摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
前言 | 第9-12页 |
材料与方法 | 第12-20页 |
1 材料 | 第12-14页 |
1.1 主要仪器设备及来源 | 第12页 |
1.2 主要的细胞培养材料 | 第12页 |
1.3 主要试剂及来源 | 第12-14页 |
1.4 常用试剂配制 | 第14页 |
2 方法 | 第14-19页 |
2.1 细胞常规培养 | 第14-15页 |
2.1.1 细胞复苏 | 第14页 |
2.1.2 细胞传代 | 第14-15页 |
2.1.3 细胞冻存 | 第15页 |
2.2 MTT检测不同浓度Droxinosat、Cisplatin及两者联合对HCC细胞株增殖的影响 | 第15页 |
2.3 非标记的电子监测系统(Real Time Cellular Analysis,RTCA)检测Droxinosat,Cisplatin及两者联合对HCC细胞株增殖的影响 | 第15-16页 |
2.4 流式细胞术检测细胞凋亡率 | 第16页 |
2.5 q RT-PCR检测各组细胞HDAC3、p53、Bcl-2、Bax、Bad mRNA表达的影响 | 第16-17页 |
2.5.1 细胞总RNA的提取 | 第16页 |
2.5.2 逆转录 | 第16页 |
2.5.3 PCR反应 | 第16-17页 |
2.6 Western Blot分析各组药物作用细胞中HDAC3、AceH3K14、p53、Phospho-p53、caspase3、cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达 | 第17-19页 |
2.6.1 细胞总蛋白的提取 | 第17-18页 |
2.6.2 BCA法蛋白定量 | 第18页 |
2.6.3 Western Blot | 第18-19页 |
3 统计分析 | 第19-20页 |
结果 | 第20-28页 |
1. DROXINOSTAT及DDP对HCC细胞HEPG2及SMMC-7721细胞增殖具有抑制作用,并呈现出时间-剂量依赖关系 | 第20页 |
2. DROXINOSTAT与低剂量DDP联合应用能显著抑制HCC细胞的增殖 | 第20-21页 |
3. Droxinostat与低剂量DDP联用能显著诱导HCC细胞发生调亡 | 第21-22页 |
4. 各组药物处理后细胞HDAC3,P53,BCL-2,BAX MRNA表达变化 | 第22页 |
5. 各组药物作用后细胞中HDAC3、ACEH3K14、P53、PHOSPHO-P53、CASPASE3、CLEAVED CASPASE-3、BCL-2、BAX蛋白表达表达变化 | 第22-28页 |
讨论 | 第28-33页 |
结论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-37页 |
在学期间的学习及研究成果 | 第37-38页 |
英文缩写词索引 | 第38-39页 |
致谢 | 第39页 |