| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 英文缩写词表 | 第16-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-33页 |
| 1.1 桑黄菌的功能与药用价值 | 第17-19页 |
| 1.1.1 桑黄菌的分类和功能 | 第17页 |
| 1.1.2 桑黄菌的主要药用活性成分 | 第17-18页 |
| 1.1.3 桑黄菌资源的限制因素及存在问题 | 第18-19页 |
| 1.2 优势菌株的选育 | 第19-21页 |
| 1.2.1 传统的自然选育 | 第19页 |
| 1.2.2 诱变育种 | 第19-20页 |
| 1.2.3 基因工程和代谢工程育种 | 第20-21页 |
| 1.2.4 复合诱变育种 | 第21页 |
| 1.3 蛋白质组学研究概况 | 第21-24页 |
| 1.3.1 蛋白质组学研究的策略 | 第22-23页 |
| 1.3.2 差异蛋白组学在食用真菌中的研究进展 | 第23-24页 |
| 1.3.3 蛋白质组学技术应用所面临的问题 | 第24页 |
| 1.4 超声波在微生物发酵领域的应用 | 第24-25页 |
| 1.5 本研究立题依据、主要研究内容和技术路线 | 第25-27页 |
| 1.5.1 立题依据 | 第25-26页 |
| 1.5.2 主要研究内容和技术路线 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-33页 |
| 第二章 物理诱变筛选桑黄菌菌丝体胞内多糖高产突变菌株 | 第33-57页 |
| 2.1 引言 | 第33页 |
| 2.2 实验仪器设备与试剂 | 第33-34页 |
| 2.2.1 实验仪器设备 | 第33-34页 |
| 2.2.2 试剂 | 第34页 |
| 2.3 实验材料与方法 | 第34-41页 |
| 2.3.1 菌株 | 第34页 |
| 2.3.2 培养基及培养条件 | 第34-35页 |
| 2.3.3 桑黄菌菌落的生长特征观察 | 第35页 |
| 2.3.4 桑黄菌生长曲线的考察 | 第35-36页 |
| 2.3.5 原生质体的制备 | 第36页 |
| 2.3.6 最佳诱变条件的选择 | 第36-37页 |
| 2.3.7 原生质体诱变及突变体的筛选 | 第37-38页 |
| 2.3.8 拮抗实验和同工酶的鉴定 | 第38-41页 |
| 2.3.9 数据分析 | 第41页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第41-50页 |
| 2.4.1 桑黄菌菌落的生长特征观察 | 第41-42页 |
| 2.4.2 桑黄菌生长曲线 | 第42-43页 |
| 2.4.3 原生质体的制备 | 第43-45页 |
| 2.4.4 激光和紫外辐照参数对原生质体诱变的影响 | 第45-46页 |
| 2.4.5 紫外诱变和激光与紫外诱变原生质体正诱变率的比较 | 第46-47页 |
| 2.4.6 利用激光与紫外复合诱变筛选高产桑黄菌菌株 | 第47-49页 |
| 2.4.7 拮抗实验和同工酶的鉴定 | 第49-50页 |
| 2.5 讨论 | 第50-54页 |
| 2.6 本章小结 | 第54页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
| 第三章 诱变前后桑黄菌胞内多糖理化性质和生物活性的研究 | 第57-80页 |
| 3.1 引言 | 第57页 |
| 3.2 实验材料与仪器设备 | 第57-59页 |
| 3.2.1 实验材料和试剂 | 第57-58页 |
| 3.2.2 培养基和培养条件 | 第58页 |
| 3.2.3 实验仪器和设备 | 第58-59页 |
| 3.3 实验方法 | 第59-67页 |
| 3.3.1 桑黄菌菌丝体胞内多糖的提取和分离 | 第59页 |
| 3.3.2 多糖含量的测定 | 第59-60页 |
| 3.3.3 蛋白质含量的测定 | 第60-61页 |
| 3.3.4 葡萄糖醛酸含量的测定 | 第61-62页 |
| 3.3.5 单糖组成分析 | 第62-63页 |
| 3.3.6 分子量分布 | 第63页 |
| 3.3.7 红外光谱测定 | 第63页 |
| 3.3.8 清除羟自由基(·OH)的测定 | 第63-64页 |
| 3.3.9 TEAC(Trolox等价抗氧化能力)的测定 | 第64-65页 |
| 3.3.10 FRAP的测定 | 第65页 |
| 3.3.11 MTT法测定多糖体外抗人肝癌细胞HepG2活性 | 第65-66页 |
| 3.3.12 扫描电镜(SEM)实验 | 第66页 |
| 3.3.13 JZx菌丝体胞内多糖分级分离 | 第66页 |
| 3.3.14 JZx多糖不同组分的理化性质及单糖组成和分子量分布 | 第66页 |
| 3.3.15 核磁共振 | 第66-67页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第67-77页 |
| 3.4.1 CK和JZx菌丝胞内多糖理化性质的比较 | 第67-69页 |
