| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 缩写词对照表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| 1.1 RBSDV引起的病害分布、危害、症状、传播与防治 | 第13-15页 |
| 1.1.1 病害分布、危害及症状 | 第13-14页 |
| 1.1.2 病害的传播与防治 | 第14-15页 |
| 1.2 RBSDV的特征 | 第15-17页 |
| 1.3 呼肠孤病毒形成毒质的研究现状 | 第17-19页 |
| 1.3.1 动物呼肠孤病毒形成毒质的研究 | 第18页 |
| 1.3.2 植物呼肠孤病毒形成毒质的研究 | 第18-19页 |
| 1.4 双分子荧光互补 | 第19-21页 |
| 1.4.1 BiFC的原理 | 第19-20页 |
| 1.4.2 BiFC的技术方法 | 第20-21页 |
| 1.5 农杆菌介导的转化 | 第21-22页 |
| 1.5.1 农杆菌介导转化原理 | 第21页 |
| 1.5.2 农杆菌介导的基因瞬时表达 | 第21-22页 |
| 1.6 研究意义 | 第22-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 2.1.2 昆虫细胞系 | 第24页 |
| 2.1.3 载体与菌种 | 第24页 |
| 2.1.4 试剂与仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-42页 |
| 2.2.1 目的基因的克隆 | 第25-27页 |
| 2.2.2 克隆载体的构建 | 第27-30页 |
| 2.2.3 表达载体的构建 | 第30-32页 |
| 2.2.4 质粒DNA的提取 | 第32-34页 |
| 2.2.5 融合蛋白的诱导表达及鉴定 | 第34-35页 |
| 2.2.6 目的蛋白的纯化与回收 | 第35-36页 |
| 2.2.7 Western-blotting检测 | 第36-37页 |
| 2.2.8 免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation) | 第37-39页 |
| 2.2.9 免疫电镜胶体金标记技术 | 第39-42页 |
| 第三章 RBSDV S9-1的克隆与P9-1的表达及抗体制备 | 第42-52页 |
| 3.1 材料与方法 | 第42-44页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第43-44页 |
| 3.2 结果分析 | 第44-50页 |
| 3.2.1 样品总RNA的质量检测 | 第44-45页 |
| 3.2.2 样品RT-PCR阳性检测 | 第45-46页 |
| 3.2.3 基因P9-1的克隆与阳性结果鉴定 | 第46-47页 |
| 3.2.4 P9-1的序列分析 | 第47-48页 |
| 3.2.5 P9-1原核表达载体的阳性检测 | 第48页 |
| 3.2.6 GST-P9-1融合蛋白的原核表达与检测 | 第48-49页 |
| 3.2.7 目的蛋白纯化回收后的检测 | 第49-50页 |
| 3.2.8 P9-1蛋白抗血清的制备及检测 | 第50页 |
| 3.3 讨论 | 第50-52页 |
| 第四章 P9-1在烟草表皮细胞与昆虫细胞中的表达 | 第52-61页 |
| 4.1 材料与方法 | 第52-56页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第52页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第52-56页 |
| 4.2 结果分析 | 第56-60页 |
| 4.2.1 P9-1在烟草表皮细胞中形成包涵体结构 | 第56-58页 |
| 4.2.2 P9-1在烟草表皮细胞中能自我互作 | 第58页 |
| 4.2.3 P9-1在sf9昆虫细胞中自我互作并形成类毒质包涵体 | 第58-60页 |
| 4.3 讨论 | 第60-61页 |
| 第五章 P9与RBSDV其他非结构蛋白的互作 | 第61-71页 |
| 5.1 材料与方法 | 第61-64页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第61页 |
| 5.1.2 实验方法 | 第61-64页 |
| 5.2 结果分析 | 第64-69页 |
| 5.2.1 P9-1能结合非结构蛋白P6 | 第64-65页 |
| 5.2.2 P6和P5-1能与P9-1共定位于包涵体结构 | 第65-67页 |
| 5.2.3 在sf9昆虫细胞中单独表达P6不能形成类毒质包涵体结构 | 第67-68页 |
| 5.2.4 在sf9昆虫细胞中P9-1招募P6至类毒质结构 | 第68-69页 |
| 5.3 讨论 | 第69-71页 |
| 第六章 结论与展望 | 第71-72页 |
| 6.1 结论 | 第71页 |
| 6.2 展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-82页 |
| 附录 | 第82-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 攻读学位期间投稿与发表的学术论文 | 第88-89页 |
