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大丽轮枝菌蛋白激发子纯化、基因克隆与功能分析

摘要第1-7页
Abstract第7-17页
第一章 引言第17-33页
   ·激发子的种类第17-20页
     ·生物源激发子第17-20页
     ·非生物源激发子和机械刺激第20页
   ·激发子诱导的植物防御反应第20-31页
     ·植物的免疫系统第21-22页
     ·诱导植物抗性反应第22页
     ·激发子诱导植物早期信号事件第22-24页
     ·激发子诱导植物防御物质基础第24-27页
     ·激发子诱导植物反应次序第27-28页
     ·系统性抗性第28页
     ·信号途径的交联调节第28-29页
     ·SA-JA-ET 信号途径中的信号结点第29-31页
   ·大丽轮枝菌激发子研究现状第31页
   ·本研究的目的意义第31-33页
第二章 大丽轮枝菌蛋白激发子分离纯化及理化性质鉴定第33-46页
   ·实验材料第33-34页
     ·菌株和植物材料第33页
     ·实验试剂和仪器第33-34页
     ·培养基与试剂配方第34页
   ·实验方法第34-37页
     ·大丽轮枝菌的培养第34页
     ·粗蛋白的提取第34-35页
     ·蛋白激发子生物活性的检测第35页
     ·大丽轮枝菌蛋白激发子的纯化第35页
     ·蛋白激发子等电点的测定第35-36页
     ·激发子理化性质鉴定第36-37页
   ·结果分析第37-44页
     ·大丽轮枝菌蛋白激发子的纯化第37-39页
     ·蛋白质等电点的测定第39-40页
     ·蛋白激发子氨基酸序列 de novo 测定第40-42页
     ·激发子理化性质鉴定第42-44页
   ·本章小结与讨论第44-46页
第三章 蛋白激发子PevD1 诱导烟草抗病防御反应第46-61页
   ·实验材料第46-47页
     ·菌株和植物材料第46页
     ·实验试剂和仪器第46-47页
     ·培养基与试剂配方第47页
   ·实验方法第47-51页
     ·一氧化氮的检测第47-48页
     ·PevD1 激活过氧化氢的沉积和活性氧爆发第48页
     ·PevD1 诱导细胞外质的碱化第48页
     ·PevD1 诱导胼胝质的产生第48页
     ·PevD1 诱导酚类和木质素的产生和积累第48-49页
     ·PevD1 诱导烟草细胞死亡第49-50页
     ·丙氨酸解氨酶(PAL)活性测定第50页
     ·多酚氧化酶(PPO)活性测定第50-51页
     ·过氧化物酶(POD)活性测定第51页
   ·结果分析第51-59页
     ·激发子 PevD1 诱导一氧化氮的产生第51-52页
     ·PevD1 激活过氧化氢的沉积和活性氧爆发第52-53页
     ·PevD1 诱导细胞外质的碱化第53-54页
     ·PevD1 诱导胼胝质的积累第54页
     ·PevD1 诱导酚类和木质素的产生和积累第54-55页
     ·PevD1 诱导烟草细胞死亡第55-58页
     ·激发子诱导烟草叶片丙氨酸解氨酶(PAL)活性提高第58页
     ·激发子诱导烟草叶片多酚氧化酶(PPO)活性提高第58-59页
     ·激发子诱导烟草叶片过氧化物酶(POD)活性提高第59页
   ·本章小结与讨论第59-61页
第四章 大丽轮枝菌蛋白激发子基因克隆及表达第61-81页
   ·实验材料第61-62页
     ·菌株和植物材料第61页
     ·实验试剂和仪器第61-62页
     ·培养基与试剂配方第62页
   ·实验方法第62-68页
     ·大丽轮枝菌总RNA 的提取第62页
     ·第一链 cDNA 的合成第62-63页
     ·特异引物的设计第63页
     ·RT-PCR 目的基因的扩增第63页
     ·不同退火温度对扩增的影响第63页
     ·PCR 产物与T 载体的连接,转化及验证第63-64页
     ·蛋白激发子 PevD1 的原核表达载体构建第64-66页
     ·连接产物转化DH5α筛选阳性克隆第66页
     ·重组表达载体转化表达菌株第66页
     ·大丽轮枝菌激发子基因诱导表达第66-67页
     ·重组蛋白的纯化第67页
     ·重组蛋白生物活性检测第67页
     ·重组蛋白激发子对不同植物的过敏反应第67页
     ·重组蛋白激发子对棉苗的致萎性检测第67-68页
   ·结果分析第68-79页
     ·大丽轮枝菌总RNA 的提取第68页
     ·PevD1 编码基因序列获得第68-69页
     ·不同退火温度对扩增的影响第69页
     ·PCR 产物与T 载体的连接,转化及验证第69-72页
     ·蛋白激发子 PevD1 的原核表达载体构建第72-74页
     ·大丽轮枝菌激发子基因诱导表达第74-75页
     ·重组蛋白的纯化第75-77页
     ·重组蛋白生物活性检测第77-78页
     ·重组蛋白激发子对不同植物的过敏反应第78-79页
     ·重组蛋白激发子对棉苗的致萎性检测第79页
   ·本章小结与讨论第79-81页
第五章 PevD1 诱导烟草获得系统抗性及机制初探第81-87页
   ·实验材料第81-82页
     ·菌株和植物材料第81-82页
     ·实验试剂和仪器第82页
     ·培养基与试剂配方第82页
   ·实验方法第82-84页
     ·PevD1 诱导烟草抗 TMV 检测第82-83页
     ·PevD1 诱导烟草抗性相关基因第83-84页
   ·结果分析第84-86页
     ·PevD1 诱导提高烟草对 TMV 抗性第84-85页
     ·PevD1 诱导烟草抗性相关基因第85-86页
   ·本章小结与讨论第86-87页
第六章 全文结论第87-88页
参考文献第88-98页
附录第98-100页
致谢第100-101页
作者简历第101页

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