| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-20页 |
| 1.1 病原学与流行病学 | 第13-14页 |
| 1.1.1 PRRSV的病原学 | 第13-14页 |
| 1.1.2 流行病学 | 第14页 |
| 1.2 PRRSV主要非结构蛋白的功能 | 第14-16页 |
| 1.3 PRRSV实验室检测方法研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 PRRS的综合防控 | 第17-19页 |
| 1.4.1 影响PRRSV传播的主要因素 | 第17-18页 |
| 1.4.2 PRRS的防控 | 第18-19页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 弱毒疫苗株TJM-F92 Nsp2缺失120个氨基酸重组蛋白的表达 | 第20-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.1 质粒和血清 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂和仪器 | 第20页 |
| 2.2 方法 | 第20-22页 |
| 2.2.1 GST-d120蛋白的表达 | 第20-21页 |
| 2.2.2 GST-d120蛋白的纯化 | 第21页 |
| 2.2.3 SDS-PAGE与Western blot鉴定纯化蛋白 | 第21-22页 |
| 2.2.4 纯化蛋白浓度的测定 | 第22页 |
| 2.3 结果与分析 | 第22-23页 |
| 2.3.1 纯化GST-d120蛋白的SDS-PAGE与Western blot分析鉴定 | 第22-23页 |
| 2.3.2 纯化蛋白浓度测定结果 | 第23页 |
| 2.4 讨论 | 第23-25页 |
| 第三章 鉴别PRRSV野毒感染和疫苗免疫间接ELISA方法的建立 | 第25-41页 |
| 3.1 材料 | 第25页 |
| 3.1.1 血清样品 | 第25页 |
| 3.1.2 主要试剂和仪器 | 第25页 |
| 3.2 方法 | 第25-29页 |
| 3.2.1 方阵法确定蛋白最佳包被浓度及血清稀释度 | 第25-26页 |
| 3.2.2 最佳抗原包被液和包被条件的优化 | 第26页 |
| 3.2.3 最佳封闭液和封闭条件的优化 | 第26页 |
| 3.2.4 最佳血清稀释液和作用时间的优化 | 第26-27页 |
| 3.2.5 最佳酶标二抗稀释液、工作浓度和作用时间的优化 | 第27页 |
| 3.2.6 最佳TMB作用时间的优化 | 第27页 |
| 3.2.7 d120-ELISA方法临界值的确定 | 第27-28页 |
| 3.2.8 d120-ELISA特异性试验 | 第28页 |
| 3.2.9 d120-ELISA方法的敏感性 | 第28页 |
| 3.2.10 d120-ELISA重复性试验 | 第28页 |
| 3.2.11 与IDEXX PRRSV X3试剂盒的对比性分析 | 第28-29页 |
| 3.3 结果与分析 | 第29-39页 |
| 3.3.1 蛋白最佳包被浓度及血清稀释度的确定 | 第29-30页 |
| 3.3.2 最佳抗原包被液和包被条件的确定 | 第30-31页 |
| 3.3.3 最佳封闭液和封闭条件的确定 | 第31-32页 |
| 3.3.4 最佳血清稀释液和作用时间的确定 | 第32-33页 |
| 3.3.5 最佳酶标二抗稀释液、工作浓度和作用时间的确定 | 第33-35页 |
| 3.3.6 最佳TMB作用时间的确定 | 第35页 |
| 3.3.7 d120-ELISA方法最终反应条件的确定 | 第35页 |
| 3.3.8 d120-ELISA方法临界值的确定 | 第35-36页 |
| 3.3.9 d120-ELISA特异性分析 | 第36-37页 |
| 3.3.10 d120-ELISA的敏感性试验 | 第37页 |
| 3.3.11 d120-ELISA的重复性结果 | 第37-39页 |
| 3.3.12 与IDEXX PRRSV X3试剂盒的对比性结果 | 第39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 血清动力学实验和鉴别d120-ELISA的临床应用 | 第41-48页 |
| 4.1 材料和方法 | 第41-43页 |
| 4.1.1 主要试剂及仪器 | 第41页 |
| 4.1.2 GST-d120血清动力学试验 | 第41-42页 |
| 4.1.3 临床血清采集试验设计 | 第42页 |
| 4.1.4 样品OD值检测与阴阳性的判定 | 第42-43页 |
| 4.2 结果与分析 | 第43-46页 |
| 4.2.1 GST-d120蛋白血清动力学试验结果与分析 | 第43-44页 |
| 4.2.2 临床血清检测结果与分析 | 第44-46页 |
| 4.3 讨论 | 第46-48页 |
| 第五章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 附录 | 第56-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
