺梨果实在不同处理下GGP基因表达及其AsA含量变化 | 第46-51页 |
| 3.7.1 刺梨果实在不同光照条件下GGP基因表达及AsA含量变化 | 第46-47页 |
| 3.7.2 刺梨果实在不同温度处理下GGP基因表达及AsA含量变化 | 第47-49页 |
| 3.7.3 刺梨果实在两种激素处理下GGP基因表达及AsA含量变化 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-55页 |
| 4.1 GGP 基因及其启动子在调控 As A 方面的作用 | 第51-52页 |
| 4.2 光照对刺梨GGP基因及其启动子的调控 | 第52-53页 |
| 4.3 温度对刺梨GGP基因及其启动子的调控 | 第53-54页 |
| 4.4 MeJA与ABA对刺梨GGP基因及其启动子的调控 | 第54-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 缩略词表 | 第63-64页 |
| 在读硕士期间发表的文章 | 第64-65页 |
| 附录 | 第65-67页 |
