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基于胞内钙信号研究生理氧分压对原位软骨细胞和胞外基质沉积的影响

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-8页
英文缩略词对照表第13-15页
1 绪论第15-29页
    1.1 问题的提出及研究意义第15-16页
    1.2 国内外研究现状第16-25页
        1.2.1 软骨组织的结构特点第16-17页
        1.2.2 软骨组织中的氧分压第17-19页
        1.2.3 软骨细胞中的钙信号特点第19-21页
        1.2.4 基于深度学习的胞内钙信号检测第21-25页
    1.3 课题的研究目的及研究内容第25-29页
        1.3.1 课题的研究目的与意义第25页
        1.3.2 课题的研究内容第25-26页
        1.3.3 课题的技术路线第26-27页
        1.3.4 课题的特色及创新点第27-29页
2 原位软骨细胞钙信号检测实验和胞外基质检测实验的方法构建第29-47页
    2.1 引言第29页
    2.2 实验材料与仪器设备第29-32页
        2.2.1 主要实验仪器及耗材第29-30页
        2.2.2 主要实验试剂第30-31页
        2.2.3 主要实验试剂配制第31-32页
    2.3 实验方法第32-39页
        2.3.1 软骨组织切片样品制作第32-33页
        2.3.2 原位软骨细胞活性检测实验第33页
        2.3.3 胞内自发钙响应实验第33-36页
        2.3.4 冰冻切片第36页
        2.3.5 免疫组化第36-37页
        2.3.6 阿尔新蓝(AlcianBlue)8GX染色第37页
        2.3.7 COLL-Ⅱ和GAG的半定量计算第37-38页
        2.3.8 数据处理与统计分析第38-39页
    2.4 实验结果第39-43页
        2.4.1 原位软骨细胞活性检测第39页
        2.4.2 实时自发钙响应观察结果第39-40页
        2.4.3 COLL-Ⅱ和GAG染色实验的观察结果第40页
        2.4.4 软骨组织结构分层第40-41页
        2.4.5 原位软骨细胞自发钙响应的计算结果第41-43页
        2.4.6 胞外基质中COLL-Ⅱ和GAG计算结果第43页
    2.5 分析与讨论第43-45页
        2.5.1 自发钙响应实验第43-44页
        2.5.2 COLL-Ⅱ和GAG合成代谢实验胞外基质区域的选择第44-45页
        2.5.3 软骨组织胞外基质中COLL-Ⅱ和GAG的含量第45页
    2.6 小结第45-47页
3 氧分压对自发钙响应的影响第47-63页
    3.1 引言第47页
    3.2 主要实验材料与仪器设备第47-48页
        3.2.1 主要实验仪器及耗材第47页
        3.2.2 主要实验试剂第47页
        3.2.3 主要实验试剂配制第47-48页
    3.3 实验方法第48-51页
        3.3.1 实验分组第48-49页
        3.3.2 最适CoCl2浓度实验第49-50页
        3.3.3 软骨组织切片样品制作第50页
        3.3.4 胞内自发钙响应实验第50-51页
        3.3.5 数据处理与统计分析第51页
    3.4 实验结果第51-56页
        3.4.1 氧分压对自发钙响应的影响第51-52页
        3.4.2 模拟低氧对自发钙响应的影响第52页
        3.4.3 胞内钙使自发钙响应波形以快峰为主第52页
        3.4.4 EGTA和TG对响应率、响应峰个数及钙总量的影响第52-56页
    3.5 分析与讨论第56-61页
        3.5.1 氧分压对自发钙响应的影响第56-57页
        3.5.2 最适CoCl2浓度的讨论第57-58页
        3.5.3 与模拟低氧相似的氧分压第58页
        3.5.4 钙来源对自发钙响应的影响第58-60页
        3.5.5 通过钙信号判断离体培养软骨组织和软骨细胞的最适氧分压第60-61页
    3.6 小结第61-63页
4 氧分压对软骨组织胞外基质的影响第63-69页
    4.1 引言第63页
    4.2 主要实验材料与仪器设备第63页
        4.2.1 主要实验仪器及耗材第63页
        4.2.2 主要实验试剂第63页
        4.2.3 主要实验试剂配制第63页
    4.3 实验方法第63-64页
        4.3.1 实验分组第63-64页
        4.3.2 软骨组织切片样品制作第64页
        4.3.3 COLL-Ⅱ和GAG检测实验第64页
        4.3.4 数据处理与统计分析第64页
    4.4 实验结果第64-66页
        4.4.1 氧分压对COLL-Ⅱ和GAG的影响第64-65页
        4.4.2 不同氧分压培养时间对COLL-Ⅱ和GAG的影响第65页
        4.4.3 模拟低氧对COLL-Ⅱ和GAG的影响第65-66页
    4.5 分析与讨论第66-68页
        4.5.1 氧分压对各层胞外基质中COLL-Ⅱ和GAG的影响第66-67页
        4.5.2 与模拟低氧相似的氧分压第67页
        4.5.3 通过COLL-Ⅱ和GAG来判断离体培养软骨组织和软骨细胞的最适氧分压第67-68页
    4.6 小结第68-69页
5 原位软骨细胞钙信号与胞外基质的关系第69-79页
    5.1 引言第69页
    5.2 主要实验材料与仪器设备第69页
        5.2.1 主要实验仪器及耗材第69页
        5.2.2 主要实验试剂第69页
        5.2.3 主要实验试剂配制第69页
    5.3 实验方法第69-70页
        5.3.1 实验分组第69-70页
        5.3.2 软骨组织切片样品制作第70页
        5.3.3 COLL-Ⅱ和GAG检测实验第70页
        5.3.4 数据处理与统计分析第70页
    5.4 实验结果第70-75页
        5.4.1 不同结构层中钙信号与COLL-Ⅱ和GAG的关系第70页
        5.4.2 不同氧分压下钙信号与COLL-Ⅱ和GAG的关系第70-71页
        5.4.3 钙来源对COLL-Ⅱ和GAG的影响第71-75页
    5.5 分析与讨论第75-77页
        5.5.1 不同结构层中钙信号与COLL-Ⅱ和GAG的关系第75-76页
        5.5.2 不同氧分压下钙信号与COLL-Ⅱ和GAG关系第76页
        5.5.3 钙来源对COLL-Ⅱ&GAG合成代谢的影响第76-77页
    5.6 小结第77-79页
6 基于全卷积神经网络和递归神经网络的胞内钙信号检测技术改进..第79-95页
    6.1 引言第79页
    6.2 基本原理第79-84页
        6.2.1 细胞识别第79-81页
        6.2.2 钙信号曲线的识别第81-84页
    6.3 识别方法第84-87页
        6.3.1 深度学习分类识别指标第84页
        6.3.2 细胞识别第84-85页
        6.3.3 钙信号时间序列的采集第85-86页
        6.3.4 钙响应曲线波峰识别第86-87页
    6.4 实验结果与分析第87-93页
        6.4.1 细胞识别的结果第87-89页
        6.4.2 钙信号曲线采集的结果第89-91页
        6.4.3 钙响应曲线波峰识别第91-93页
    6.5 小结第93-95页
7 结论与展望第95-99页
    7.1 主要结论第95-96页
    7.2 后续工作展望第96-99页
致谢第99-101页
参考文献第101-113页
附录第113页

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