| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-33页 |
| 1.1 芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的概念 | 第14-15页 |
| 1.2 木聚糖水解酶的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.2.1 木聚糖水解酶的结构 | 第15-18页 |
| 1.2.2 木聚糖水解酶的水解机制 | 第18页 |
| 1.3 半纤维素的研究进展 | 第18-22页 |
| 1.3.1 阔叶木半纤维素 | 第19-20页 |
| 1.3.2 禾本科植物半纤维素 | 第20-22页 |
| 1.4 半纤维素降解制备木寡糖研究进展 | 第22-30页 |
| 1.4.1 木寡糖的研究概况 | 第22-23页 |
| 1.4.2 木寡糖的制备方法 | 第23-25页 |
| 1.4.3 木寡糖的分离纯化 | 第25-29页 |
| 1.4.4 木寡糖的量化及结构表征 | 第29-30页 |
| 1.5 研究内容与目的意义 | 第30-33页 |
| 1.5.1 研究目的与意义 | 第30-31页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第31-32页 |
| 1.5.3 技术路线图 | 第32-33页 |
| 第二章 木聚糖酶XynA的制备及其与XynC在枫香树木聚糖中的酶解作用 | 第33-53页 |
| 2.1 试验材料 | 第33-35页 |
| 2.1.1 供试菌株与质粒 | 第33页 |
| 2.1.2 生化材料与试剂 | 第33-34页 |
| 2.1.3 引物设计 | 第34页 |
| 2.1.4 试验仪器 | 第34-35页 |
| 2.2 试验方法 | 第35-40页 |
| 2.2.1 B. subtilis 168基因组DNA的提取（Rhee et al. 2011） | 第35-36页 |
| 2.2.2 质粒DNA的提取 | 第36页 |
| 2.2.3 xynA基因的PCR扩增 | 第36-37页 |
| 2.2.4 DNA的胶回收 | 第37页 |
| 2.2.5 pET15b-xynA表达载体的构建 | 第37页 |
| 2.2.6 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第37-38页 |
| 2.2.7 xynA基因在Escherichia coli Rosetta 2 中的诱导表达 | 第38页 |
| 2.2.8 XynA木聚糖水解酶的纯化及酶活测定 | 第38-39页 |
| 2.2.9 木聚糖水解酶在枫香树木聚糖中的酶解体系配制 | 第39-40页 |
| 2.2.10 木聚糖水解酶XynA与XynC酶解枫香树木聚糖产物的薄层色谱分析 | 第40页 |
| 2.2.11 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析 | 第40页 |
| 2.2.12 核磁共振氢谱分析 | 第40页 |
| 2.3 结果与分析 | 第40-51页 |
| 2.3.1 木聚糖水解酶基因xynA的克隆、鉴定与表达载体构建 | 第40-43页 |
| 2.3.2 木聚糖水解酶的诱导表达及纯化 | 第43-45页 |
| 2.3.3 木聚糖水解酶XynA的酶学特性分析 | 第45-46页 |
| 2.3.4 木聚糖水解酶XynA与XynC酶解枫香树木聚糖产物的TLC分析 | 第46-47页 |
| 2.3.5 木聚糖水解酶XynA与XynC酶解枫香树木聚糖产物的基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）分析 | 第47-48页 |
| 2.3.6 木聚糖水解酶XynA与XynC酶解枫香树木聚糖所得产物的核磁共振氢谱（1H NMR）分析 | 第48-51页 |
| 2.4 小结 | 第51-53页 |
| 2.4.1 重组水解酶XynA的获得 | 第51页 |
| 2.4.2 重组水解酶XynA和XynC在枫香树木聚糖中的酶解作用及产物 | 第51-52页 |
| 2.4.3 各酶的酶解作用和产物示意图 | 第52-53页 |
| 第三章 枯草芽孢杆菌利用枫香树木聚糖生产酸性木寡糖 | 第53-66页 |
| 3.1 试验材料 | 第53-54页 |
| 3.1.1 菌株 | 第53页 |
| 3.1.2 材料与试剂 | 第53-54页 |
| 3.1.3 试验仪器 | 第54页 |
| 3.2 试验方法 | 第54-58页 |
| 3.2.1 枯草芽孢杆菌168突变菌株的构建 | 第54-56页 |
