| 致谢 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文和符号清单 | 第13-15页 |
| 文献综述 | 第15-20页 |
| 引言 | 第20-21页 |
| 1 材料与方法 | 第21-49页 |
| 1.1 材料 | 第21-28页 |
| 1.1.1 样品 | 第21页 |
| 1.1.2 载体、菌株和实验动物 | 第21-22页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第22-23页 |
| 1.1.4 主要仪器 | 第23页 |
| 1.1.5 溶液配制 | 第23-27页 |
| 1.1.6 培养基 | 第27页 |
| 1.1.7 引物 | 第27-28页 |
| 1.2 方法 | 第28-49页 |
| 1.2.1 弓形虫各发育时期虫体的培养和收集 | 第28-30页 |
| 1.2.2 弓形虫RON5基因部分序列的克隆与生物信息学分析 | 第30-35页 |
| 1.2.3 Real-timePCR分析TgRON5基因在速殖子、包囊等不同阶段表达情况 | 第35-38页 |
| 1.2.4 弓形虫RON5蛋白表达差异研究 | 第38-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-61页 |
| 2.1 弓形虫RON5基因部分序列分析 | 第49-50页 |
| 2.1.1 弓形虫RON5基因部分序列的扩增结果 | 第49页 |
| 2.1.2 弓形虫RON5基因部分序列变异度分析结果 | 第49-50页 |
| 2.1.3 遗传进化树分析结果 | 第50页 |
| 2.2 弓形虫RON5蛋白的生物信息学分析 | 第50-52页 |
| 2.2.1 RON5蛋白的亲/疏水性分析 | 第50-51页 |
| 2.2.2 RON5蛋白跨膜结构域 | 第51页 |
| 2.2.3 RON5蛋白的二级结构 | 第51-52页 |
| 2.2.4 RON5蛋白的B细胞抗原表位预测 | 第52页 |
| 2.3 Real-timePCR检测TgRON5基因在弓形虫不同阶段表达差异性 | 第52-54页 |
| 2.3.1 目的基因与内参基因片段标准曲线的建立、特异性鉴定 | 第52-53页 |
| 2.3.2 不同发育时期弓形虫TgRON5基因的相对表达量 | 第53-54页 |
| 2.4 弓形虫RON5蛋白表达差异研究 | 第54-61页 |
| 2.4.1 RON5和ACT1基因编码区序列的扩增结果 | 第54-55页 |
| 2.4.2 重组质粒pMD-18T-RON5c/19T-ACT1的PCR与酶切鉴定 | 第55-56页 |
| 2.4.3 重组表达质粒pET30a-RON5c/ACT1的PCR与酶切鉴定 | 第56页 |
| 2.4.4 BL21-pET30a-RON5c/ACT1的原核表达、纯化与鉴定 | 第56-58页 |
| 2.4.5 多克隆抗体的纯化 | 第58-59页 |
| 2.4.6 弓形虫RON5蛋白的表达差异 | 第59-61页 |
| 3 讨论 | 第61-65页 |
| 3.1 弓形虫RON5基因变异情况分析 | 第61页 |
| 3.2 RON5蛋白结构的预测与分析 | 第61-62页 |
| 3.3 弓形虫不同发育时期RON5的表达差异分析 | 第62-63页 |
| 3.4 Westernblot检测RON5蛋白的表达差异 | 第63-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 附录 | 第75-76页 |
| 作者简介 | 第76页 |
