中文摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9页 |
1 前言 | 第10-23页 |
1.1 拟南芥突变体筛选及图位克隆 | 第10-14页 |
1.1.1 拟南芥图位克隆技术简介 | 第10-11页 |
1.1.2 拟南芥图位克隆程序 | 第11页 |
1.1.3 图位克隆中常用的分子标记 | 第11-13页 |
1.1.4 图位克隆技术的局限性与展望 | 第13-14页 |
1.1.4.1 图位克隆技术的局限性 | 第13-14页 |
1.1.4.2 图位克隆技术展望 | 第14页 |
1.2 全基因组重测序技术在植物中的应用 | 第14-15页 |
1.3 拟南芥红光作用的分子机制 | 第15-17页 |
1.3.1 植物光受体系统 | 第15-16页 |
1.3.2 植物光信号识别 | 第16页 |
1.3.3 光敏色素参与的下游信号转导 | 第16-17页 |
1.4 BRs | 第17-22页 |
1.4.1 BRs的主要信号通路 | 第18-20页 |
1.4.2 ROT3基因在BRs生物合成中的作用 | 第20-21页 |
1.4.3 光对植物激素的调节作用 | 第21-22页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-35页 |
2.1 材料 | 第23-24页 |
2.1.1 植物材料及生长条件 | 第23页 |
2.1.2 酶及各种生化试剂 | 第23页 |
2.1.3 菌株及质粒 | 第23页 |
2.1.4 实验引物 | 第23-24页 |
2.2 方法 | 第24-35页 |
2.2.1 图位克隆及重测序 | 第24-27页 |
2.2.1.1 突变体筛选 | 第24-25页 |
2.2.1.2 拟南芥杂交方法 | 第25页 |
2.2.1.3 图位克隆群体构建 | 第25-26页 |
2.2.1.4 图位克隆多态性marker筛选 | 第26页 |
2.2.1.5 重测序样本准备 | 第26-27页 |
2.2.2 拟南芥表型分析方法 | 第27-28页 |
2.2.2.1 突变体下胚轴长度及子叶面积测定 | 第27页 |
2.2.2.2 突变体叶绿素含量测定 | 第27页 |
2.2.2.3 突变体花青素含量测定 | 第27-28页 |
2.2.3 植物基因组DNA及总RNA的提取 | 第28-30页 |
2.2.3.1 植物基因组DNA的提取 | 第28页 |
2.2.3.2 植物总RNA的提取 | 第28-30页 |
2.2.4 表达载体构建 | 第30-33页 |
2.2.4.1 基因克隆 | 第30页 |
2.2.4.2 PCR扩增产物胶回收 | 第30-31页 |
2.2.4.3 克隆载体构建 | 第31页 |
2.2.4.4 大肠杆菌转化及质粒提取 | 第31-32页 |
2.2.4.5 表达载体构建 | 第32-33页 |
2.2.5 定量PCR | 第33-35页 |
2.2.5.1 反转录 | 第33-34页 |
2.2.5.2 qRT-PCR(全式金公司) | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-43页 |
3.1 突变体的遗传学分析及基因定位 | 第35-41页 |
3.1.1 突变体62及113的获得 | 第35页 |
3.1.2 突变体表型分析 | 第35-38页 |
3.1.2.1 突变体下胚轴长度统计 | 第35-36页 |
3.1.2.2 突变体叶绿素花青素及相关基因表达 | 第36-38页 |
3.1.2.3 突变体子叶面积比较 | 第38页 |
3.1.3 图位克隆多态性marker的筛选 | 第38-39页 |
3.1.4 突变体62及113基因定位及基因组重测序分析 | 第39-41页 |
3.1.4.1 突变体62及113粗定位 | 第39-40页 |
3.1.4.2 突变体62及113重测序分析 | 第40-41页 |
3.2 突变体62及113候选基因验证 | 第41-43页 |
3.2.1 突变体62 | 第41页 |
3.2.2 突变体113 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-45页 |
5 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
致谢 | 第53页 |