| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-22页 |
| 第一章 引言 | 第22-42页 |
| ·病原学 | 第22-24页 |
| ·分类 | 第22页 |
| ·理化特性 | 第22页 |
| ·基因组结构 | 第22-23页 |
| ·PCV流行病学 | 第23-24页 |
| ·PCV转录表达和复制 | 第24-27页 |
| ·PCV转录表达 | 第24-25页 |
| ·PCV复制酶复合体 | 第25-26页 |
| ·PCV复制 | 第26-27页 |
| ·PVC2感染 | 第27-30页 |
| ·PMWS起源 | 第27页 |
| ·PCV2感染的临床特征 | 第27-28页 |
| ·PCV2感染相关疾病 | 第28-29页 |
| ·PCV2感染的病理特征 | 第29-30页 |
| ·PCV2感染与宿主免疫 | 第30-31页 |
| ·PCV2感染途径及传播 | 第30页 |
| ·PCV2和宿主免疫 | 第30-31页 |
| ·PCV重组 | 第31-33页 |
| ·PCV2同种基因型间的重组 | 第31-32页 |
| ·PCV2不同基因型间的重组 | 第32页 |
| ·PCV1和PCV2间的重组 | 第32-33页 |
| ·PCV2诊断技术 | 第33-36页 |
| ·PMWS判断标准 | 第33页 |
| ·PCV2感染实验室诊断技术 | 第33-36页 |
| ·PCV2疫苗 | 第36-41页 |
| ·目前可用的商品化PCV2 疫苗 | 第36-37页 |
| ·试验 感染中商品化疫苗免疫效力 | 第37页 |
| ·免疫策略 | 第37-38页 |
| ·试验条件下PCV2新型疫苗 | 第38-41页 |
| ·研究的目的和意义 | 第41-42页 |
| 第二章 我国部分地区PCV2流行毒株遗传变异分析 | 第42-53页 |
| 摘要 | 第42页 |
| ·材料和方法 | 第42-43页 |
| ·病料来源及病毒分离 | 第42页 |
| ·试剂及仪器 | 第42-43页 |
| ·引物设计和PCR扩增 | 第43页 |
| ·病毒基因组克隆及重组质粒鉴定 | 第43页 |
| ·病毒全长基因核苷酸序列测定与分析 | 第43页 |
| ·分离毒株基因组PCR-RFLP | 第43页 |
| ·结果 | 第43-52页 |
| ·病毒基因克隆及鉴定 | 第43-45页 |
| ·病毒基因序列分析 | 第45页 |
| ·PCV2分离毒株基因型鉴 定 | 第45页 |
| ·碱基缺失与突变分析 | 第45-46页 |
| ·ORF2编码Cap蛋白序列分析 | 第46-48页 |
| ·遗传进化树的构建 | 第48-51页 |
| ·分离毒株基因分型 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| 第三章 PCV2-Cap蛋白核定位信号区抗原表位的鉴定 | 第53-63页 |
| 摘要 | 第53页 |
| ·材料和方法 | 第53-56页 |
| ·PCV2-Cap蛋白单克隆抗体的制备及标准毒株 | 第53-54页 |
| ·试剂及仪器 | 第54页 |
| ·Cap蛋白基因的截短扩增引物 | 第54-55页 |
| ·Cap蛋白截短表达载体的构建 | 第55页 |
| ·PCV2-Cap蛋白截短表达及Westernblot分析 | 第55页 |
| ·肽扫 描法抗原表位鉴定 | 第55-56页 |
| ·肽扫 描法抗原表位精确定位 | 第56页 |
| ·核心序列与PCV2阳性血清反应原性鉴定 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-61页 |
| ·Cap蛋白截短表达基因扩增及鉴定 | 第56-57页 |
| ·PCV2-Cap蛋白截短表达及Westernblot鉴定 | 第57-59页 |
| ·PCV2-CapA段合成肽抗原表位鉴定 | 第59-60页 |
| ·PCV2-CapA-b段合成肽抗原表位鉴定 | 第60页 |
| ·PCV2-CapA-b-1段合成肽抗原表位精确定位 | 第60页 |
| ·核心序列与PCV2阳性血清反应原性鉴定 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 第四章 PCV2不同基因型毒株感染性克隆构建及生物学特性 | 第63-72页 |
| 摘要 | 第63页 |
| ·材料与方法 | 第63-66页 |
| ·细胞、毒株、质粒及抗体 | 第63-64页 |
| ·试剂及仪器 | 第64页 |
| ·引物设计和PCR扩增 | 第64页 |
| ·病毒基因组克隆及重组质粒鉴定 | 第64页 |
| ·病毒基因组环化及DNA转染细胞 | 第64-65页 |
| ·克隆毒株的拯救及免疫学 鉴定 | 第65页 |
| ·克隆毒株电镜形态学观察 | 第65页 |
| ·克隆毒株基因组测序及PCR-RFLP 分析 | 第65页 |
| ·克隆毒株细胞传代毒价测定 | 第65页 |
| ·克隆毒株感染细胞动力学测定 | 第65页 |
| ·克隆毒株抗原性差异鉴定 | 第65-66页 |
| ·结果 | 第66-70页 |
| ·病毒感染性克隆的构建 | 第66页 |
| ·病毒的拯救及鉴定 | 第66-67页 |
| ·克隆毒株免疫电镜 察 | 第67页 |
