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果蝇Dscam外显子簇6互斥可变剪接中顺式作用元件LCR的调控功能研究

致谢第5-6页
摘要第6-7页
Abstract第7页
缩略语第8-9页
目次第9-12页
第一章 文献综述第12-25页
    1.1 可变剪接第12-15页
        1.1.1 可变剪接第12-13页
        1.1.2 可变剪接的类型第13-14页
        1.1.3 可变剪接的意义第14-15页
    1.2 互斥可变剪接第15-18页
        1.2.1 互斥可变剪接的产生第15页
        1.2.2 互斥可变剪接的调控机制第15-18页
    1.3 黑腹果蝇Dscam基因互斥剪接研究进展第18-25页
        1.3.1 黑腹果蝇Dscam基因第18-19页
        1.3.2 黑腹果蝇Dscam外显子簇6互斥剪接模型的提出第19-20页
        1.3.3 黑腹果蝇Dscam外显子簇6互斥剪接模型的证明第20-23页
        1.3.4 黑腹果蝇Dscam外显子簇4、9、17的剪接情况第23-25页
第二章 实验方案第25-28页
    2.1 研究目的及意义第25-26页
        2.1.1 研究目的第25页
        2.1.2 研究意义第25-26页
    2.2 研究内容第26页
    2.3 技术路线第26-27页
    2.4 载体结构图第27-28页
第三章 材料与方法第28-41页
    3.1 材料与试剂第28-30页
    3.2 实验方法第30-41页
        3.2.1 黑腹果蝇全基因组提取第30-31页
        3.2.2 引物设计第31-32页
        3.2.3 PCR扩增目的片段第32-33页
        3.2.4 PCR产物割胶回收第33页
        3.2.5 PCR产物连接T载体第33-34页
        3.2.6 E.coli TG1感受态细胞的制备第34页
        3.2.7 连接产物转化E.coli TG1感受态细胞第34页
        3.2.8 阳性菌落扩大培养第34页
        3.2.9 质粒DNA提取第34-35页
        3.2.10 质粒酶切鉴定第35页
        3.2.11 质粒插入片段序列测序第35-36页
        3.2.12 酶切并回收目的片段第36页
        3.2.13 目的片段与表达载体连接第36页
        3.2.14 表达载体构建及测序第36页
        3.2.15 重组质粒浓度测定第36页
        3.2.16 重组质粒转染果蝇S2细胞第36-37页
        3.2.17 细胞冻存第37-38页
        3.2.18 细胞复苏第38页
        3.2.19 转染后S2细胞总RNA提取第38页
        3.2.20 cDNA第一条链的合成(逆转录)第38-39页
        3.2.21 PCR并酶切检测剪接情况第39-40页
        3.2.22 净光密度分析第40-41页
第四章 结果分析及讨论第41-53页
    4.1 实验结果分析第41-50页
        4.1.1 迷你基因及各突变体载体构建第41-42页
            4.1.1.1 目的基因PCR结果第41页
            4.1.1.2 T载体检测结果第41页
            4.1.1.3 表达载体检测结果第41-42页
        4.1.2 黑腹果蝇Dscam外显子簇6 LCR研究结果第42-50页
            4.1.2.1 Dscam外显子簇6的剪接依赖LCR元件第42-44页
            4.1.2.2 LCR元件的结构第44-46页
            4.1.2.3 △hrp36互斥外显子的剪接需要LCR元件第46-48页
            4.1.2.4 LCR通过增强弱剪接位点信号的方式起作用第48-50页
            4.1.2.5 结论第50页
    4.2 讨论第50-53页
参考文献第53-61页
个人简历第61页

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