| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-23页 |
| 1.1 模式识别受体在天然免疫中的作用 | 第9-11页 |
| 1.1.1 天然免疫概述 | 第9页 |
| 1.1.2 天然免疫中的模式识别受体 | 第9-11页 |
| 1.2 Toll样受体的研究进展 | 第11-18页 |
| 1.2.1 Toll样受体的信号转导 | 第11-14页 |
| 1.2.2 TLR4的信号转导 | 第14-16页 |
| 1.2.3 TLR4介导的吞噬作用 | 第16-18页 |
| 1.3 沙门氏菌的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3.1 沙门氏菌概述 | 第18页 |
| 1.3.2 沙门氏菌的危害 | 第18-19页 |
| 1.3.3 沙门氏菌与TLR相互作用的研究 | 第19页 |
| 1.4 动物转基因技术与抗病育种 | 第19-21页 |
| 1.4.1 利用转基因技术影响疾病复制和致病的策略 | 第19-20页 |
| 1.4.2 具有抗病能力的转基因动物 | 第20-21页 |
| 1.5 本研究目的和意义 | 第21-22页 |
| 1.6 技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第23-35页 |
| 2.1 材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 质粒、菌株及实验动物 | 第23页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要试剂及配制 | 第24-25页 |
| 2.1.4 主要分析软件 | 第25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-35页 |
| 2.2.1 过表达TLR4转基因绵羊Southern鉴定方法的优化 | 第25-28页 |
| 2.2.2 羊外周血来源的单核巨噬细胞的分离培养与鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2.3 羊外周血单核巨噬细胞中基因表达的检测 | 第29-33页 |
| 2.2.4 过表达TLR4转基因绵羊单核巨噬细胞吞噬能力和黏附能力的测定 | 第33-34页 |
| 2.2.5 过表达TLR4转基因绵羊单核巨噬细胞对细菌杀伤能力的测定 | 第34页 |
| 2.2.6 细胞siRNA干扰 | 第34-35页 |
| 第三章 试验结果 | 第35-55页 |
| 3.1 过表达TLR4转基因羊Southern鉴定方法的优化 | 第35-39页 |
| 3.1.1 过表达TLR4转基因绵羊的制备 | 第35页 |
| 3.1.2 过表达TLR4转基因绵羊耳组织DNA的提取 | 第35-36页 |
| 3.1.3 过表达TLR4转基因绵羊耳组织DNA的酶切 | 第36页 |
| 3.1.4 杂交探针的制备与纯化 | 第36-37页 |
| 3.1.5 Southern杂交转膜效率检测 | 第37-38页 |
| 3.1.6 Southern杂交的化学发光检测 | 第38页 |
| 3.1.7 过表达TLR4转基因绵羊的鉴定 | 第38-39页 |
| 3.2 TLR4基因在绵羊外周血单核巨噬细胞中的表达 | 第39-42页 |
| 3.2.1 绵羊外周血来源的单核巨噬细胞鉴定 | 第39-40页 |
| 3.2.2 过表达TLR4转基因绵羊中TLR4表达水平的检测 | 第40-42页 |
| 3.3 过表达TLR4基因影响绵羊外周血单核巨噬细胞吞噬沙门氏菌机制的研究 | 第42-53页 |
| 3.3.1 LPS刺激对过表达TLR4转基因绵羊单核巨噬细胞的影响 | 第42-44页 |
| 3.3.2 沙门氏菌刺激对过表达TLR4转基因绵羊单核巨噬细胞的影响 | 第44-47页 |
| 3.3.3 抑制TLR4及其下游信号通路对绵羊单核巨噬细胞吞噬沙门氏菌的影响 | 第47-53页 |
| 3.4 过表达TLR4基因影响绵羊外周血单核巨噬细胞清除沙门氏菌初步的研究 | 第53-55页 |
| 3.4.1 过表达TLR4基因对绵羊单核巨噬细胞清除沙门氏菌能力的影响 | 第53-54页 |
| 3.4.2 过表达TLR4转基因绵羊单核巨噬细胞感染沙门氏菌后炎症因子的表达 | 第54-55页 |
| 第四章 讨论 | 第55-59页 |
| 第五章 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 个人简历 | 第68页 |
