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恶臭假单胞菌S16中尼古丁降解途径中关键基因的功能及特性研究

摘要第3-4页
ABSTRACT第4页
缩略词第6-9页
第一章 绪论第9-19页
    1.1 尼古丁的理化性质第9页
    1.2 环境中尼古丁来源及其危害第9-12页
        1.2.1 环境中尼古丁污染物来源第9-11页
        1.2.2 尼古丁危害及处理第11-12页
    1.3 微生物代谢尼古丁的研究进展第12-14页
    1.4 微生物代谢尼古丁中尼古丁氧化酶研究进展第14-19页
        1.4.1 6-羟基-L-尼古丁氧化酶(6-HLNO)第14-16页
        1.4.2 6-羟基-D-尼古丁氧化酶(6-HDNO)第16-17页
        1.4.3 假单胞菌属中尼古丁氧化酶NicA与NOX第17-19页
第二章 菌株S16尼古丁代谢差异表达蛋白相关基因转录水平的研究第19-33页
    2.1 引言第19-21页
    2.2 材料与方法第21-25页
        2.2.1 实验材料第21-22页
        2.2.2 实验方法第22-25页
    2.3 结果与讨论第25-31页
        2.3.1 总RNA提取和DNaseI处理后结果第25-26页
        2.3.2 半定量PCR第26-27页
        2.3.3 RT-qPCR结果第27-31页
    2.4 本章小结第31-33页
第三章 恶臭假单胞菌S16中尼古丁氧化酶鉴定与功能研究第33-59页
    3.1 引言第33页
    3.2 材料与方法第33-40页
        3.2.1 实验材料第33-34页
        3.2.2 实验方法第34-40页
    3.3 结果与分析第40-58页
        3.3.1 NicA2(PPS_4081)蛋白氨基酸序列分析第40-41页
        3.3.2 菌株S16中pps_4081(nicA2)基因敲除结果与分析第41-47页
        3.3.3 基因nicA2体外克隆表达及功能检测第47-53页
        3.3.4 NicA2蛋白理化性质初步探究第53-58页
    3.4 本章小结第58-59页
第四章 恶臭假单胞菌S16中假氧化尼古丁氧化酶功能鉴定第59-73页
    4.1 引言第59页
    4.2 材料与方法第59-63页
        4.2.1 实验材料第59-60页
        4.2.2 实验方法第60-63页
    4.3 结果与讨论第63-71页
        4.3.1 PCR验证菌株S16中基因pnao敲除结果第63页
        4.3.2 敲除株S16dpnao生长体系状态第63-66页
        4.3.3 敲除回补株S16dpnaoC生长体系状态第66-67页
        4.3.4 敲除株S16dpnao休止细胞反应降解尼古丁第67-68页
        4.3.5 蛋白Pnao氨基酸序列分析及异源表达第68-71页
    4.4 本章小结第71-73页
结论与展望第73-75页
参考文献第75-81页
附录1 实验仪器第81-83页
附录2 实验试剂第83-85页
附录3 NicA2和Pnao氨基酸序列比对结果第85-87页
致谢第87-89页
攻读硕士学位期间论文发表情况第89-91页

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