| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-28页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）概述 | 第14-23页 |
| ·病原学 | 第14-19页 |
| ·流行病学 | 第19-20页 |
| ·临床症状与病理变化 | 第20页 |
| ·致病机理 | 第20-21页 |
| ·HP-PRRSV 变异分析 | 第21-22页 |
| ·疫苗研究与预防控制 | 第22-23页 |
| ·套式病毒主要蛋白酶（丝氨酸蛋白酶）研究进展 | 第23-26页 |
| ·命名与活性中心 | 第23-24页 |
| ·底物酶切位点的特异性 | 第24-25页 |
| ·巢状病毒主要蛋白酶的3D 结构 | 第25-26页 |
| ·实验目的与意义 | 第26-28页 |
| 第二章 PRRSV 不同毒株 Nsp4 表达及纯化 | 第28-35页 |
| ·材料与方法 | 第28-32页 |
| ·病毒株、菌株及载体 | 第28页 |
| ·试剂与药品 | 第28页 |
| ·仪器 | 第28页 |
| ·主要试剂配方 | 第28-29页 |
| ·PRRSV Nsp4 基因的克隆与表达 | 第29-32页 |
| ·结果 | 第32-34页 |
| ·目的基因的扩增、表达载体构建鉴定结果 | 第32-33页 |
| ·重组蛋白的表达纯化结果 | 第33页 |
| ·Western Blot 鉴定结果 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 PRRSV 不同毒株 Nsp4 酶动力参数测定 | 第35-41页 |
| ·材料与方法 | 第35-37页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第35页 |
| ·主要试剂配制方法 | 第35页 |
| ·HP-PRRSV HuN4 株与PRRSV CH-1a 株Nsp4 氨基酸序列比对 | 第35页 |
| ·本实验中酶动力学参数测定原理 | 第35-36页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第36页 |
| ·PRRSV Nsp4 酶动力参数的测定 | 第36页 |
| ·数据分析 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-38页 |
| ·HP-PRRSV HuN4 株与PRRSV CH-1a 株Nsp4 氨基酸序列比对结果 | 第37页 |
| ·标准曲线结果 | 第37-38页 |
| ·HP-PRRSV HuN4 株与PRRSV Ch-1a 株Nsp4 酶动力曲线结果 | 第38页 |
| ·HP-PRRSV HuN4 株与PRRSV CH-1a 株Nsp4 酶动力参数的值 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-41页 |
| 第四章 PRRSV 不同毒株 Nsp4 mRNA 的体外变化 | 第41-50页 |
| ·材料与方法 | 第41-43页 |
| ·病毒和细胞 | 第41页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第41页 |
| ·引物和探针 | 第41-42页 |
| ·阳性标准品制备 | 第42页 |
| ·反应体系与条件的优化 | 第42页 |
| ·标准曲线的建立 | 第42页 |
| ·特异性试验 | 第42页 |
| ·敏感性试验 | 第42页 |
| ·重复性试验 | 第42页 |
| ·病毒效价测定 | 第42-43页 |
| ·Marc-145 细胞培养、接毒和收毒 | 第43页 |
| ·PAM 细胞培养、接毒和收毒 | 第43页 |
| ·荧光定量 PCR 检测 | 第43页 |
| ·结果 | 第43-47页 |
| ·荧光定量 PCR 反应条件优化 | 第43-44页 |
| ·标准曲线的建立 | 第44页 |
| ·特异性试验结果 | 第44-45页 |
| ·敏感性试验结果 | 第45页 |
| ·重复性试验结果 | 第45-46页 |
| ·PRRSV 不同毒株Nsp4 mRNA 在Marc-145 的动态变化情况 | 第46-47页 |
| ·PRRSV 不同毒株Nsp4 mRNA 在PAM 的动态变化情况 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-50页 |
| 第五章 全文结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
