摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第14-24页 |
1.1 日本牙鲆 | 第14页 |
1.2 鱼类先天性免疫 | 第14-20页 |
1.3 中性粒细胞胞外诱捕网(NETs) | 第20-21页 |
1.4 非特异性核酸内切酶 | 第21-23页 |
1.5 目的 | 第23-24页 |
第二章 Jf_ENDOD1 cDNA克隆与序列分析 | 第24-34页 |
2.1 材料与方法 | 第24-28页 |
2.1.1 实验材料 | 第24页 |
2.1.2 总RNA提取 | 第24页 |
2.1.3 RACE-PCR合成Jf_ENDOD1 cDNA 5’端片段 | 第24-25页 |
2.1.4 分段测序获得Jf_ENDOD1 cDNA序列 | 第25-28页 |
2.1.5 Jf_ENDOD1序列分析 | 第28页 |
2.2 实验结果 | 第28-32页 |
2.2.1 Jf_ENDOD1基因cDNA克隆及序列分析 | 第28-30页 |
2.2.2 多重序列比对及系统分析 | 第30-32页 |
2.3 讨论 | 第32-34页 |
第三章 Jf_ENDOD1组织分布特异性分析 | 第34-38页 |
3.1 材料与方法 | 第34-35页 |
3.1.1 实验材料 | 第34页 |
3.1.2 总RNA提取 | 第34页 |
3.1.3 cDNA合成 | 第34-35页 |
3.1.4 RT-PCR扩增各组织Jf_ENDOD1及内控基因 | 第35页 |
3.2 实验结果 | 第35-36页 |
3.3 讨论 | 第36-38页 |
第四章 Jf_ENDOD1重组质粒构建及蛋白纯化 | 第38-45页 |
4.1 材料与方法 | 第38-43页 |
4.1.1 实验材料 | 第38页 |
4.1.2 重组菌构建 | 第38-41页 |
4.1.3 重组蛋白纯化及复性 | 第41-42页 |
4.1.4 SDS-PAGE检测重组蛋白 | 第42-43页 |
4.1.5 Western-blotting检测重组蛋白 | 第43页 |
4.2 实验结果 | 第43-44页 |
4.3 讨论 | 第44-45页 |
第五章 重组蛋白及鱼总蛋白DNase活性分析 | 第45-51页 |
5.1 材料与方法 | 第45-47页 |
5.1.1 实验材料 | 第45页 |
5.1.2 RT-PCR检测Jf_ENDOD1 mRNA表达量 | 第45-46页 |
5.1.3 总蛋白提取 | 第46页 |
5.1.4 DNase活性试验 | 第46-47页 |
5.2 实验结果 | 第47-49页 |
5.3 讨论 | 第49-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第70页 |