| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第13-25页 |
| 1.1 RNA沉默 | 第13-21页 |
| 1.1.1 RNA沉默的发现 | 第13-14页 |
| 1.1.2 RNA沉默的分子机制 | 第14-15页 |
| 1.1.3 参与RNA沉默的关键成分 | 第15-16页 |
| 1.1.3.1 Dicer | 第15-16页 |
| 1.1.3.2 AGO | 第16页 |
| 1.1.3.3 RNA依赖的RNA聚合酶 | 第16页 |
| 1.1.4 RNA沉默抑制子 | 第16-21页 |
| 1.1.4.1 RNA沉默抑制子的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.1.4.2 RNA沉默抑制子的鉴定 | 第18-19页 |
| 1.1.4.3 RNA沉默抑制子的作用机制 | 第19-21页 |
| 1.2 HR反应 | 第21-24页 |
| 1.2.1 HR反应的发现 | 第21-22页 |
| 1.2.2 HR反应的机制研究 | 第22-23页 |
| 1.2.3 N基因参与的HR反应 | 第23-24页 |
| 1.3 本研究的目的意义及主要内容 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 病毒毒源 | 第25页 |
| 2.1.3 质粒和菌株 | 第25页 |
| 2.1.4 酶及各种生化试剂 | 第25页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.1.6 PCR引物 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-40页 |
| 2.2.1 植物材料管理 | 第26页 |
| 2.2.2 植物基因组DNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.3 植物RNA的提取 | 第27页 |
| 2.2.4 cDNA的合成 | 第27-28页 |
| 2.2.5 基因克隆及载体构建 | 第28-31页 |
| 2.2.5.1 目的基因的扩增及鉴定 | 第28页 |
| 2.2.5.2 酶切和回收 | 第28-29页 |
| 2.2.5.3 连接反应 | 第29页 |
| 2.2.5.4 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
| 2.2.5.5 连接产物转化大肠杆菌 | 第30页 |
| 2.2.5.6 转化菌落的PCR鉴定 | 第30页 |
| 2.2.5.7 质粒DNA的微量提取 | 第30-31页 |
| 2.2.5.8 测序鉴定 | 第31页 |
| 2.2.5.9 重组质粒的农杆菌转化 | 第31页 |
| 2.2.6 农杆菌介导的瞬时表达及沉默现象观察 | 第31-32页 |
| 2.2.6.1 农杆菌介导的瞬时表达 | 第31-32页 |
| 2.2.6.2 长波紫外灯观察 | 第32页 |
| 2.2.7 mRNANorthernblot检测 | 第32-35页 |
| 2.2.7.1 植物总RNA的提取 | 第32-33页 |
| 2.2.7.2 甲醛变性凝胶电泳 | 第33页 |
| 2.2.7.3 转膜 | 第33页 |
| 2.2.7.4 Northern blot | 第33-35页 |
| 2.2.8 小分子RNA的Northernblot检测 | 第35-37页 |
| 2.2.8.1 植物小分子RNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.2.8.2 尿素/聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第36页 |
| 2.2.8.3 转膜 | 第36-37页 |
| 2.2.8.4 小分子RNA的杂交 | 第37页 |
| 2.2.9 病毒接种 | 第37页 |
| 2.2.10 组织染色 | 第37-38页 |
| 2.2.10.1 台盼蓝染色 | 第37页 |
| 2.2.10.2 3 ,3′-二甲基联苯胺染色 | 第37-38页 |
| 2.2.11 ChIP | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-58页 |
| 3.1 NgRBP抑制瞬时侵染介导的RNA沉默 | 第40-41页 |
| 3.2 NgRBP下调DCL1及AGO6的表达水平 | 第41-42页 |
| 3.3 NgRBP增强TMV诱发的HR反应 | 第42-45页 |
| 3.4 NgRBP促进HR反应提前发生 | 第45-51页 |
| 3.5 NgRBP增强HR反应引发的系统获得抗性 | 第51-53页 |
| 3.6 NgRBP增强HR反应引发的局部及系统性RNA沉默 | 第53-56页 |
| 3.7 NgRBP可能通过沉默抑制增强HR反应 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
