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拟南芥RNA解旋酶AtHELPS和AtRDEM在胁迫响应与生长发育中的功能及机理分析

中文摘要第1-13页
英文摘要第13-17页
1 前言第17-52页
   ·盐胁迫第17-28页
     ·盐胁迫对植物的影响第17-20页
     ·植物对盐胁迫的响应第20-24页
     ·盐胁迫信号转导途径第24-28页
   ·低钾胁迫第28-33页
     ·低钾胁迫对植物的影响第28-29页
     ·植物对低钾胁迫的响应第29页
     ·植物在低钾条件下的作用机制第29-33页
   ·植物激素第33-40页
     ·植物激素在植物生长发育中的作用第33-34页
     ·植物激素受体及信号转导第34-37页
     ·植物激素调控侧枝发育第37-40页
   ·解旋酶的定义、结构和分类第40-42页
     ·解旋酶的定义第40页
     ·解旋酶的结构第40-41页
     ·解旋酶的分类第41-42页
   ·解旋酶的生化特性第42-43页
   ·解旋酶的作用机制第43-44页
   ·解旋酶的生物学功能第44-46页
     ·前体m RNA的剪接第44-45页
     ·核糖体的生物合成第45页
     ·RNA运输第45页
     ·转录调控第45页
     ·翻译起始第45-46页
     ·RNA降解第46页
   ·解旋酶基因的研究进展第46-50页
     ·解旋酶基因的在动物中的研究进展第46-48页
     ·解旋酶基因的在植物中的研究进展第48-50页
   ·本研究的目的和意义第50-52页
2 材料与方法第52-72页
   ·实验材料第52-56页
     ·植物材料第52页
     ·菌株与质粒第52页
     ·酶与各种生化试剂第52页
     ·引物第52-55页
     ·网络信息资源第55-56页
   ·实验方法第56-72页
     ·拟南芥基因组的小量提取第56页
     ·载体构建第56-58页
       ·PCR扩增第56-57页
       ·连接反应第57页
       ·酶切第57-58页
       ·凝胶电泳中 DNA 片段的回收第58页
       ·超表达载体的构建第58页
       ·启动子驱动 GUS 报告基因表达载体的构建第58页
     ·PCR 鉴定突变体纯合植株第58-59页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第59页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第59页
       ·大肠杆菌细胞的转化第59页
     ·小量碱法提取大肠杆菌中的质粒第59-60页
     ·农杆菌感受态细胞的制备和转化第60页
       ·根癌农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备第60页
       ·冻融法转化农杆菌第60页
     ·拟南芥的遗传转化第60-61页
     ·转基因拟南芥的鉴定第61页
     ·转基因植物的 GUS 表达分析第61-63页
       ·转基因植物的 GUS 组织化学染色分析第61-62页
       ·转基因植物的 GUS 活性测定第62-63页
     ·拟南芥 RNA 的提取第63-64页
     ·RNA 中基因组DNA 的去除第64页
     ·反转录合成一链cDNA第64-65页
     ·Real-Time PCR 体系及反应条件第65-66页
     ·切片的制作第66-67页
     ·转化洋葱表皮细胞观察 GFP 定位第67页
     ·激光共聚焦显微镜观察 GFP 定位第67-68页
     ·Agilent 单标表达谱芯片分析及数据处理第68-69页
       ·Agilent 单标表达谱芯片分析第68-69页
       ·芯片数据分析第69页
     ·非损伤微测技术第69-72页
       ·非损伤微测技术测定离子流速的试剂配制第70页
       ·离子流测定第70-71页
       ·数据处理第71-72页
3 结果与分析第72-103页
   ·AtHELPS 的序列分析及蛋白结构预测第72-73页
     ·AtHELPS 的序列分析第72页
     ·AtHELPS 的蛋白结构预测第72-73页
   ·AtHELPS 表达模式分析第73-76页
     ·AtHELPS 组织表达模式分析第73-75页
     ·AtHELPS 诱导表达分析第75-76页
   ·AtHELPS 蛋白的定位第76-78页
     ·35S::AtHELPS-GFP表达载体的构建第76-77页
     ·AtHELPS-GFP融合蛋白在洋葱表皮中的表达和定位第77页
     ·AtHELPS-GFP融合蛋白在转基因株系根尖中的表达和定位第77-78页
   ·AtHELPS超表达和突变体的获得第78-79页
   ·AtHELPS 超表达和突变体的表达谱分析第79-83页
     ·基因芯片数据的分析第79-80页
     ·基因芯片结果中胁迫诱导表达差异基因的统计第80-83页
   ·AtHELPS 调节拟南芥盐胁迫耐受性第83-86页
     ·AtHELPS 调节拟南芥对盐胁迫的耐受性第83-84页
     ·AtHELPS 调节拟南芥对盐胁迫耐性的分子机理第84-86页
   ·AtHELPS调节拟南芥低钾胁迫耐受性第86-89页
     ·AtHELPS调节拟南芥对低钾胁迫的耐受性第86-87页
     ·AtHELPS调节拟南芥对低钾胁迫耐性的分子机理第87-89页
   ·AtRDEM 表达模式分析第89-91页
   ·AtRDEM 的亚细胞定位第91-92页
   ·AtRDEM 超表达植株的获得第92-93页
   ·AtRDEM 超表达植株发育异常第93-95页
   ·AtRDEM 调节拟南芥的生长发育的机理分析第95-103页
     ·超表达 AtRDEM 植株基因表达谱分析第95-101页
     ·AtRDEM 调节一种新激素的合成代谢第101-103页
4 讨论第103-107页
5 结论第107-109页
参考文献第109-128页
致谢第128-129页
攻读学位期间发表论文及专利第129页

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