| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 前言 | 第10-24页 |
| 1.1 林可霉素简介 | 第10-11页 |
| 1.1.1 林可霉素分子结构 | 第10-11页 |
| 1.1.2 林可霉素的抑菌机理及应用 | 第11页 |
| 1.2 林可霉素合成途径 | 第11-14页 |
| 1.2.1 糖基合成部分 | 第12页 |
| 1.2.2 氨基合成部分 | 第12-13页 |
| 1.2.3 基团间的凝聚与修饰 | 第13-14页 |
| 1.3 林可霉素生物合成基因簇 | 第14-16页 |
| 1.3.1 林可霉素合成过程中的推定甲基化基因 | 第15页 |
| 1.3.2 林可霉素合成过程中的调控基因 | 第15-16页 |
| 1.4 林可霉素的生产发酵及调控工艺 | 第16-20页 |
| 1.4.1 林可霉素的生产发酵现状 | 第16-17页 |
| 1.4.2 林可霉素的发酵调控工艺 | 第17-20页 |
| 1.5 代谢流分析 | 第20-22页 |
| 1.6 国内外研究现 | 第22-23页 |
| 1.6.1 学科的国内研究现状 | 第22页 |
| 1.6.2 学科的国外研究现状 | 第22-23页 |
| 1.7 课题研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第24-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-27页 |
| 2.1.1 菌种 | 第24页 |
| 2.1.2 培养基 | 第24-25页 |
| 2.1.3 实验所用试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.4 实验所用仪器 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27页 |
| 2.2.1 摇瓶 | 第27页 |
| 2.2.2 发酵罐 | 第27页 |
| 2.3 实验结果的测定方法 | 第27-33页 |
| 2.3.1 杯碟法测定林可霉素生物效价 | 第27-29页 |
| 2.3.2 高效液相色谱(HPLC)测定林可霉素效价 | 第29页 |
| 2.3.3 有机酸的测定方法 | 第29-31页 |
| 2.3.4 氨基酸的测定方法 | 第31-33页 |
| 2.4 发酵过程中所需参数的测定方法 | 第33-36页 |
| 2.4.1 测定菌体湿重(PMV) | 第33页 |
| 2.4.2 测定菌体干重(DCW) | 第33页 |
| 2.4.3 测定发酵液游离氨基氮含量 | 第33-34页 |
| 2.4.4 测定发酵液中还原糖含量 | 第34-36页 |
| 第三章 添加丙氨酸对林可霉素合成的影响 | 第36-45页 |
| 3.1 材料与方法 | 第36-37页 |
| 3.1.1 实验用菌种 | 第36页 |
| 3.1.2 实验用培养基 | 第36页 |
| 3.1.3 培养方法 | 第36页 |
| 3.1.4 分析方法 | 第36-37页 |
| 3.2 实验结果与分析 | 第37-44页 |
| 3.2.1 前期种子罐和发酵罐工艺调节 | 第37-40页 |
| 3.2.2 添加丙氨酸发酵罐放大实验 | 第40-44页 |
| 3.3 小结 | 第44-45页 |
| 第四章 添加三甲胺的发酵罐放大实验 | 第45-51页 |
| 4.1 材料与方法 | 第45-46页 |
| 4.1.1 实验用菌种 | 第45页 |
| 4.1.2 实验用培养基 | 第45页 |
| 4.1.3 培养方法 | 第45页 |
| 4.1.4 分析方法 | 第45-46页 |
| 4.2 实验结果与分析 | 第46-50页 |
| 4.2.1 菌浓变化 | 第46页 |
| 4.2.2 pH变化 | 第46-47页 |
| 4.2.3 还原糖变化 | 第47页 |
| 4.2.4 氨基氮变化 | 第47-48页 |
| 4.2.5 酪氨酸变化 | 第48-49页 |
| 4.2.6 L-多巴含量变化 | 第49-50页 |
| 4.2.7 效价变化 | 第50页 |
| 4.3 小结 | 第50-51页 |
| 第五章 林可霉素发酵过程部分基因转录水平分析 | 第51-64页 |
| 5.1 制备菌体样品 | 第51-52页 |
| 5.2 RNA样品制备 | 第52-53页 |
| 5.2.1 实验准备 | 第52页 |
| 5.2.2 实验方法 | 第52-53页 |
| 5.3 琼脂糖凝胶电泳检测RNA | 第53-54页 |
| 5.3.1 实验准备 | 第53页 |
| 5.3.2 实验方法 | 第53页 |
| 5.3.3 电泳结果 | 第53-54页 |
| 5.4 反转录反应 | 第54-55页 |
| 5.4.1 基因组DNA的除去反应 | 第54页 |
| 5.4.2 反转录反应 | 第54-55页 |
| 5.5 设计引物 | 第55页 |
| 5.6 RT-qPCR | 第55-56页 |
| 5.6.1 配制PCR反应液 | 第56页 |
| 5.6.2 进行RT-PCR反应 | 第56页 |
| 5.7 实验结果 | 第56-63页 |
| 5.7.1 出发菌株和突变菌株部分基因转录水平差异分析 | 第57-61页 |
| 5.7.2 添加丙氨酸后对相关基因表达量的影响 | 第61-62页 |
| 5.7.3 添加三甲胺后对相关基因表达量的影响 | 第62-63页 |
| 5.8 小结 | 第63-64页 |
| 第六章 结论与展望 | 第64-66页 |
| 6.1 结论 | 第64页 |
| 6.2 展望 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 致谢 | 第69页 |