甘蓝型油菜Tnt1突变体库的创建
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 缩略词表（Abbreviation） | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-18页 |
| 1.1 创造突变体的方法 | 第9-13页 |
| 1.1.1 理化诱变 | 第9-11页 |
| 1.1.2 插入突变 | 第11-13页 |
| 1.2 油菜插入突变体侧翼序列分离的方法 | 第13-15页 |
| 1.2.1 Tail-PCR | 第13-14页 |
| 1.2.2 反向PCR | 第14-15页 |
| 1.2.3 接头介导PCR | 第15页 |
| 1.3 Tnt1的研究背景 | 第15-17页 |
| 1.3.1 植物反转录转座子的分类 | 第15-16页 |
| 1.3.2 影响植物反转录转座子活性的因素 | 第16页 |
| 1.3.3 Tnt1的应用 | 第16-17页 |
| 1.4 研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 2 材料和方法 | 第18-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 载体与菌株 | 第18页 |
| 2.1.3 试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.4 培养基 | 第19页 |
| 2.2 方法 | 第19-29页 |
| 2.2.1 农杆菌介导的油菜遗传转化 | 第19-21页 |
| 2.2.2 转基因再生植株的培育 | 第21页 |
| 2.2.3 转基因植株的分子鉴定 | 第21-22页 |
| 2.2.4 Tnt1插入植株的侧翼序列分离 | 第22-26页 |
| 2.2.5 RT-PCR鉴定 | 第26-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-42页 |
| 3.1 Tnk23载体的验证 | 第29-30页 |
| 3.2 甘蓝型油菜Tnt1插入突变体库的创建 | 第30-31页 |
| 3.2.1 愈伤培育时间与出芽率的关系 | 第30-31页 |
| 3.3 转化植株的分子水平检测 | 第31-33页 |
| 3.4 T_0代转基因植株侧翼序列分离与分析 | 第33-37页 |
| 3.4.1 侧翼序列分离 | 第33-34页 |
| 3.4.2 侧翼序列的定位 | 第34-36页 |
| 3.4.3 T-DNA整合到油菜基因组的分析 | 第36-37页 |
| 3.5 T_1代转基因植株基因表达分析 | 第37-39页 |
| 3.5.1 油菜叶片总RNA的提取 | 第38页 |
| 3.5.2 半定量RT-PCR | 第38-39页 |
| 3.6 T_1代表型观察 | 第39-40页 |
| 3.7 远源杂交获得白菜转基因材料 | 第40-42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-53页 |
| 附录 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
