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辣椒对低温胁迫的响应与其低温抗性相关基因的克隆和功能分析

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-10页
第一章 文献综述第15-25页
    1.1 茄科植物响应低温胁迫的研究进展第15-19页
        1.1.1 生理生化方向的研究进展第15-16页
        1.1.2 分子方向的研究进展第16-18页
        1.1.3 ABA 响应低温胁迫反应的研究进展第18-19页
    1.2 逆境相关基因的研究进展第19-23页
        1.2.1 NAC 转录因子第19-20页
        1.2.2 植物 MBF1 转录辅激活因子第20-21页
        1.2.3 F-box 蛋白家族第21-23页
        1.2.4 MADS-box 转录因子第23页
        1.2.5 脱水素 DHN第23页
    1.3 本研究的主要内容、目的和意义第23-25页
第二章 外源 ABA 对低温下辣椒抗氧化酶活性及其基因表达的影响第25-38页
    2.1 材料与处理第25-26页
    2.2 试验方法第26-29页
        2.2.1 坏死斑的统计第26页
        2.2.2 丙二醛含量的测定第26页
        2.2.3 过氧化氢含量的测定第26页
        2.2.4 抗坏血酸-谷胱甘肽循环代谢物的测定第26-27页
        2.2.5 抗坏血酸和谷胱甘肽含量的测定第27页
        2.2.6 抗氧化酶活测定第27-28页
        2.2.7 RNA 提取和实时定量(qRT-PCR)分析基因表达第28-29页
        2.2.8 数据统计分析第29页
    2.3 结果与分析第29-35页
        2.3.1 ABA 对低温下辣椒叶片冷害指数的影响第29-30页
        2.3.2 ABA 对低温下辣椒叶片中 MDA 和 H_2O_2含量的影响第30-31页
        2.3.3 外源 ABA 对低温下辣椒叶片 AsA-GSH 循环代谢物的影响第31-33页
        2.3.4 外源 ABA 对低温下辣椒叶片抗氧化酶的影响第33-34页
        2.3.5 ABA 对低温下辣椒叶片抗氧化酶基因表达的影响第34-35页
    2.4 讨论第35-38页
        2.4.1 ABA 对低温下辣椒叶片冷害症状的影响第35页
        2.4.2 ABA 对低温下辣椒叶片 MDA 和 H2O2含量的影响第35页
        2.4.3 外源 ABA 对低温下辣椒叶片抗氧化酶活性的影响第35-37页
        2.4.4 ABA 对低温下辣椒抗氧化酶基因表达的影响第37-38页
第三章 SSH 技术对 ABA 调节的辣椒低温抗性相关基因的差异表达分析第38-52页
    3.1 材料与处理第39页
    3.2 试验方法第39-40页
        3.2.1 叶绿素含量测定第39页
        3.2.2 电导率测定第39-40页
        3.2.3 净光合速率和气孔导度分析第40页
        3.2.4 RNA 分离和 cDNA 准备第40页
        3.2.5 SSH 文库构建第40页
    3.3 结果与分析第40-48页
        3.3.1 ABA 有效地缓解辣椒叶片的冷害症状第40页
        3.3.2 ABA 对低温下辣椒电导率、叶绿素、净光合速率和气孔导度的影响第40-41页
        3.3.3 消减 cDNA 文库的构建第41页
        3.3.4 正反交文库中 ESTs 分离第41-43页
        3.3.5 参与耐寒性的基因第43-44页
        3.3.6 qRT-PCR 分析 ABA 调节的差异基因第44-48页
    3.4 讨论第48-51页
        3.4.1 分析电导率、叶绿素含量、净光合速率和气孔导度第48页
        3.4.2 未知功能的基因第48-49页
        3.4.3 低温下 ABA 上调的运输相关基因第49页
        3.4.4 低温下 ABA 上调的转录相关基因第49页
        3.4.5 低温期间 ABA 上调的代谢和防御相关基因第49-50页
        3.4.6 低温期间 ABA 下调的基因第50-51页
    3.5 结论第51-52页
第四章 辣椒 CaNAC2 转录因子的功能分析第52-71页
    4.1 材料与方法第53-60页
        4.1.1 主要材料及处理方法第53页
        4.1.2 NAC 基因分离和序列分析第53页
        4.1.3 表达载体的构建第53-58页
