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par1调控斑马鱼淋巴管发育的机制研究

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-6页
主要缩写词第9-11页
1 绪论第11-29页
    1.1 淋巴管系统第11-13页
        1.1.1 淋巴管系统的简介第11页
        1.1.2 淋巴管的功能及其相关疾病的危害第11-12页
        1.1.3 研究淋巴管发育的意义第12-13页
    1.2 淋巴管发育的分子机制第13-17页
        1.2.1 淋巴管内皮细胞的分化机制第13-16页
        1.2.2 淋巴管内皮细胞的迁移机制第16-17页
    1.3 斑马鱼淋巴管系统的发育第17-24页
        1.3.1 斑马鱼简介第17-18页
        1.3.2 斑马鱼淋巴管的发育第18-24页
    1.4 蛋白酶活化受体PAR1第24-28页
        1.4.1 PARs简介第24-27页
        1.4.2 PARs在血管生理学中的作用第27页
        1.4.3 PARs在血管病理学中的作用第27-28页
    1.5 本课题的研究目的第28-29页
2 材料与方法第29-57页
    2.1 斑马鱼相关实验第29-47页
        2.1.1 斑马鱼的品系第29页
        2.1.2 斑马鱼的培养第29-30页
        2.1.3 斑马鱼的传代第30-32页
        2.1.4 斑马鱼胚胎显微注射第32-33页
        2.1.5 斑马鱼基因敲降(Morpholino)第33-36页
        2.1.6 斑马鱼基因敲除(CRISPR/Cas9)第36-41页
        2.1.7 斑马鱼整胚原位杂交第41-44页
        2.1.8 斑马鱼整胚免疫荧光实验第44-46页
        2.1.9 斑马鱼抑制剂相关实验第46-47页
        2.1.10 共聚焦显微镜的使用第47页
    2.2 分子和细胞相关实验第47-57页
        2.2.1 DNA的提取第47-48页
        2.2.2 RNA的提取和cDNA的制备第48-50页
        2.2.3 细胞培养第50-51页
        2.2.4 siRNA的转染第51-52页
        2.2.5 基因表达的检测第52-57页
3 结果与分析第57-93页
    3.1 par1通过调控prox1a影响斑马鱼淋巴管发育第57-70页
        3.1.1 par1在斑马鱼中的表达位置具有组织特异性第57-58页
        3.1.2 敲降par1导致斑马鱼TD发育异常第58-61页
        3.1.3 敲除par1导致斑马鱼TD发育异常第61-65页
        3.1.4 par1通过调控prox1a的表达而影响斑马鱼淋巴管发育第65-69页
        3.1.5 本节小结第69-70页
    3.2 鉴定斑马鱼淋巴管发育过程中Par1上游的蛋白酶第70-80页
        3.2.1 凝血酶(coagulation factor Ⅱ.F2)并不参与斑马鱼淋巴管发育的调控第70-74页
        3.2.2 Mmp13b/MMP1作为上游蛋白酶参与par1/PAR1调控淋巴管发育的过程第74-80页
        3.2.3 本节小结第80页
    3.3 gnai2a/GNAI2作为下游信号分子参与par1/PAR1调控淋巴管发育的过程第80-93页
        3.3.1 HDLEC中GNAI2是参与PAR1调控淋巴管发育过程的下游信号第80-84页
        3.3.2 gnai2a在斑马鱼发育过程中的表达具有组织特异性第84-85页
        3.3.3 敲降gnai2a导致斑马鱼TD发育异常第85-87页
        3.3.4 敲降gnai2a导致prox1a的表达受到抑制第87-88页
        3.3.5 敲除gnai2a基因导致斑马鱼TD发育异常第88-91页
        3.3.6 本节小结第91-93页
4 结论与展望第93-99页
    4.1 主要研究成果第93-94页
    4.2 存在的不足和后续研究工作的建议第94-99页
致谢第99-101页
参考文献第101-111页
附录第111页
    A. 作者在攻读博士学位期间发表的论文第111页
    B. 作者在攻读博士学位期间参与的科研项目第111页

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