摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第11-17页 |
1.1 氮肥施用对水稻生长的影响 | 第11页 |
1.2 氮肥施用对水稻根圈微生物的影响 | 第11-12页 |
1.3 大气CO_2浓度升高对水稻生长的影响 | 第12-13页 |
1.4 大气CO_2浓度升高对根圈微生物的影响 | 第13-14页 |
1.5 固氮微生物 | 第14页 |
1.6 研究的目的及意义 | 第14-15页 |
1.7 研究内容及技术路线图 | 第15-17页 |
第二章 水稻根圈nifH基因实时荧光定量PCR分析 | 第17-27页 |
2.1 前言 | 第17页 |
2.2 实验材料与方法 | 第17-23页 |
2.2.1 FACE平台介绍 | 第17-18页 |
2.2.2 样品的采集 | 第18页 |
2.2.3 样品的处理及保存 | 第18-19页 |
2.2.4 水稻根系和根际土样品总DNA的提取 | 第19-20页 |
2.2.5 固氮菌nifH功能基因序列的PCR扩增 | 第20-21页 |
2.2.6 实时荧光定量PCR | 第21-22页 |
2.2.7 主要试剂和仪器 | 第22-23页 |
2.2.8 统计分析 | 第23页 |
2.3 结果与讨论 | 第23-26页 |
2.3.1 水稻根系和根际土样品总DNA的提取结果 | 第23-24页 |
2.3.2 固氮细菌nifH基因PCR电泳结果 | 第24页 |
2.3.3 水稻根系和根际土固氮细菌nifH基因丰度分析 | 第24-25页 |
2.3.4 讨论 | 第25-26页 |
2.4 小结 | 第26-27页 |
第三章 基于nifH基因的抽穗期(9月)水稻根系固氮菌功能多样性分析 | 第27-44页 |
3.1 前言 | 第27页 |
3.2 实验材料与方法 | 第27-30页 |
3.2.1 样品总DNA的提取及nifH基因的PCR扩增 | 第27页 |
3.2.2 高通量测序 | 第27-28页 |
3.2.3 PCR产物纯化 | 第28页 |
3.2.4 克隆转化 | 第28-29页 |
3.2.5 菌落PCR鉴定阳性克隆子 | 第29页 |
3.2.6 克隆测序 | 第29-30页 |
3.3 结果与讨论 | 第30-42页 |
3.3.1 抽穗期(9月)水稻根系固氮细菌nifh基因高通量测序分析 | 第30-34页 |
3.3.2 抽穗期水稻根系(9月)固氮细菌nifH基因克隆文库分析 | 第34-40页 |
3.3.3 讨论 | 第40-42页 |
3.4 小结 | 第42-44页 |
第四章 基于nifH基因的分蘖期(7月)水稻根系固氮菌功能多样性分析 | 第44-48页 |
4.1 前言 | 第44页 |
4.2 实验材料与方法 | 第44-45页 |
4.2.1 样品总DNA的提取及nifH基因的PCR扩增 | 第44页 |
4.2.2 PCR产物纯化 | 第44页 |
4.2.3 克隆转化 | 第44页 |
4.2.4 菌落PCR鉴定阳性克隆子 | 第44-45页 |
4.2.5 克隆测序 | 第45页 |
4.3 结果与讨论 | 第45-47页 |
4.3.1 分蘖期(7月)和抽穗期(9月)固氮功能菌中优势菌群比较分析 | 第45-46页 |
4.3.2 讨论 | 第46-47页 |
4.4 小结 | 第47-48页 |
第五章 结论与展望 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
致谢 | 第57页 |