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可口革囊星虫降血压肽的制备以及其抑制机制研究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第1章 前言第11-21页
    1.1 可口革囊星虫的研究概况第11-12页
        1.1.1 可口革囊星虫概述第11页
        1.1.2 可口革囊星虫的药用价值第11页
        1.1.3 可口革囊星虫的研究进展第11-12页
    1.2 二维聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的研究与应用第12-13页
        1.2.1 二维聚丙烯酰胺凝胶电泳简述第12页
        1.2.2 二维聚丙烯酰胺凝胶电泳的应用第12-13页
    1.3 降血压肽的研究现状第13-16页
        1.3.1 高血压的现状第13页
        1.3.2 降血压肽的简介第13-14页
        1.3.3 降血压肽的制备方法第14页
        1.3.4 国内外对降血压肽的分离提取工艺研究第14-15页
        1.3.5 降血压肽的结构特征第15-16页
    1.4 分子对接研究的现状第16-19页
        1.4.1 分子对接概述第16-17页
        1.4.2 分子对接的方法第17-18页
        1.4.3 分子对接方法在降血压肽作用机理研究中的应用第18-19页
    1.5 课题研究目的与意义第19-20页
    1.6 课题研究的主要内容第20-21页
        1.6.1 可口革囊星虫水溶性蛋白的二维电泳分析和蛋白鉴定第20页
        1.6.2 降血压肽的制备、分离、鉴定与性质研究第20页
        1.6.3 降血压肽对ACE的抑制作用的机理研究第20-21页
第2章 可口革囊星虫水溶性蛋白的二维电泳分析第21-33页
    2.1 前言第21-22页
    2.2 实验材料和仪器第22-23页
        2.2.1 主要实验材料第22页
        2.2.2 主要仪器设备第22-23页
    2.3 实验方法第23-27页
        2.3.1 星虫水溶性蛋白的提取第23页
        2.3.2 星虫水溶性蛋白二维电泳样品的制备第23页
            2.3.2.1 葡聚糖凝胶G100的装填第23页
            2.3.2.2 星虫水溶性蛋白的葡聚糖凝胶G100纯化第23页
        2.3.3 二维电泳原理及操作步骤第23-26页
            2.3.3.1 第一项等电聚焦电泳(IEF)第23-24页
            2.3.3.2 胶条的平衡第24-25页
            2.3.3.3 第二向SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-Page)第25-26页
            2.3.3.4 凝胶扫描、拍照第26页
        2.3.4 蛋白质点的胶内酶解第26-27页
        2.3.5 MALDI-TOF/TOF分析第27页
        2.3.6 数据库查询第27页
        2.3.7 虚拟酶切第27页
    2.4 结果与讨论第27-32页
        2.4.1 可口革囊星虫水溶性蛋白的纯化第27-28页
        2.4.2 可口革囊星虫水溶性蛋白二维电泳的图谱分析第28-29页
        2.4.3 可口革囊星虫水溶性蛋白蛋白点的质谱分析第29-31页
        2.4.4 蛋白质的虚拟酶切第31-32页
    2.5 小结第32-33页
第3章 降血压肽的制备、分离、鉴定与性质研究第33-47页
    3.1 前言第33-34页
    3.2 主要实验材料和仪器第34-35页
        3.2.1 实验材料第34页
        3.2.2 主要仪器设备第34-35页
    3.3 实验方法第35-38页
        3.3.1 星虫水溶性蛋白的提取第35页
        3.3.2 水溶性蛋白质水解液的制备第35页
        3.3.3 SDS-Page电泳第35页
        3.3.4 体外ACE抑制率的测定方法第35-36页
            3.3.4.1 色谱条件第35页
            3.3.4.2 体外抑制率测定方法第35-36页
            3.3.4.3 体外抑制率计算方法第36页
        3.3.5 IC_(50)值的计算第36页
        3.3.6 胃胰酶解液的G15纯化第36页
        3.3.7 HPLC液相制备第36-37页
        3.3.8 MALDI-TOF/TOF(质辅助激光解吸电离飞行时间质谱)分析第37页
        3.3.9 降血压肽肽段的合成与IC_(50)测定第37页
        3.3.10 降血压肽抑制模式研究第37-38页
    3.4 结果与讨论第38-46页
        3.4.1 SDS-page电泳分析结果第38页
        3.4.2 不同酶解步骤酶解液的IC_(50)值计算第38-39页
        3.4.3 不同酶解步骤的IC_(50)值第39-40页
        3.4.4 Sephadex G-15对星虫胃胰蛋白酶水解物的纯化第40页
        3.4.5 RP-HPLC分离纯化第40-41页
        3.4.6 MALDI-TOF/TOF和液相分析第41-44页
        3.4.7 多肽的IC_(50)值计算第44-45页
        3.4.8 合成肽的抑制类型分析第45-46页
    3.5 本章小结第46-47页
第4章 降血压肽对血管紧张素转化酶作用机理的研究第47-59页
    4.1 前言第47-51页
    4.2 实验材料第51页
    4.3 实验方法第51-52页
        4.3.1 多肽氨基酸序列结构的绘制第51页
        4.3.2 多肽的能量最小化第51页
        4.3.3 三个多肽与ACE酶的柔性对接第51-52页
    4.4 结果与讨论第52-58页
        4.4.1 多肽与血管紧张素转化酶的对接分析第52-57页
        4.4.2 三个多肽与ACE的对接能量分析第57-58页
    4.5 本章小结第58-59页
第5章 结论与展望第59-61页
    5.1 结论第59页
    5.2 展望第59-61页
参考文献第61-67页
致谢第67页

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