中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-8页 |
英文缩略词对照表 | 第13-15页 |
1 绪论 | 第15-29页 |
1.1 问题的提出及研究意义 | 第15-16页 |
1.2 国内外研究现状 | 第16-25页 |
1.2.1 软骨组织的结构特点 | 第16-17页 |
1.2.2 软骨组织中的氧分压 | 第17-19页 |
1.2.3 软骨细胞中的钙信号特点 | 第19-21页 |
1.2.4 基于深度学习的胞内钙信号检测 | 第21-25页 |
1.3 课题的研究目的及研究内容 | 第25-29页 |
1.3.1 课题的研究目的与意义 | 第25页 |
1.3.2 课题的研究内容 | 第25-26页 |
1.3.3 课题的技术路线 | 第26-27页 |
1.3.4 课题的特色及创新点 | 第27-29页 |
2 原位软骨细胞钙信号检测实验和胞外基质检测实验的方法构建 | 第29-47页 |
2.1 引言 | 第29页 |
2.2 实验材料与仪器设备 | 第29-32页 |
2.2.1 主要实验仪器及耗材 | 第29-30页 |
2.2.2 主要实验试剂 | 第30-31页 |
2.2.3 主要实验试剂配制 | 第31-32页 |
2.3 实验方法 | 第32-39页 |
2.3.1 软骨组织切片样品制作 | 第32-33页 |
2.3.2 原位软骨细胞活性检测实验 | 第33页 |
2.3.3 胞内自发钙响应实验 | 第33-36页 |
2.3.4 冰冻切片 | 第36页 |
2.3.5 免疫组化 | 第36-37页 |
2.3.6 阿尔新蓝(AlcianBlue)8GX染色 | 第37页 |
2.3.7 COLL-Ⅱ和GAG的半定量计算 | 第37-38页 |
2.3.8 数据处理与统计分析 | 第38-39页 |
2.4 实验结果 | 第39-43页 |
2.4.1 原位软骨细胞活性检测 | 第39页 |
2.4.2 实时自发钙响应观察结果 | 第39-40页 |
2.4.3 COLL-Ⅱ和GAG染色实验的观察结果 | 第40页 |
2.4.4 软骨组织结构分层 | 第40-41页 |
2.4.5 原位软骨细胞自发钙响应的计算结果 | 第41-43页 |
2.4.6 胞外基质中COLL-Ⅱ和GAG计算结果 | 第43页 |
2.5 分析与讨论 | 第43-45页 |
2.5.1 自发钙响应实验 | 第43-44页 |
2.5.2 COLL-Ⅱ和GAG合成代谢实验胞外基质区域的选择 | 第44-45页 |
2.5.3 软骨组织胞外基质中COLL-Ⅱ和GAG的含量 | 第45页 |
2.6 小结 | 第45-47页 |
3 氧分压对自发钙响应的影响 | 第47-63页 |
3.1 引言 | 第47页 |
3.2 主要实验材料与仪器设备 | 第47-48页 |
3.2.1 主要实验仪器及耗材 | 第47页 |
3.2.2 主要实验试剂 | 第47页 |
3.2.3 主要实验试剂配制 | 第47-48页 |
3.3 实验方法 | 第48-51页 |
3.3.1 实验分组 | 第48-49页 |
3.3.2 最适CoCl2浓度实验 | 第49-50页 |
3.3.3 软骨组织切片样品制作 | 第50页 |
3.3.4 胞内自发钙响应实验 | 第50-51页 |
3.3.5 数据处理与统计分析 | 第51页 |
3.4 实验结果 | 第51-56页 |
3.4.1 氧分压对自发钙响应的影响 | 第51-52页 |
3.4.2 模拟低氧对自发钙响应的影响 | 第52页 |
3.4.3 胞内钙使自发钙响应波形以快峰为主 | 第52页 |
3.4.4 EGTA和TG对响应率、响应峰个数及钙总量的影响 | 第52-56页 |
3.5 分析与讨论 | 第56-61页 |
3.5.1 氧分压对自发钙响应的影响 | 第56-57页 |
3.5.2 最适CoCl2浓度的讨论 | 第57-58页 |
3.5.3 与模拟低氧相似的氧分压 | 第58页 |
