| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 前言 | 第12-22页 |
| 1.1 腺苷简介 | 第12-13页 |
| 1.1.1 腺苷理化性质 | 第12页 |
| 1.1.2 腺苷生理机能 | 第12-13页 |
| 1.1.3 腺苷应用 | 第13页 |
| 1.2 腺苷生产方法 | 第13-18页 |
| 1.2.1 腺苷工业化生产方法及特点 | 第13-14页 |
| 1.2.2 枯草芽孢杆菌产核苷生物合成途径 | 第14-16页 |
| 1.2.3 嘌呤核苷生物合成的代谢调节机制及腺苷育种思路 | 第16-18页 |
| 1.3 腺苷生产菌种选育的国内外发展状况 | 第18-19页 |
| 1.4 菌种诱变方法 | 第19-20页 |
| 1.5 腺苷发酵生产中存在的主要问题 | 第20-21页 |
| 1.6 本研究的立题依据和研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 菌种 | 第22页 |
| 2.1.2 培养基 | 第22页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.4 主要溶液 | 第23-24页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-28页 |
| 2.2.1 营养缺陷型鉴定方法 | 第24-25页 |
| 2.2.2 菌悬液的制备 | 第25页 |
| 2.2.3 N~+离子束注入诱变处理及致死率测定 | 第25页 |
| 2.2.4 硫酸二乙酯诱变处理及致死率测定 | 第25页 |
| 2.2.5 紫外分光光度法测定发酵液中腺苷含量 | 第25-27页 |
| 2.2.6 活菌计数法测定回复突变率 | 第27页 |
| 2.2.7 分光光度法测定B. subtilis细胞悬液浓度 | 第27页 |
| 2.2.8 分光光度法测定红色回复突变菌株细胞悬液OD值 | 第27页 |
| 2.2.9 菌株修复缺陷检测方法 | 第27-28页 |
| 第三章 结果与分析 | 第28-50页 |
| 3.1 出发菌株的纯化及遗传性状的考察 | 第28-30页 |
| 3.1.1 出发菌株的纯化 | 第28-29页 |
| 3.1.2 出发菌株B. subtilis DI3-243的遗传性状分析 | 第29-30页 |
| 3.2 B. subtilis DI3-243菌株发酵条件优化 | 第30-32页 |
| 3.2.1 嘌呤碱基含量对腺苷产量的影响 | 第30页 |
| 3.2.2 葡萄糖浓度对腺苷产量的影响 | 第30-31页 |
| 3.2.3 有机氮源对腺苷产量的影响 | 第31-32页 |
| 3.3 离子束注入和硫酸二乙酯复合诱变育种 | 第32-35页 |
| 3.3.1 诱变剂处理剂量选择 | 第32-34页 |
| 3.3.2 诱变处理后突变株的筛选 | 第34-35页 |
| 3.4 腺苷高产菌株退化现象原因分析 | 第35-38页 |
| 3.4.1 DI4-24菌株退化现象的发现 | 第35-36页 |
| 3.4.2 自然变异菌株的分离及遗传分析 | 第36-37页 |
| 3.4.3 变异菌株DI4-24R、DI4-24W生物学性状和产苷能力 | 第37页 |
| 3.4.4 DI4-24菌株自发突变率测定 | 第37-38页 |
| 3.4.5 DI4-24、DI4-24R和DI4-24W菌株的重组修复检测 | 第38页 |
| 3.5 DI4-24菌株保藏过程影响其回复突变的因素 | 第38-40页 |
| 3.5.1 在菌保藏过程中DI4-24菌株回复突变发生的规律 | 第39页 |
| 3.5.2 保藏温度对DI4-24菌株回复突变发生的影响 | 第39-40页 |
| 3.5.3 传代次数对DI4-24菌株回复突变发生的影响 | 第40页 |
| 3.6 培养过程理化因素对DI4-24菌株回复突变的影响 | 第40-44页 |
| 3.6.1 培养时间对DI4-24菌株回复突变的变化规律 | 第40-41页 |
| 3.6.2 培养温度对DI4-24菌株回复突变的影响 | 第41-42页 |
| 3.6.3 种子培养液不同pH值对DI4-24菌株回复突变的影响 | 第42页 |
| 3.6.4 添加不同化合物对DI4-24菌株回复突变的影响 | 第42-43页 |
| 3.6.5 优化种子培养条件对发酵产苷的影响 | 第43-44页 |
| 3.7 诱变处理选育高稳定性菌株 | 第44-50页 |
| 3.7.1 离子束注入诱变处理 | 第44-45页 |
| 3.7.2 对诱变处理材料的初筛 | 第45-46页 |
| 3.7.3 复筛 | 第46-47页 |
| 3.7.4 DI4-24R-37菌株 500L发酵罐发酵产腺苷试验 | 第47-50页 |
| 第四章 结论 | 第50-52页 |
| 4.1 N~+离子束注入-DES复合诱变获得高产菌株DI4-24 | 第50页 |
| 4.2 对DI3-243菌株发酵培养基的优化 | 第50页 |
| 4.3 DI4-24菌株不稳定性原因—自发突变 | 第50页 |
| 4.4 菌种保藏条件对菌种退化有较大的影响 | 第50页 |
| 4.5 优化菌种培养条件可以显著降低回复突变的发生 | 第50-51页 |
| 4.6 高稳定性产苷菌株DI4-24R-37的选育 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-60页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第60-61页 |
