| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 缩略语 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 共生固氮的意义 | 第11页 |
| 1.2 根瘤的形成过程 | 第11-13页 |
| 1.3 根瘤菌结瘤因子与豆科植物受体的识别 | 第13-14页 |
| 1.3.1 根瘤菌结瘤因子的合成 | 第13-14页 |
| 1.3.2 结瘤因子与豆科植物受体的识别 | 第14页 |
| 1.4 结瘤信号传导途径中的功能基因 | 第14-19页 |
| 1.4.1 共生受体激酶及其互作蛋白 | 第15-16页 |
| 1.4.2 离子通道蛋白和核孔蛋白 | 第16-17页 |
| 1.4.3 依赖于钙和钙调素的蛋白激酶及其互作蛋白 | 第17页 |
| 1.4.4 NSP转录因子及其互作蛋白 | 第17-18页 |
| 1.4.5 结瘤起始蛋白NIN及其互作蛋白 | 第18-19页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-32页 |
| 2.1 材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 载体与菌株 | 第20-21页 |
| 2.1.3 分子生物学试剂 | 第21页 |
| 2.1.4 培养基 | 第21-22页 |
| 2.2 方法 | 第22-32页 |
| 2.2.1 植物材料总RNA提取 | 第22-23页 |
| 2.2.2 c DNA第一链的合成 | 第23页 |
| 2.2.3 大肠杆菌感受态细胞的制备（Ca Cl2法）及转化 | 第23-24页 |
| 2.2.4 农杆菌电转化感受态细胞的制备及转化 | 第24-25页 |
| 2.2.5 目的基因序列查找及引物设计 | 第25页 |
| 2.2.6 目的基因的克隆 | 第25-26页 |
| 2.2.7 载体的构建 | 第26-29页 |
| 2.2.8 大豆毛根转化 | 第29-30页 |
| 2.2.9 蒺藜苜蓿毛根转化 | 第30-31页 |
| 2.2.10 Quantitative Real-time PCR | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-52页 |
| 3.1 目的基因序列分析 | 第32-37页 |
| 3.1.1 GmSymRK基因序列分析 | 第32-33页 |
| 3.1.2 GmCaMK基因序列分析 | 第33-34页 |
| 3.1.3 GmNSP1基因序列分析 | 第34-35页 |
| 3.1.4 GmNSP2基因序列分析 | 第35-36页 |
| 3.1.5 GmNIN基因序列分析 | 第36-37页 |
| 3.2 目的基因的克隆 | 第37-39页 |
| 3.2.1 大豆根瘤总RNA提取 | 第37页 |
| 3.2.2 目的片段的扩增 | 第37-38页 |
| 3.2.3 载体的构建 | 第38-39页 |
| 3.3 目的基因的功能验证 | 第39-49页 |
| 3.3.1 GmSymRK的功能验证 | 第39-40页 |
| 3.3.2 GmCCaMK的功能验证 | 第40-44页 |
| 3.3.3 GmNSP1的功能验证 | 第44-48页 |
| 3.3.4 GmNSP2α 和GmNINα 的功能验证 | 第48-49页 |
| 3.4 GmSymRK、GmCCaMK、GmNSP1、GmNSP2及GmNIN的相互影响 | 第49-52页 |
| 3.4.1 GmSymRK对GmCCaMK、GmNSP1、GmNSP2表达的影响 | 第49-50页 |
| 3.4.2 GmCCaMK对GmNSP1、GmNSP2表达的影响 | 第50页 |
| 3.4.3 GmNSP1对GmCCaMK、GmNSP2、GmNIN表达的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.4 GmNSP2α 对GmCCaMK、GmNSP1、GmNIN表达的影响 | 第51页 |
| 3.4.5 GmNINα 对GmNSP1、GmNSP2表达的影响 | 第51-52页 |
| 4 结论与讨论 | 第52-55页 |
| 4.1 结论 | 第52页 |
| 4.2 讨论 | 第52-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 附录一：本实验所用引物 | 第60-63页 |
| 附录二：转基因发根平均结瘤数及显著性分析 | 第63-64页 |
| 附录三：目的基因测序序列 | 第64-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