3.5.4 钙来源对自发钙响应的影响 | 第58-60页 |
3.5.5 通过钙信号判断离体培养软骨组织和软骨细胞的最适氧分压 | 第60-61页 |
3.6 小结 | 第61-63页 |
4 氧分压对软骨组织胞外基质的影响 | 第63-69页 |
4.1 引言 | 第63页 |
4.2 主要实验材料与仪器设备 | 第63页 |
4.2.1 主要实验仪器及耗材 | 第63页 |
4.2.2 主要实验试剂 | 第63页 |
4.2.3 主要实验试剂配制 | 第63页 |
4.3 实验方法 | 第63-64页 |
4.3.1 实验分组 | 第63-64页 |
4.3.2 软骨组织切片样品制作 | 第64页 |
4.3.3 COLL-Ⅱ和GAG检测实验 | 第64页 |
4.3.4 数据处理与统计分析 | 第64页 |
4.4 实验结果 | 第64-66页 |
4.4.1 氧分压对COLL-Ⅱ和GAG的影响 | 第64-65页 |
4.4.2 不同氧分压培养时间对COLL-Ⅱ和GAG的影响 | 第65页 |
4.4.3 模拟低氧对COLL-Ⅱ和GAG的影响 | 第65-66页 |
4.5 分析与讨论 | 第66-68页 |
4.5.1 氧分压对各层胞外基质中COLL-Ⅱ和GAG的影响 | 第66-67页 |
4.5.2 与模拟低氧相似的氧分压 | 第67页 |
4.5.3 通过COLL-Ⅱ和GAG来判断离体培养软骨组织和软骨细胞的最适氧分压 | 第67-68页 |
4.6 小结 | 第68-69页 |
5 原位软骨细胞钙信号与胞外基质的关系 | 第69-79页 |
5.1 引言 | 第69页 |
5.2 主要实验材料与仪器设备 | 第69页 |
5.2.1 主要实验仪器及耗材 | 第69页 |
5.2.2 主要实验试剂 | 第69页 |
5.2.3 主要实验试剂配制 | 第69页 |
5.3 实验方法 | 第69-70页 |
5.3.1 实验分组 | 第69-70页 |
5.3.2 软骨组织切片样品制作 | 第70页 |
5.3.3 COLL-Ⅱ和GAG检测实验 | 第70页 |
5.3.4 数据处理与统计分析 | 第70页 |
5.4 实验结果 | 第70-75页 |
5.4.1 不同结构层中钙信号与COLL-Ⅱ和GAG的关系 | 第70页 |
5.4.2 不同氧分压下钙信号与COLL-Ⅱ和GAG的关系 | 第70-71页 |
5.4.3 钙来源对COLL-Ⅱ和GAG的影响 | 第71-75页 |
5.5 分析与讨论 | 第75-77页 |
5.5.1 不同结构层中钙信号与COLL-Ⅱ和GAG的关系 | 第75-76页 |
5.5.2 不同氧分压下钙信号与COLL-Ⅱ和GAG关系 | 第76页 |
5.5.3 钙来源对COLL-Ⅱ&GAG合成代谢的影响 | 第76-77页 |
5.6 小结 | 第77-79页 |
6 基于全卷积神经网络和递归神经网络的胞内钙信号检测技术改进.. | 第79-95页 |
6.1 引言 | 第79页 |
6.2 基本原理 | 第79-84页 |
6.2.1 细胞识别 | 第79-81页 |
6.2.2 钙信号曲线的识别 | 第81-84页 |
6.3 识别方法 | 第84-87页 |
6.3.1 深度学习分类识别指标 | 第84页 |
6.3.2 细胞识别 | 第84-85页 |
6.3.3 钙信号时间序列的采集 | 第85-86页 |
6.3.4 钙响应曲线波峰识别 | 第86-87页 |
6.4 实验结果与分析 | 第87-93页 |
6.4.1 细胞识别的结果 | 第87-89页 |
6.4.2 钙信号曲线采集的结果 | 第89-91页 |
6.4.3 钙响应曲线波峰识别 | 第91-93页 |
6.5 小结 | 第93-95页 |
7 结论与展望 | 第95-99页 |
7.1 主要结论 | 第95-96页 |
7.2 后续工作展望 | 第96-99页 |
致谢 | 第99-101页 |
参考文献 | 第101-113页 |
附录 | 第113页 |