英文缩写一览表 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第1章 综述 | 第11-19页 |
1.1 PPE家族蛋白基本特征 | 第11-12页 |
1.2 PPE家族蛋白的亚细胞定位 | 第12-13页 |
1.3 PPE家族蛋白的分泌机制 | 第13-14页 |
1.4 PPE家族蛋白的表达和调控 | 第14-15页 |
1.5 PPE家族蛋白的生物学功能 | 第15-17页 |
1.5.1 PPE蛋白促进分枝杆菌生长 | 第15页 |
1.5.2 PPE蛋白作为毒力因子 | 第15-17页 |
1.5.3 PPE蛋白作为疫苗靶标和分子诊断标记 | 第17页 |
1.6 PPE家族蛋白和PPE25 | 第17-19页 |
第2章 前言 | 第19-21页 |
第3章 实验材料和方法 | 第21-37页 |
3.1 实验材料 | 第21-24页 |
3.1.1 实验菌株、质粒和细胞 | 第21页 |
3.1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
3.1.3 培养基和主要实验试剂的配制 | 第22-23页 |
3.1.4 主要实验仪器 | 第23-24页 |
3.2 实验方法 | 第24-37页 |
3.2.1 结核分枝杆菌Rv1787(PPE25)基因PCR引物设计与合成 | 第24页 |
3.2.2 结核分枝杆菌Rv1787(PPE25)基因的扩增 | 第24-25页 |
3.2.3 Rv1787基因PCR扩增产物的纯化回收 | 第25页 |
3.2.4 Rv1787基因的TA克隆 | 第25页 |
3.2.5 大肠杆菌感受态细胞(DH5α,BL21)制备 | 第25-26页 |
3.2.6 大肠杆菌转化(热击法) | 第26页 |
3.2.7 重组质粒T-Rv1787的提取 | 第26页 |
3.2.8 重组质粒pNIT-Rv1787和pET28a-Rv1787的构建 | 第26-27页 |
3.2.9 重组质粒(pNIT-Rv1787,pET28a-Rv1787)的提取 | 第27-28页 |
3.2.10 重组耻垢分枝杆菌(Ms_Rv1787,Ms_pNIT)的构建和鉴定 | 第28-29页 |
3.2.11 Rv1787(PPE25)重组蛋白在耻垢分枝杆菌中的亚细胞定位分析 | 第29-30页 |
3.2.12 重组耻垢分枝杆菌菌落形态观察 | 第30页 |
3.2.13 扫描电镜观察重组耻垢分枝杆菌菌体形态 | 第30页 |
3.2.14 重组耻垢分枝杆菌滑动能力观察 | 第30-31页 |
3.2.15 重组耻垢分枝杆菌生物膜形成观察 | 第31页 |
3.2.16 重组耻垢分枝杆菌对氧化压力的耐受性检测 | 第31页 |
3.2.17 重组耻垢分枝杆菌在酸性条件下的耐受性检测 | 第31-32页 |
3.2.18 重组耻垢分枝杆菌对表面活性压力SDS的耐受性检测 | 第32页 |
3.2.19 重组耻垢分枝杆菌侵染巨噬细胞后的胞内存活率及细胞因子的检测 | 第32-34页 |
3.2.20 重组耻垢分枝杆菌释放乳酸脱氢酶LDH和细胞凋亡的检测 | 第34-35页 |
3.2.21 数据统计与分析 | 第35-37页 |
第4章 结果与分析 | 第37-49页 |
4.1 Rv1787基因的PCR扩增与鉴定 | 第37页 |
4.2 重组耻垢分枝杆菌Ms_ Rv1787的构建 | 第37-38页 |
4.3 重组蛋白pNIT-Rv1787在耻垢分枝杆菌中成功表达 | 第38-39页 |
4.4 Rv1787蛋白定位在耻垢分枝杆菌细胞表面 | 第39页 |
4.5 过表达Rv1787对重组耻垢分枝杆菌生长的影响 | 第39-40页 |
4.6 过表达Rv1787对重组耻垢分枝杆菌菌体形态的影响 | 第40-41页 |
4.7 过表达Rv1787对重组耻垢分枝杆菌菌落形态和生物膜形成的影响 | 第41页 |
4.8 过表达Rv1787对重组耻垢分枝杆菌滑动能力的影响 | 第41-42页 |
4.9 过表达Rv1787减弱耻垢分枝杆菌在低pH条件下的存活能力 | 第42-43页 |
4.10 过表达Rv1787减弱耻垢分枝杆菌在SDS条件下的存活能力 | 第43页 |
4.11 过表达Rv1787增强耻垢分枝杆菌对H2O2诱导氧化压力的耐受 | 第43-44页 |
4.12 过表达Rv1787增强耻垢分枝杆菌对联胺诱导氧化压力的耐受 | 第44页 |
4.13 过表达Rv1787增强耻垢分枝杆菌在巨噬细胞内的存活 | 第44-45页 |
4.14 表达Rv1787蛋白的耻垢分枝杆菌抑制促炎症细胞因子的表达 | 第45-46页 |
4.15 表达Rv1787蛋白的耻垢分枝杆菌上调SOCS3的表达 | 第46-47页 |
4.16 表达Rv1787蛋白的耻垢分枝杆菌促进巨噬细胞死亡 | 第47-49页 |
第5章 结论与展望 | 第49-53页 |
5.1 实验结论与分析 | 第49-51页 |
5.2 展望 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
致谢 | 第61-63页 |
在学期间所发表的文章 | 第63页 |