| ·克隆毒株基因组测序及PCR-RFLP分析 | 第67-68页 |
| ·克隆毒株体外细胞传代毒价测定 | 第68-69页 |
| ·克隆毒株感染细胞动力学测定 | 第69页 |
| ·克隆毒株抗原性差异性分析 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| 第五章 PCV2a/2b/2d三种基因型毒株动物感染试验 | 第72-85页 |
| 摘要 | 第72页 |
| ·材料和方法 | 第72-77页 |
| ·细胞和毒株 | 第72-74页 |
| ·试剂及仪器 | 第74页 |
| ·动物 | 第74页 |
| ·动物试验设计 | 第74-75页 |
| ·临床检查 | 第75页 |
| ·试验猪PCV2抗体检测 | 第75页 |
| ·PCV2病毒血症检测 | 第75页 |
| ·不同组织器官PCV2量检测 | 第75-76页 |
| ·致病性研究 | 第76页 |
| ·外周血白细胞亚群变化 | 第76页 |
| ·攻毒组组织病料PCV2基因组测序 | 第76页 |
| ·统计分析 | 第76-77页 |
| ·结果 | 第77-84页 |
| ·临床观察 | 第77-79页 |
| ·平均日增重(ADWG) | 第79-80页 |
| ·病毒血症 | 第80页 |
| ·PCV2抗体检测 | 第80-81页 |
| ·荧光定量检测不同组织脏器中PCV2分布与载量 | 第81-82页 |
| ·病理损伤 | 第82页 |
| ·外周血免疫细胞亚群变化 | 第82-83页 |
| ·攻毒组PCV2序列印证 | 第83-84页 |
| ·讨论 | 第84-85页 |
| 第六章 PCV2a/2b基因型体外重组及其生物学特性研究 | 第85-96页 |
| 摘要 | 第85页 |
| ·材料与方法 | 第85-88页 |
| ·细胞和病毒 | 第85页 |
| ·试剂及仪器 | 第85-86页 |
| ·PCV2a和PCV2b不同基因型毒株共感染试验 | 第86页 |
| ·重组病毒分离及鉴定 | 第86页 |
| ·重组病毒感染性克隆构建 | 第86页 |
| ·病毒形态学观察 | 第86页 |
| ·重组病毒与其亲本毒体外复制效率比较 | 第86-87页 |
| ·遗传进化树分析 | 第87页 |
| ·抗原性分析 | 第87页 |
| ·中和试验 | 第87-88页 |
| ·结果 | 第88-94页 |
| ·PCV2重组突变毒株分离 | 第88-89页 |
| ·重组病毒鉴定 | 第89-90页 |
| ·重组病毒拯救及鉴定 | 第90-91页 |
| ·形态学电镜观察 | 第91页 |
| ·PCV2重组病毒体外复制效率 | 第91-92页 |
| ·重组毒和亲本毒遗传进化分析 | 第92-93页 |
| ·重组毒株与亲本毒抗原性差异 | 第93-94页 |
| ·中和试验结果 | 第94页 |
| ·讨论 | 第94-96页 |
| 第七章 PCV2a与PCV2b基因型重组毒株动物感染试验 | 第96-109页 |
| 摘要 | 第96页 |
| ·材料和方法 | 第96-100页 |
| ·细胞和毒株 | 第96-97页 |
| ·试剂及仪器 | 第97-98页 |
| ·动物 | 第98页 |
| ·动物试验设计 | 第98页 |
| ·临床检查 | 第98页 |
| ·PCV2抗体检测 | 第98-99页 |
| ·PCV2病毒血症检测 | 第99页 |
| ·不同组织器官PCV2定量检测 | 第99页 |
| ·致病性研究 | 第99-100页 |
| ·外周血白细胞亚群变化 | 第100页 |
| ·攻毒组病料PCV2基因组测序 | 第100页 |
| ·统计分析 | 第100页 |
| ·结果 | 第100-108页 |
| ·临床观察 | 第100-103页 |
| ·平均日增重（ADWG） | 第103-104页 |
| ·病毒血症检测结果 | 第104页 |
| ·PCV2抗体检测 | 第104-105页 |
| ·荧光定量检测不同组织脏器中PCV2分布与载量 | 第105-106页 |
| ·病理损伤 | 第106-107页 |
| ·外周血免疫细胞亚群变化 | 第107页 |
| ·序列印证 | 第107-108页 |
| ·讨论 | 第108-109页 |
| 第八章 PCV1与PCV2嵌合型毒株的构建及鉴定 | 第109-115页 |
| 摘要 | 第109页 |
| ·材料和方法 | 第109-112页 |
| ·细胞和毒株 | 第109-110页 |
| ·试剂及仪器 | 第110页 |
| ·重组质粒线性化和替换片段扩增 | 第110-111页 |
| ·重组嵌合质粒构建 | 第111页 |
| ·病毒基因组环化及DNA转染细胞 | 第111-112页 |
| ·克隆毒株的拯救及免疫学鉴定 | 第112页 |
| ·克隆毒株基因组测序 | 第112页 |
| ·结果 | 第112-113页 |
| ·嵌合病毒重组质粒的构建 | 第112-113页 |
| ·病毒的拯救及鉴定 | 第113页 |
| ·讨论 | 第113-115页 |
| 第九章 全文结论 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-135页 |
| 致谢 | 第135-136页 |
| 作者简历 | 第136页 |
| 博士期间发表文章 | 第136-137页 |
