| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第13-28页 |
| 1.1 杆状病毒简述 | 第13-17页 |
| 1.1.1 杆状病毒分类 | 第13页 |
| 1.1.2 杆状病毒生活周期 | 第13-15页 |
| 1.1.3 杆状病毒用途 | 第15-17页 |
| 1.2 杆状病毒多角体基因及多角体粒子 | 第17-21页 |
| 1.2.1 杆状病毒多角体基因 | 第17-18页 |
| 1.2.2 杆状病毒多角体粒子 | 第18-20页 |
| 1.2.3 杆状病毒多角体粒子应用 | 第20-21页 |
| 1.3 家蚕核型多角体病毒Bm NPV及Bm134 | 第21-22页 |
| 1.3.1 家蚕核型多角体病毒 | 第21页 |
| 1.3.2 Bm134基因 | 第21-22页 |
| 1.4 自噬受体蛋白 | 第22-24页 |
| 1.5 课题研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 1.6 主要研究内容和技术路线 | 第25-28页 |
| 1.6.1 研究内容 | 第25-27页 |
| 1.6.2 技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 Bm NPV多角体粒子基质的蛋白质组质谱分析 | 第28-53页 |
| 2.1 材料试剂 | 第28-30页 |
| 2.1.1 家蚕品系和病毒 | 第28页 |
| 2.1.2 试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.3 试剂的配制 | 第29-30页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-34页 |
| 2.2.1 家蚕饲养及Bm NPV多角体粒子粗提 | 第30-31页 |
| 2.2.2 Bm NPV多角体的纯化及其基质蛋白的获取 | 第31页 |
| 2.2.3 Bm NPV多角体基质蛋白的SDS-PAGE分析 | 第31-32页 |
| 2.2.4 割胶及标记 | 第32页 |
| 2.2.5 蛋白质的胶内酶解 | 第32-33页 |
| 2.2.6 肽段提取 | 第33页 |
| 2.2.7 电喷雾液相串联质谱（LC-ESI-MS/MS）分析 | 第33页 |
| 2.2.8 Western blot分析 | 第33-34页 |
| 2.3 结果与分析 | 第34-51页 |
| 2.3.1 多角体基质蛋白的SDS-PAGE分析 | 第34-35页 |
| 2.3.2 多角体基质中病毒蛋白分析 | 第35-44页 |
| 2.3.3 多角体基质中宿主蛋白分析 | 第44-47页 |
| 2.3.4 多角体基质蛋白的泛素化修饰分析 | 第47-49页 |
| 2.3.5 多角体基质蛋白中HSC/HSP70的Western blot检测 | 第49-51页 |
| 2.4 讨论与总结 | 第51-53页 |
| 第三章 Bm NPV多角体蛋白被泛素化修饰及参与细胞自噬 | 第53-64页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第53-55页 |
| 3.1.1 细胞系，病毒和载体 | 第53页 |
| 3.1.2 试剂和抗体 | 第53-54页 |
| 3.1.3 试剂的配制 | 第54-55页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第55页 |
| 3.2 实验方法 | 第55-56页 |
| 3.2.1 Western blot分析 | 第55页 |
| 3.2.2 亚细胞共定位分析 | 第55页 |
| 3.2.3 抗多角体蛋白鼠源单克隆抗体与附着于琼脂糖树脂上的蛋白A/G交联 | 第55页 |
| 3.2.4 多角体蛋白与泛素蛋白的互作分析 | 第55-56页 |
| 3.2.5 多角体蛋白与Bm LC3的互作分析 | 第56页 |
| 3.3 结果与分析 | 第56-63页 |
| 3.3.1 多角体基质中多角体蛋白的检测分析 | 第56-57页 |
| 3.3.2 多角体蛋白被泛素化修饰 | 第57-59页 |
| 3.3.3 多角体蛋白参与细胞自噬 | 第59-63页 |
| 3.4 讨论与总结 | 第63-64页 |
| 第四章 Bm134基因敲除及Bm134蛋白参与细胞自噬 | 第64-86页 |
| 4.1 材料试剂 | 第64-66页 |
| 4.1.1 细胞系，病毒，质粒和菌株 | 第64页 |
| 4.1.2 试剂与抗体 | 第64-65页 |
| 4.1.3 试剂的配制 | 第65-66页 |
| 4.1.4 实验仪器 | 第66页 |
| 4.2 实验方法 | 第66-75页 |
| 4.2.1 目的片段Bm134克隆T载体 | 第67-69页 |
| 4.2.2 Bm134基因的敲除 | 第69-71页 |
| 4.2.3 重组质粒、杆粒及病毒的获取 | 第71-75页 |
| 4.2.4 Bm134与多角体蛋白互作分析 | 第75页 |
| 4.2.5 激光共聚焦实验 | 第75页 |
| 4.3 结果与分析 | 第75-84页 |
| 4.3.1 Bm134基因缺失型、拯救型、野生型Bm Bacmid及相关载体的构建 | 第75-78页 |
| 4.3.2 Bm134蛋白功能的初步分析 | 第78页 |
| 4.3.3 Bm134蛋白的Westerm blot分析 | 第78-79页 |
| 4.3.4 Bm134与泛素蛋白、Bm LC3共定位分析 | 第79-82页 |
| 4.3.5 Bm134蛋白与多角体蛋白没有相互作用 | 第82-83页 |
| 4.3.6 Bm134蛋白与泛素蛋白、p62蛋白共定位分析 | 第83-84页 |
| 4.4 讨论与总结 | 第84-86页 |
| 第五章 Bm134用于多角体微晶制备的初步研究 | 第86-93页 |
| 5.1 材料试剂 | 第86-87页 |
| 5.1.1 细胞系，病毒，质粒和菌株 | 第86页 |
| 5.1.2 试剂 | 第86页 |
| 5.1.3 试剂的配制 | 第86页 |
| 5.1.4 实验仪器 | 第86-87页 |
| 5.2 实验方法 | 第87-90页 |
| 5.2.1 目的片段Bmpoly(1-63)克隆T载体 | 第87-88页 |
| 5.2.2 多角体基因的定点突变 | 第88页 |
| 5.2.3 重组转移载体的构建 | 第88-89页 |
| 5.2.4 重组杆粒的构建与转染，复感Bm N细胞 | 第89页 |
| 5.2.5 重组病毒共感染Bm N细胞 | 第89-90页 |
| 5.2.6 重组多角体获得 | 第90页 |
| 5.3 结果与分析 | 第90-92页 |
| 5.3.1 Bm NPV重组多角体的荧光分析 | 第90-92页 |
| 5.4 讨论与总结 | 第92-93页 |
| 第六章 结论与展望 | 第93-96页 |
| 6.1 结论 | 第93-95页 |
| 6.2 展望 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 参与的项目 | 第104页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第104页 |