        4.1.4 亚细胞定位分析第58-59页
        4.1.5 CaNAC2 转录激活活性分析第59页
        4.1.6 辣椒 CaNAC2 在非生物胁迫下的表达模式分析第59页
        4.1.7 VIGS 技术分析辣椒 CaNAC2 沉默第59-60页
    4.2 结果与分析第60-68页
        4.2.1 辣椒 CaNAC2 全长 cDNA 的分离第60-61页
        4.2.2 辣椒 CaNAC2 推导的蛋白结构域及系统进化树分析第61-62页
        4.2.3 辣椒 CaNAC2 的亚细胞定位分析第62-63页
        4.2.4 辣椒 CaNAC2 的转录激活活性分析第63-64页
        4.2.5 辣椒 CaNAC2 的表达模式分析第64-65页
        4.2.6 VIGS 技术分析辣椒 CaNAC2 沉默的功能第65-68页
    4.3 讨论第68-71页
        4.3.1 辣椒 CaNAC2 的特征分析第68页
        4.3.2 辣椒 CaNAC2 的抗逆性分析第68-71页
第五章 辣椒 CaMBF 转录辅激活因子的功能分析第71-84页
    5.1 材料与处理第71-75页
        5.1.1 主要材料及处理方法第71-72页
        5.1.2 辣椒 CaMBF 分离和序列分析第72页
        5.1.3 辣椒 CaMBF 在非生物胁迫下的表达模式分析第72页
        5.1.4 CaMBF 超量表达载体的构建第72-73页
        5.1.5 辣椒 CaMBF 的拟南芥遗传转化及检测第73-74页
        5.1.6 CaMBF 超量表达拟南芥的表型分析与功能鉴定第74-75页
    5.2 结果与分析第75-81页
        5.2.1 辣椒 CaMBF 全长 cDNA 的分离第75-76页
        5.2.2 辣椒 CaMBF 的表达模式分析第76-77页
        5.2.3 CaMBF 在拟南芥上的功能分析第77-81页
    5.3 讨论第81-84页
        5.3.1 辣椒 CaMBF 的特征分析第81-82页
        5.3.2 辣椒 CaMBF 对逆境的响应第82页
        5.3.3 辣椒 CaMBF 的耐寒性分析第82-84页
第六章 利用 VIGS 技术研究辣椒 CaF-box 蛋白基因的功能第84-94页
    6.1 材料与处理第85-86页
        6.1.1 主要材料及处理方法第85页
        6.1.2 CaF-box 分离和序列分析第85页
        6.1.3 病毒沉默 CaF-box 载体的构建第85页
        6.1.4 辣椒 CaF-box 在非生物胁迫下的表达模式分析第85页
        6.1.5 VIGS 技术分析辣椒 CaF-box 沉默的功能第85-86页
    6.2 结果与分析第86-92页
        6.2.1 辣椒 CaF-box 全长 cDNA 的分离第86-88页
        6.2.2 辣椒 CaF-box 的表达模式分析第88-89页
        6.2.3 VIGS 技术分析辣椒 CaF-box 蛋白沉默的功能第89-92页
    6.3 讨论第92-94页
第七章 辣椒低温抗性相关基因 CaMADS-box 和 CaDHN 的克隆及其表达分析第94-102页
    7.1 材料与处理第94-95页
        7.1.1 主要材料及处理方法第94页
        7.1.2 CaMADS-box 和 CaDHN 分离和序列分析第94-95页
        7.1.3 辣椒 CaMADS-box 和 CaDHN 在非生物胁迫下的表达模式分析第95页
    7.2 结果与分析第95-99页
        7.2.1 辣椒 CaMADS-box 和 CaDHN 全长 cDNA 的分离第95-96页
        7.2.2 辣椒 CaDHN 全长 cDNA 的分离第96-97页
        7.2.3 辣椒 CaDHN 编码氨基酸的亲水性预测和跨膜结构分析第97-98页
        7.2.4 辣椒 CaMADS-box 和 CaDHN 的表达模式分析第98-99页
    7.3 讨论第99-102页
        7.3.1 辣椒 CaMADS-box 的结构分析和表达特征第99-100页
        7.3.2 辣椒 CaDHN 的结构分析和表达特征第100-102页
第八章 结论及创新点第102-103页
    8.1 结论第102页
    8.2 创新点第102-103页
参考文献第103-125页
附录第125-129页
缩略词第129-130页
致谢第130-131页
作者简介第131页

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