| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-20页 |
| 1.1 研究问题的由来 | 第13页 |
| 1.2 胚胎附植研究进展 | 第13-16页 |
| 1.2.1 胚胎附植过程 | 第13-14页 |
| 1.2.2 胚胎附植关键分子的研究 | 第14-16页 |
| 1.3 胚胎发育过程中相关信号通路的研究 | 第16页 |
| 1.4 ANXA8基因的功能研究进展 | 第16-18页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第18-20页 |
| 2 实验材料与方法 | 第20-39页 |
| 2.1 材料 | 第20-25页 |
| 2.1.0 猪子宫内膜组织样品 | 第20页 |
| 2.1.1 SPF小鼠 | 第20页 |
| 2.1.2 细胞系、载体和菌株 | 第20-21页 |
| 2.1.3 主要试剂与试剂盒 | 第21-23页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第23页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第23-25页 |
| 2.1.6 主要生物学分析软件及网站 | 第25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-38页 |
| 2.2.1 组织和细胞总RNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.2 cDNA的合成 | 第26-27页 |
| 2.2.3 引物的设计 | 第27-28页 |
| 2.2.4 PCR扩增反应 | 第28页 |
| 2.2.5 猪妊娠时期表达谱的构建 | 第28-29页 |
| 2.2.6 真核表达载体的构建 | 第29-31页 |
| 2.2.7 干涉片段的合成 | 第31-32页 |
| 2.2.8 细胞培养及质粒转染 | 第32-34页 |
| 2.2.9 免疫荧光技术 | 第34页 |
| 2.2.10 Western Blot技术 | 第34-37页 |
| 2.2.11 细胞周期的测定 | 第37-38页 |
| 2.2.12 小鼠子宫角注射 | 第38页 |
| 2.3 统计分析 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-52页 |
| 3.1 真核表达载体pcDNA3.1(+)-ANXA8的构建 | 第39-40页 |
| 3.1.1 猪子宫内膜细胞RNA提取及cDNA的合成 | 第39页 |
| 3.1.2 质粒与真核表达载体pcDNA3.1(+)的连接 | 第39-40页 |
| 3.2 ANXA8蛋白(annexinA8)在猪子宫内膜细胞中的表达定位 | 第40页 |
| 3.3 ANXA8基因对胚胎附植的影响 | 第40-44页 |
| 3.3.1 干涉片段的选择 | 第40-41页 |
| 3.3.2 ANXA8基因在猪子宫内膜细胞中超表达和干涉情况的检测 | 第41-42页 |
| 3.3.3 ANXA8基因在猪妊娠八个时期的子宫内膜组织中的表达 | 第42-43页 |
| 3.3.4 ANXA8基因对胚胎附植相关基因的影响 | 第43-44页 |
| 3.4 ANXA8基因对猪子宫内膜细胞增殖的影响以及对AKT信号通路的调控 | 第44-49页 |
| 3.4.1 ANXA8基因促进猪子宫内膜细胞的增殖 | 第44-49页 |
| 3.5 ANXA8基因对小鼠胚胎附植的影响 | 第49-50页 |
| 3.5.1 干涉片段的选择 | 第49页 |
| 3.5.2 ANXA8基因对小鼠胚胎附植的影响 | 第49-50页 |
| 3.6 干涉ANXA8基因降低猪子宫内膜细胞中同家族ANXA4基因的表达 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-55页 |
| 4.1 关于ANXA8基因对胚胎附植的可能的影响方式 | 第52-53页 |
| 4.2 关于ANXA8基因调控猪子宫内膜细胞增殖的信号通路 | 第53-54页 |
| 4.3 ANXA8基因在猪子宫内膜细胞中对同家族相关基因的表达影响 | 第54-55页 |
| 5 小结 | 第55-56页 |
| 5.1 本研究主要结果与结论 | 第55页 |
| 5.2 进一步工作建议 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 附录 | 第65-66页 |
| 在读期间与课题有关的研究成果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
