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H7N9亚型流感病毒的遗传进化分析及对鸡的致病性研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
1 前言第11-14页
    1.1 禽流感的病原学特性第11页
    1.2 H7N9亚型流感病毒的研究现状第11-13页
    1.3 研究目的及意义第13-14页
2 材料与方法第14-21页
    2.1 材料第14-17页
        2.1.1 供检样品第14页
        2.1.2 标准阳性血清第14页
        2.1.3 鸡胚第14页
        2.1.4 毒株第14-15页
        2.1.5 实验动物第15页
        2.1.6 常用试剂及配置第15-16页
        2.1.7 主要仪器第16页
        2.1.8 主要分子生物学试剂第16页
        2.1.9 主要生物学软件第16-17页
    2.2 方法第17-21页
        2.2.1 样品的采集第17页
        2.2.2 病毒分离第17页
        2.2.3 病原学鉴定第17页
        2.2.4 病毒的纯化第17-18页
        2.2.5 分子生物学鉴定及序列测定第18-19页
            2.2.5.1 引物的设计第18页
            2.2.5.2 病毒RNA的抽提第18页
            2.2.5.3 cDNA链的合成第18页
            2.2.5.4 PCR扩增第18-19页
            2.2.5.5 PCR产物的回收和纯化第19页
            2.2.5.6 各基因的序列测定、拼接和遗传演化分析第19页
        2.2.6 H7N9亚型流感病毒对鸡的致病性试验第19-21页
            2.2.6.1 毒株选择第19-20页
            2.2.6.2 鸡胚半数感染量(EID50)的测定第20页
            2.2.6.3 病毒对SPF鸡的致病性实验第20-21页
3 结果与分析第21-64页
    3.1 病毒的鉴定结果第21页
    3.2 分离毒株的分布特点第21-22页
    3.3 H7N9亚型流感病毒基因序列测定及遗传演化分析第22-24页
        3.3.1 HA基因序列及遗传演化分析第22页
        3.3.2 NA基因序列及遗传演化分析第22-23页
        3.3.3 内部基因的遗传演化分析第23页
        3.3.4 主要氨基酸位点突变分析第23-24页
    3.4 H7N9亚型流感病毒对鸡的致病性试验第24-64页
        3.4.1 4 株病毒EID_(50)的测定结果第24页
        3.4.2 感染SPF鸡临床表现第24页
        3.4.3 感染后SPF鸡肛咽和体内脏器的排毒情况第24页
        3.4.4 病理组织学变化第24-25页
        3.4.5 攻毒后第 14d的血清抗体第25-64页
4 讨论与结论第64-68页
    4.1 讨论第64-67页
        4.1.1 H7N9亚型流感病毒的流行病学调查第64-65页
        4.1.2 H7N9亚型流感病毒全基因序列测定及遗传进化分析第65-66页
        4.1.3 H7N9亚型流感病毒对鸡的致病性第66-67页
    4.2 结论第67-68页
致谢第68-69页
参考文献第69-72页
附录A 攻读学位期间发表的与学位论文相关的学术论文第72-79页
附录B 第三波疫情中14株H7N9亚型流感病毒部分基因的推导氨基酸序列第79-82页

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