| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第13-15页 |
| 第一部分 Wnt信号通路调节细胞极性和细胞增殖分化 | 第15-42页 |
| 1.1. Wnt信号通路 | 第15-17页 |
| 1.1.1. 经典Wnt信号通路 | 第15-16页 |
| 1.1.2 非经典Wnt信号通路 | 第16页 |
| 1.1.3. Wnt/Ca~(2+)信号通路 | 第16-17页 |
| 1.2. 非经典Wnt信号通路调节细胞极性 | 第17-23页 |
| 1.2.1. 原肠作用中的细胞运动 | 第17-18页 |
| 1.2.2. 集中延伸运动中的细胞行为 | 第18-21页 |
| 1.2.3. 细胞极性 | 第21-23页 |
| 1.3. 经典Wnt信号通路调节视网膜细胞的增殖和分化 | 第23-29页 |
| 1.3.1. 脊椎动物眼的形态发生 | 第23页 |
| 1.3.2. 眼区的形成和分裂 | 第23-24页 |
| 1.3.3. 视网膜的增殖和分化 | 第24-28页 |
| 1.3.4. 斑马鱼眼的形态发生调控 | 第28-29页 |
| 1.4. 结论和展望 | 第29页 |
| 参考文献 | 第29-42页 |
| 第二部分 Dishevelled作用蛋白Lurap1调节细胞极性 | 第42-59页 |
| 2.1. 引言 | 第42-43页 |
| 2.2. 结果 | 第43-54页 |
| 2.2.1. MZlurap1胚胎出现CE缺陷表型 | 第43-44页 |
| 2.2.2. MZlurap1中近轴侧部细胞和脊索细胞运动紊乱 | 第44-45页 |
| 2.2.3. Lurap1拯救了MZlurap1胚胎中的细胞运动缺陷 | 第45-46页 |
| 2.2.4. Lurap1与Dv1和JNK相互作用调节细胞极性 | 第46-50页 |
| 2.2.5. Lurap1的亚细胞定位 | 第50-51页 |
| 2.2.6. MZlurap1中MTOC的定位紊乱 | 第51-54页 |
| 2.2.7. Lurap1通过Dvl抑制JNK信号活性 | 第54页 |
| 2.3. 结论与讨论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 第三部分 Wnt受体Frizzled8a调节视网膜的细胞分化 | 第59-79页 |
| 3.1. 引言 | 第59-60页 |
| 3.2. 结果 | 第60-73页 |
| 3.2.1. Wnt受体Fzd8a突变体构建 | 第60-62页 |
| 3.2.2. fzd8a母源合子突变体眼的尺寸减小 | 第62-63页 |
| 3.2.3. fzd8a母源合子突变体眼发育缺陷 | 第63-64页 |
| 3.2.4. fzd8a母源合子突变体背腹轴图式正常 | 第64-65页 |
| 3.2.5. fzd8a母源合子突变体眼区的特化正常 | 第65页 |
| 3.2.6. fzd8a母源合子突变体视网膜分层延迟 | 第65-67页 |
| 3.2.7. fzd8a母源合子突变体视网膜分层紊乱 | 第67页 |
| 3.2.8. fzd8a母源合子突变体视网膜分化延迟 | 第67-69页 |
| 3.2.9. fzd8a母源合子突变体视网膜细胞增殖异常 | 第69-71页 |
| 3.2.10. fzd8a母源合子突变体视网膜细胞周期退出延迟 | 第71-73页 |
| 3.3. 结论与讨论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-79页 |
| 第四部分 材料和方法 | 第79-99页 |
| 4.1. 实验动物 | 第79页 |
| 4.2. 显微注射 | 第79页 |
| 4.3. TALENs基因编辑技术制备突变体 | 第79-84页 |
| 4.3.1. TALENs靶点选择的原则: | 第79-80页 |
| 4.3.2. TALENs靶点的构建 | 第80-84页 |
| 4.4. 分子实验 | 第84-87页 |
| 4.4.1. 总RNA提取 | 第84-85页 |
| 4.4.2. cDNA合成 | 第85页 |
| 4.4.3. 探针质粒构建 | 第85页 |
| 4.4.4. 体外转录和纯化 | 第85-87页 |
| 4.5. 斑马鱼胚胎整封原位杂交 | 第87-88页 |
| 4.6. HE染色 | 第88-89页 |
| 4.6.1. 主要试剂及配制方法 | 第88页 |
| 4.6.2. 实验材料 | 第88页 |
| 4.6.3. 石蜡包埋 | 第88-89页 |
| 4.6.4. 石蜡切片 | 第89页 |
| 4.6.5. HE染色的基本步骤 | 第89页 |
| 4.7. BrdU检测 | 第89-91页 |
| 4.7.1. 试剂配制 | 第89-90页 |
| 4.7.2. BrdU孵育 | 第90页 |
| 4.7.3. 样品准备 | 第90页 |
| 4.7.4. BrdU免疫荧光 | 第90-91页 |
| 4.8. pH3检测 | 第91-92页 |
| 4.8.1. 试剂和样品准备 | 第91页 |
| 4.8.2. pH3免疫荧光 | 第91-92页 |
| 4.9. 凋亡检测 | 第92页 |
| 4.9.1. 样品准备 | 第92页 |
| 4.9.2. TUNEL染色 | 第92页 |
| 4.10. 视网膜实验统计方法 | 第92-93页 |
| 4.10.1. 视网膜细胞数量统计 | 第92-93页 |
| 4.10.2. 视网膜细胞核层宽度统计 | 第93页 |
| 4.10.3. BrdU阳性细胞统计 | 第93页 |
| 4.10.4. pH3阳性细胞和凋亡小体数量统计 | 第93页 |
| 4.11. 斑马鱼整封免疫荧光 | 第93-94页 |
| 4.12. 细胞运动轨迹追踪 | 第94-95页 |
| 4.12.1. 样品材料准备 | 第94页 |
| 4.12.2. Time-lapse拍摄 | 第94-95页 |
| 4.12.3. 细胞运动轨迹追踪 | 第95页 |
| 4.13. 细胞行为检测 | 第95-96页 |
| 4.13.1. 细胞移植 | 第95页 |
| 4.13.2. Time-lapse拍摄和视频导出 | 第95页 |
| 4.13.3. 细胞突出角度统计方法 | 第95-96页 |
| 4.13.4. 脊索细胞极性统计方法 | 第96页 |
| 4.14. MTOC定位检测 | 第96-97页 |
| 4.14.1. MTOC运动轨迹 | 第96页 |
| 4.14.2. MTOC定位统计 | 第96-97页 |
| 4.15. ATF2报告基因检测 | 第97-98页 |
| 4.15.1. 实验原理 | 第97-98页 |
| 4.15.2. 实验步骤 | 第98页 |
| 参考文献 | 第98-99页 |
| 攻读学位期间完成的工作 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第101页 |