| 3.2.2 菌株复苏 | 第56页 |
| 3.2.3 枯草芽孢杆菌生长曲线的绘制 | 第56-57页 |
| 3.2.4 菌液里总糖的测定 | 第57页 |
| 3.2.5 酶解产物的TLC分析 | 第57页 |
| 3.2.6 酶解产物的基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析 | 第57-58页 |
| 3.2.7 酶解产物的核磁共振氢谱分析 | 第58页 |
| 3.3 结果与分析 | 第58-64页 |
| 3.3.1 枯草芽孢杆菌的生长曲线 | 第58-59页 |
| 3.3.2 总糖的利用率 | 第59页 |
| 3.3.3 菌液里生成产物的TLC分析 | 第59-60页 |
| 3.3.4 菌液里累积产物的MALDI-TOF-MS分析 | 第60-61页 |
| 3.3.5 菌液里累积产物的1H NMR分析 | 第61-64页 |
| 3.4 小结 | 第64-66页 |
| 3.4.1 168和MR45菌株的生长状况及产物 | 第65页 |
| 3.4.2 MR42菌株的生长状况及产物 | 第65页 |
| 3.4.3 MR44菌株的生长状况及产物 | 第65页 |
| 3.4.4 酶解产物糖链长度的计算 | 第65-66页 |
| 第四章 木聚糖水解酶和阿拉伯呋喃糖水解酶在甜高粱秆木聚糖中的酶解反应 | 第66-74页 |
| 4.1 试验材料 | 第66页 |
| 4.2 试验方法 | 第66-69页 |
| 4.2.1 混合酶解液的配制 | 第66-67页 |
| 4.2.2 酶解液中还原糖浓度的测定 | 第67-68页 |
| 4.2.3 酶解液中酶解产物的薄层色谱分析 | 第68页 |
| 4.2.4 酶解液中酶解产物的核磁共振氢谱（1H NMR）分析 | 第68-69页 |
| 4.3 结果与分析 | 第69-72页 |
| 4.3.1 木聚糖水解酶与阿拉伯呋喃糖水解酶Axh43酶解高粱秆木聚糖产物的TLC分析 | 第69-70页 |
| 4.3.2 高粱秆木聚糖酶解液中还原糖浓度的测定 | 第70页 |
| 4.3.3 木聚糖酶与阿拉伯糖水解酶Axh43酶解高粱秆木聚糖产物的核磁共振氢谱分析 | 第70-72页 |
| 4.4 小结 | 第72-74页 |
| 4.4.1 XynA在甜高粱秆木聚糖中的酶解行为及产物 | 第72页 |
| 4.4.2 Axh43在甜高粱秆木聚糖中的酶解行为及产物 | 第72-73页 |
| 4.4.3 XynC + Axh43共同作用于甜高粱秆木聚糖的酶解行为及产物 | 第73页 |
| 4.4.4 XynA + XynC + Axh43共同作用于甜高粱秆木聚糖的酶解行为及产物 | 第73页 |
| 4.4.5 各酶的酶解作用示意图 | 第73-74页 |
| 第五章 枯草芽孢杆菌利用甜高粱秆木聚糖生产酸性木寡糖 | 第74-86页 |
| 5.1 试验材料 | 第74-75页 |
| 5.1.1 菌株 | 第74页 |
| 5.1.2 材料与试剂 | 第74-75页 |
| 5.1.3 试验仪器 | 第75页 |
| 5.2 试验方法 | 第75-76页 |
| 5.2.1 菌株复苏 | 第75页 |
| 5.2.2 枯草芽孢杆菌168与MR44生长曲线的绘制 | 第75页 |
| 5.2.3 菌液里总糖的测定 | 第75页 |
| 5.2.4 菌液里产物的TLC分析 | 第75页 |
| 5.2.5 菌液里产物的核磁共振氢谱分析 | 第75-76页 |
| 5.2.6 强阴离子交换柱法分离纯化酸性木寡糖 | 第76页 |
| 5.3 结果与分析 | 第76-83页 |
| 5.3.1 生长曲线 | 第76-77页 |
| 5.3.2 底物的利用率 | 第77-78页 |
| 5.3.3 菌液里生成的酸性木寡糖TLC分析 | 第78-79页 |
| 5.3.4 菌液里生成的酸性木寡糖1H NMR分析 | 第79-81页 |
| 5.3.5 菌液里酸性木寡糖的分离纯化 | 第81-83页 |
| 5.4 小结 | 第83-86页 |
| 5.4.1 168和MR44在甜高粱秆木聚糖中的生长情况 | 第84页 |
| 5.4.2 168和MR44产物的TLC分析 | 第84页 |
| 5.4.3 168和MR44产物结构的1H NMR分析 | 第84页 |
| 5.4.4 MR44酶解产物的纯化 | 第84-85页 |
| 5.4.5 MR44的酶解示意图 | 第85-86页 |
| 第六章 结论及展望 | 第86-90页 |
| 6.1 总结 | 第86-89页 |
| 6.2 创新点 | 第89页 |
| 6.3 展望 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 作者简介 | 第101页 |
