摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
第一章 引言 | 第17-27页 |
1.1 单核细胞增生李斯特菌简介 | 第17-20页 |
1.1.1 PrfA因子 | 第17-18页 |
1.1.2 SigB因子 | 第18-19页 |
1.1.3 单核细胞增生李斯特菌的感染动物模型 | 第19-20页 |
1.2 秀丽隐杆线虫作为模式生物简介 | 第20-22页 |
1.2.1 秀丽隐杆线虫的生物学特性 | 第20页 |
1.2.2 秀丽隐杆线虫作为模式生物的优势 | 第20-21页 |
1.2.3 秀丽隐杆线虫作为研究病原细菌致病机制的模型 | 第21-22页 |
1.2.4 秀丽线虫作为探究单核细胞增生李斯特菌致病机制的模型研究进展 | 第22页 |
1.3 果蝇作为模式生物简介 | 第22-24页 |
1.3.1 果蝇的生物学特性 | 第22页 |
1.3.2 果蝇作为模式生物的优势 | 第22-23页 |
1.3.3 果蝇作为研究病原细菌致病机制的模型 | 第23页 |
1.3.4 果蝇作为探究单核细胞增生李斯特菌致病机制的模型研究进展 | 第23-24页 |
1.4 蜡样芽孢杆菌简介 | 第24-26页 |
1.4.1 蜡样芽孢杆菌生物学特性 | 第24页 |
1.4.2 蜡样芽孢杆菌的检测方法 | 第24-25页 |
1.4.3 蜡样芽孢杆菌的毒素研究进展 | 第25-26页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第26-27页 |
第二章 线虫不适合作为研究单核细胞增生李斯特菌致病机制的模型 | 第27-40页 |
2.1 实验材料与设备 | 第27-29页 |
2.1.1 线虫、细菌及培养条件 | 第27-28页 |
2.1.2 实验试剂及配制 | 第28页 |
2.1.3 实验设备 | 第28-29页 |
2.2 实验方法 | 第29-33页 |
2.2.1 线虫的同步化 | 第29页 |
2.2.2 检测不同培养基和抗生素对线虫生存和寿命的影响 | 第29页 |
2.2.3 线虫发育周期的测定 | 第29页 |
2.2.4 线虫寿命的测定 | 第29-30页 |
2.2.5 线虫产卵数的测定 | 第30页 |
2.2.6 线虫体表细菌计数方法 | 第30页 |
2.2.7 线虫消化道细菌计数方法 | 第30页 |
2.2.8 线虫粪便细菌计数 | 第30页 |
2.2.9 线虫对食物的趋向性 | 第30-31页 |
2.2.10 线虫发育周期中线虫的生长情况 | 第31页 |
2.2.11 不同细菌喂饲线虫后的产卵数和孵化 | 第31页 |
2.2.12 单核细胞增生李斯特菌在线虫体内传代培养 | 第31-32页 |
2.2.13 单核细胞增生李斯特菌SigB基因的检测 | 第32-33页 |
2.2.14 数据统计分析 | 第33页 |
2.3 实验结果 | 第33-38页 |
2.3.1 培养基和抗生素对线虫生存曲线和寿命的影响 | 第33-34页 |
2.3.2 单核细胞增生李斯特菌对线虫的致病能力 | 第34页 |
2.3.3 单核细胞增生李斯特菌和无害李斯特菌对线虫发育周期、寿命、产卵数和孵化率的影响 | 第34-35页 |
2.3.4 线虫虫龄对单核细胞增生李斯特菌致病性的影响 | 第35页 |
2.3.5 单核细胞增生李斯特菌喂饲线虫时,线虫体表、消化道和粪便中的细菌数 | 第35-36页 |
2.3.6 用不同的细菌喂饲线虫时,线虫达到各个发育阶段所需时间 | 第36页 |
2.3.7 线虫对食物的趋向性 | 第36页 |
2.3.8 SigB测序结果及蛋白质结构分析 | 第36-38页 |
2.4 讨论 | 第38-40页 |
第三章 果蝇可作为研究单核细胞增生李斯特菌侵染机制的模型 | 第40-52页 |
3.1 实验材料与设备 | 第40-42页 |
3.1.1 菌株的培养 | 第40页 |
3.1.2 果蝇培养及培养基的配制 | 第40-41页 |
3.1.3 实验试剂 | 第41页 |
3.1.4 实验设备 | 第41-42页 |
3.2 实验方法 | 第42-46页 |
3.2.1 确定适合培养果蝇以及单核细胞李斯特菌的培养基 | 第42页 |
3.2.2 果蝇发育周期的检测 | 第42-43页 |
3.2.3 细菌喂饲果蝇的产卵数的检测 | 第43页 |
3.2.4 细菌喂饲果蝇的孵化率的检测 | 第43-44页 |
3.2.5 细菌喂饲果蝇蛹鲜重、成蝇鲜重测量 | 第44页 |
3.2.6 显微注射果蝇 | 第44-45页 |
3.2.7 显微注射后果蝇体内的细菌数测量 | 第45页 |
3.2.8 统计分析 | 第45-46页 |
3.3 实验结果 | 第46-50页 |
3.3.1 李斯特菌-果蝇培养基的确定 | 第46页 |
3.3.2 喂饲法检测单核细胞增生李斯特菌对果蝇的致病能力 | 第46-47页 |
3.3.3 不同的细菌喂饲果蝇蛹鲜重、成蝇鲜重测量 | 第47页 |
3.3.4 显微注射法检测单核细胞增生李斯特菌对果蝇的致病能力 | 第47-48页 |
3.3.5 显微注射单核细胞增生李斯特菌后果蝇体内细菌增殖状况 | 第48-50页 |
3.4 讨论 | 第50-52页 |
第四章 一株蜡样芽胞杆菌的鉴定及毒性研究 | 第52-62页 |
4.1 实验材料和设备 | 第52-53页 |
4.1.1 秀丽隐杆线虫、果蝇及菌株 | 第52页 |
4.1.2 实验试剂及配制 | 第52-53页 |
4.1.3 实验设备 | 第53页 |
4.2 实验方法 | 第53-56页 |
4.2.1 形态学特征观察 | 第53-54页 |
4.2.2 伴孢晶体蛋白鉴定 | 第54页 |
4.2.3 16S rDNA序列的分析 | 第54-55页 |
4.2.4 细菌特异性毒力基因的鉴定 | 第55-56页 |
4.2.5 生化鉴定 | 第56页 |
4.2.6 利用秀丽隐杆线虫和果蝇为感染模型研究待检菌的致病性 | 第56页 |
4.3 实验结果 | 第56-60页 |
4.3.1 待测菌的菌落特征、芽孢和伴孢晶体蛋白 | 第56-57页 |
4.3.2 生理生化鉴定结果 | 第57-58页 |
4.3.3 16S rDNA测定 | 第58-59页 |
4.3.4 蜡样芽胞杆菌特异性毒力基因的检测结果 | 第59页 |
4.3.5 利用秀丽隐杆线虫和果蝇为感染模型研究待检菌致病性的结果 | 第59-60页 |
4.4 讨论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-68页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |