| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第10-20页 |
| 1 AGR2抗体 | 第10-13页 |
| 1.1 单克隆抗体 | 第10页 |
| 1.2 AGR2 | 第10-12页 |
| 1.3 AGR2单克隆抗体 | 第12-13页 |
| 2 大规模瞬时基因表达 | 第13-14页 |
| 2.1 瞬时基因表达 | 第13页 |
| 2.2 大规模瞬时基因表达 | 第13-14页 |
| 3 单克隆抗体的早期成药性评价 | 第14-18页 |
| 3.1 单克隆抗体的药效学研究 | 第14-16页 |
| 3.2 单克隆抗体的安全性评价 | 第16-17页 |
| 3.3 单克隆抗体的药代动力学评价 | 第17-18页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 5 技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 rhAGR2-mAb的瞬时表达及理化性质 | 第20-44页 |
| 1 实验材料 | 第20-26页 |
| 1.1 主要仪器 | 第20-21页 |
| 1.2 实验耗材 | 第21-22页 |
| 1.3 质粒、菌种与细胞株 | 第22页 |
| 1.4 主要试剂及试剂盒 | 第22页 |
| 1.5 常用试剂及配制 | 第22-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-33页 |
| 2.1 细菌培养与质粒大量抽提 | 第26-27页 |
| 2.2 细胞密度与活率 | 第27页 |
| 2.3 瞬时转染 | 第27页 |
| 2.4 HEK293F细胞瞬时表达rhAGR2-mAb的正交实验设计 | 第27-28页 |
| 2.5 rhAGR2-mAb浓度测定 | 第28-29页 |
| 2.6 rhAGR2-mAb细胞培养液Protein A一步纯化 | 第29页 |
| 2.7 rhAGR2-mAb的SEC-HPLC纯度测定 | 第29页 |
| 2.8 rhAGR2-mAb对MCF-7 细胞的增殖抑制 | 第29-30页 |
| 2.9 rhAGR2-mAb的SDS-PAGE分子量测定 | 第30页 |
| 2.10 rhAGR2-mAb的等电点测定 | 第30-31页 |
| 2.11 rhAGR2-mAb的亲和力比较 | 第31-32页 |
| 2.12 rhAGR2-mAb的糖基化测定 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-41页 |
| 3.1 质粒的抽提与鉴定 | 第33页 |
| 3.2 HEK293F细胞瞬时表达rhAGR2-mAb的优化 | 第33-34页 |
| 3.3 瞬时转染的规模放大 | 第34-35页 |
| 3.4 rhAGR2-mAb细胞培养液Protein A一步纯化 | 第35-37页 |
| 3.5 rhAGR2-mAb对MCF-7 细胞的增殖抑制作用 | 第37页 |
| 3.6 不同宿主细胞表达rhAGR2-mAb理化性质的比较 | 第37-41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| 第三章 rhAGR2-mAb的部分临床前研究 | 第44-63页 |
| 1 实验材料 | 第44-46页 |
| 1.1 主要仪器 | 第44页 |
| 1.2 实验耗材 | 第44-45页 |
| 1.3 主要试剂 | 第45页 |
| 1.4 常用试剂及配制 | 第45页 |
| 1.5 实验动物 | 第45-46页 |
| 2 实验方法 | 第46-50页 |
| 2.1 测定大鼠血清中rhAGR2-mAb的ELISA方法学建立及确证 | 第46-48页 |
| 2.2 大鼠腹腔单次注射rhAGR2-mAb药代动力学实验 | 第48-49页 |
| 2.3 急性毒性试验 | 第49-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-61页 |
| 3.1 rhAGR2-mAb的ELISA方法学确证 | 第50-54页 |
| 3.2 rhAGR2-mAb药代动力学实验结果 | 第54-58页 |
| 3.3 rhAGR2-mAb急性毒性试验结果 | 第58-61页 |
| 4 讨论 | 第61-63页 |
| 第四章 结论与展望 | 第63-65页 |
| 1 结论 | 第63-64页 |
| 2 展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 在学期间发表论文清单 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
