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单核细胞增生李斯特菌感染模型的建立及一株蜡样芽胞杆菌的鉴定和毒性研究

摘要第6-9页
Abstract第9-12页
第一章 引言第17-27页
    1.1 单核细胞增生李斯特菌简介第17-20页
        1.1.1 PrfA因子第17-18页
        1.1.2 SigB因子第18-19页
        1.1.3 单核细胞增生李斯特菌的感染动物模型第19-20页
    1.2 秀丽隐杆线虫作为模式生物简介第20-22页
        1.2.1 秀丽隐杆线虫的生物学特性第20页
        1.2.2 秀丽隐杆线虫作为模式生物的优势第20-21页
        1.2.3 秀丽隐杆线虫作为研究病原细菌致病机制的模型第21-22页
        1.2.4 秀丽线虫作为探究单核细胞增生李斯特菌致病机制的模型研究进展第22页
    1.3 果蝇作为模式生物简介第22-24页
        1.3.1 果蝇的生物学特性第22页
        1.3.2 果蝇作为模式生物的优势第22-23页
        1.3.3 果蝇作为研究病原细菌致病机制的模型第23页
        1.3.4 果蝇作为探究单核细胞增生李斯特菌致病机制的模型研究进展第23-24页
    1.4 蜡样芽孢杆菌简介第24-26页
        1.4.1 蜡样芽孢杆菌生物学特性第24页
        1.4.2 蜡样芽孢杆菌的检测方法第24-25页
        1.4.3 蜡样芽孢杆菌的毒素研究进展第25-26页
    1.5 本研究的目的及意义第26-27页
第二章 线虫不适合作为研究单核细胞增生李斯特菌致病机制的模型第27-40页
    2.1 实验材料与设备第27-29页
        2.1.1 线虫、细菌及培养条件第27-28页
        2.1.2 实验试剂及配制第28页
        2.1.3 实验设备第28-29页
    2.2 实验方法第29-33页
        2.2.1 线虫的同步化第29页
        2.2.2 检测不同培养基和抗生素对线虫生存和寿命的影响第29页
        2.2.3 线虫发育周期的测定第29页
        2.2.4 线虫寿命的测定第29-30页
        2.2.5 线虫产卵数的测定第30页
        2.2.6 线虫体表细菌计数方法第30页
        2.2.7 线虫消化道细菌计数方法第30页
        2.2.8 线虫粪便细菌计数第30页
        2.2.9 线虫对食物的趋向性第30-31页
        2.2.10 线虫发育周期中线虫的生长情况第31页
        2.2.11 不同细菌喂饲线虫后的产卵数和孵化第31页
        2.2.12 单核细胞增生李斯特菌在线虫体内传代培养第31-32页
        2.2.13 单核细胞增生李斯特菌SigB基因的检测第32-33页
        2.2.14 数据统计分析第33页
    2.3 实验结果第33-38页
        2.3.1 培养基和抗生素对线虫生存曲线和寿命的影响第33-34页
        2.3.2 单核细胞增生李斯特菌对线虫的致病能力第34页
        2.3.3 单核细胞增生李斯特菌和无害李斯特菌对线虫发育周期、寿命、产卵数和孵化率的影响第34-35页
        2.3.4 线虫虫龄对单核细胞增生李斯特菌致病性的影响第35页
        2.3.5 单核细胞增生李斯特菌喂饲线虫时,线虫体表、消化道和粪便中的细菌数第35-36页
        2.3.6 用不同的细菌喂饲线虫时,线虫达到各个发育阶段所需时间第36页
        2.3.7 线虫对食物的趋向性第36页
        2.3.8 SigB测序结果及蛋白质结构分析第36-38页
    2.4 讨论第38-40页
第三章 果蝇可作为研究单核细胞增生李斯特菌侵染机制的模型第40-52页
    3.1 实验材料与设备第40-42页
        3.1.1 菌株的培养第40页
        3.1.2 果蝇培养及培养基的配制第40-41页
        3.1.3 实验试剂第41页
        3.1.4 实验设备第41-42页
    3.2 实验方法第42-46页
        3.2.1 确定适合培养果蝇以及单核细胞李斯特菌的培养基第42页
        3.2.2 果蝇发育周期的检测第42-43页
        3.2.3 细菌喂饲果蝇的产卵数的检测第43页
        3.2.4 细菌喂饲果蝇的孵化率的检测第43-44页
        3.2.5 细菌喂饲果蝇蛹鲜重、成蝇鲜重测量第44页
        3.2.6 显微注射果蝇第44-45页
        3.2.7 显微注射后果蝇体内的细菌数测量第45页
        3.2.8 统计分析第45-46页
    3.3 实验结果第46-50页
        3.3.1 李斯特菌-果蝇培养基的确定第46页
        3.3.2 喂饲法检测单核细胞增生李斯特菌对果蝇的致病能力第46-47页
        3.3.3 不同的细菌喂饲果蝇蛹鲜重、成蝇鲜重测量第47页
        3.3.4 显微注射法检测单核细胞增生李斯特菌对果蝇的致病能力第47-48页
        3.3.5 显微注射单核细胞增生李斯特菌后果蝇体内细菌增殖状况第48-50页
    3.4 讨论第50-52页
第四章 一株蜡样芽胞杆菌的鉴定及毒性研究第52-62页
    4.1 实验材料和设备第52-53页
        4.1.1 秀丽隐杆线虫、果蝇及菌株第52页
        4.1.2 实验试剂及配制第52-53页
        4.1.3 实验设备第53页
    4.2 实验方法第53-56页
        4.2.1 形态学特征观察第53-54页
        4.2.2 伴孢晶体蛋白鉴定第54页
        4.2.3 16S rDNA序列的分析第54-55页
        4.2.4 细菌特异性毒力基因的鉴定第55-56页
        4.2.5 生化鉴定第56页
        4.2.6 利用秀丽隐杆线虫和果蝇为感染模型研究待检菌的致病性第56页
    4.3 实验结果第56-60页
        4.3.1 待测菌的菌落特征、芽孢和伴孢晶体蛋白第56-57页
        4.3.2 生理生化鉴定结果第57-58页
        4.3.3 16S rDNA测定第58-59页
        4.3.4 蜡样芽胞杆菌特异性毒力基因的检测结果第59页
        4.3.5 利用秀丽隐杆线虫和果蝇为感染模型研究待检菌致病性的结果第59-60页
    4.4 讨论第60-62页
参考文献第62-68页
攻读学位期间发表的学术论文第68-69页
致谢第69页

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