| 3.4.2 CK和JZx菌丝体胞内多糖红外光谱测定 | 第69-70页 |
| 3.4.3 CK和JZx菌丝体胞内多糖清除羟自由基(·OH)能力的比较 | 第70-71页 |
| 3.4.4 CK和JZx菌丝体胞内多糖Trolox等价抗氧化能力的比较 | 第71-72页 |
| 3.4.5 CK和JZx菌丝体胞内多糖FRAP的比较 | 第72页 |
| 3.4.6 CK和JZx菌丝体胞内多糖体外抗人肝癌细胞HepG2活性的比较 | 第72-73页 |
| 3.4.7 CK和JZx菌丝体胞内多糖固态形貌的比较 | 第73-74页 |
| 3.4.8 JZx菌丝体胞内多糖的分级分离 | 第74-75页 |
| 3.4.9 JZx多糖不同组分的理化性质及单糖组成和分子量分布 | 第75-76页 |
| 3.4.10 核磁共振 | 第76-77页 |
| 3.5 本章小结 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-80页 |
| 第四章 桑黄菌突变菌株JZx与桑黄菌出发菌株CK的差异蛋白组学分析 | 第80-100页 |
| 4.1 引言 | 第80页 |
| 4.2 实验仪器设备与试剂 | 第80-85页 |
| 4.2.1 实验仪器设备 | 第80-81页 |
| 4.2.2 蛋白质二维电泳的相关试剂 | 第81-83页 |
| 4.2.3 凝胶染色及脱色试剂 | 第83页 |
| 4.2.4 蛋白点消化及质谱鉴定相关试剂 | 第83-84页 |
| 4.2.5 SDS-PAGE试剂 | 第84-85页 |
| 4.3 材料与方法 | 第85-91页 |
| 4.3.1 菌株 | 第85页 |
| 4.3.2 培养基及桑黄菌菌丝体培养条件 | 第85-86页 |
| 4.3.3 蛋白样品的制备 | 第86页 |
| 4.3.4 二维电泳前的SDS-PAGE | 第86-87页 |
| 4.3.5 蛋白浓度的测定 | 第87-88页 |
| 4.3.6 本研究蛋白质组实验基本流程 | 第88页 |
| 4.3.7 胶条的水化 | 第88页 |
| 4.3.8 第一维等电聚焦 | 第88-89页 |
| 4.3.9 胶条平衡 | 第89页 |
| 4.3.10 第二维SDS-PAGE | 第89页 |
| 4.3.11 凝胶染色与脱色 | 第89-90页 |
| 4.3.12 凝胶图像采集及分析 | 第90页 |
| 4.3.13 蛋白点消化 | 第90页 |
| 4.3.14 质谱参数设置及数据库比对 | 第90-91页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第91-98页 |
| 4.4.1 桑黄菌总蛋白质的SDS-PAGE分析 | 第91页 |
| 4.4.2 蛋白浓度测定标准曲线 | 第91-92页 |
| 4.4.3 桑黄菌菌株CK和突变株JZx菌丝体蛋白质组的差异 | 第92-93页 |
| 4.4.4 差异蛋白质谱的鉴定 | 第93-98页 |
| 4.5 本章小结 | 第98页 |
| 参考文献 | 第98-100页 |
| 第五章 超声波辅助桑黄菌菌丝发酵胞内多糖及其抗氧化活性的研究 | 第100-123页 |
| 5.1 引言 | 第100页 |
| 5.2 实验材料和仪器设备 | 第100-102页 |
| 5.2.1 实验材料和试剂 | 第100-101页 |
| 5.2.2 培养基和培养条件 | 第101页 |
| 5.2.3 试验仪器和设备 | 第101-102页 |
| 5.3 实验方法 | 第102-106页 |
| 5.3.1 超声波处理 | 第102页 |
| 5.3.2 桑黄菌菌丝体多糖的提取和分离 | 第102-103页 |
| 5.3.3 试验设计和数据分析 | 第103-104页 |
| 5.3.4 多糖的理化性质和组成 | 第104-105页 |
| 5.3.5 体外抗氧化实验 | 第105-106页 |
| 5.3.6 激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察细胞形态 | 第106页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第106-120页 |
| 5.4.1 响应面优化超声处理条件 | 第106-112页 |
| 5.4.2 超声波作用对桑黄菌菌丝体胞内多糖理化性质的影响 | 第112-116页 |
| 5.4.3 超声波处理对多糖抗氧化活性的影响 | 第116-118页 |
| 5.4.4 超声波处理的可能性机制的探讨 | 第118-120页 |
| 5.5 本章小结 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-123页 |
| 第六章 结论与展望 | 第123-126页 |
| 6.1 结论 | 第123-124页 |
| 6.2 本论文的主要创新点 | 第124-125页 |
| 6.3 展望 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126-127页 |
| 攻读博士学位期间取得的科研成果 | 第127页 |
