| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1.1 迟钝爱德华氏菌 | 第10页 |
| 1.2 E.tarda的检测 | 第10-12页 |
| 1.3 胶体金免疫层析技术 | 第12-17页 |
| 1.3.1 胶体金制备方法与原理 | 第12-14页 |
| 1.3.2 胶体金与抗体结合原理 | 第14页 |
| 1.3.3 胶体金免疫层析检测技术及其原理 | 第14-15页 |
| 1.3.4 胶体金免疫层析技术的发展 | 第15-17页 |
| 1.4 本课题的主要内容和意义 | 第17-19页 |
| 第2章 迟钝爱德华氏菌多克隆抗体及检测试纸条的制备 | 第19-32页 |
| 2.1 引言 | 第19页 |
| 2.2 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.2.1 供试菌、培养基及实验动物 | 第19页 |
| 2.2.2 主要试剂、材料与溶液 | 第19-20页 |
| 2.3 实验方法 | 第20-24页 |
| 2.3.1 E.tarda多克隆抗体的制备 | 第20-21页 |
| 2.3.2 胶体金溶液的制备 | 第21-22页 |
| 2.3.3 金标抗体的制备 | 第22-24页 |
| 2.3.4 腹水检测 | 第24页 |
| 2.4 结果分析 | 第24-31页 |
| 2.4.1 多克隆抗体的制备 | 第24-25页 |
| 2.4.2 胶体金溶液的制备 | 第25页 |
| 2.4.3 检测试纸条的制备及性能测定 | 第25-31页 |
| 2.5 讨论 | 第31页 |
| 2.6 本章小结 | 第31-32页 |
| 第3章 迟钝爱德华氏菌单克隆抗体的制备 | 第32-43页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 实验材料 | 第32-34页 |
| 3.2.1 细胞、细菌及实验动物 | 第32页 |
| 3.2.2 试剂、培养基和溶液 | 第32-34页 |
| 3.3 实验方法 | 第34-38页 |
| 3.3.1 甲醛灭活菌液的制备 | 第34页 |
| 3.3.2 E.tarda外膜蛋白的提取 | 第34页 |
| 3.3.3 小鼠免疫 | 第34-36页 |
| 3.3.4 饲养细胞的制备 | 第36页 |
| 3.3.5 细胞融合 | 第36-37页 |
| 3.3.6 筛选 | 第37页 |
| 3.3.7 克隆与亚克隆 | 第37-38页 |
| 3.3.8 杂交瘤细胞的冻存 | 第38页 |
| 3.3.9 腹水制备 | 第38页 |
| 3.3.10 抗体纯化 | 第38页 |
| 3.4 实验结果 | 第38-40页 |
| 3.4.1 甲醛灭活菌液免疫小鼠 | 第38-39页 |
| 3.4.2 E.tarda外膜蛋白的提取 | 第39页 |
| 3.4.3 外膜蛋白免疫小鼠 | 第39-40页 |
| 3.4.4 细胞融合与筛选 | 第40页 |
| 3.4.5 抗体纯化 | 第40页 |
| 3.5 讨论 | 第40-42页 |
| 3.6 本章小结 | 第42-43页 |
| 第4章 以单克隆抗体制备迟钝爱德华氏菌检测试纸条 | 第43-49页 |
| 4.1 引言 | 第43页 |
| 4.2 供试菌 | 第43页 |
| 4.3 实验方法 | 第43-45页 |
| 4.3.1 胶体金溶液的制备 | 第43页 |
| 4.3.2 抗体配对实验 | 第43页 |
| 4.3.3 单克隆抗体胶体金试纸条的制备 | 第43页 |
| 4.3.4 试纸条灵敏性检测 | 第43-44页 |
| 4.3.5 试纸条特异性检测 | 第44-45页 |
| 4.3.6 试纸条对E.tarda的阳性检测率测试 | 第45页 |
| 4.3.7 模拟样品检测 | 第45页 |
| 4.4 实验结果 | 第45-47页 |
| 4.4.1 抗体配对实验 | 第45页 |
| 4.4.2 试纸条的特异性 | 第45-46页 |
| 4.4.3 试纸条的灵敏性 | 第46-47页 |
| 4.4.4 试纸条检测E.tarda的阳性检出率 | 第47页 |
| 4.4.5 模拟样品检测 | 第47页 |
| 4.5 讨论 | 第47-48页 |
| 4.6 本章小结 | 第48-49页 |
| 第5章 迟钝爱德华氏菌胶体金免疫层析试纸条与其他检測方法的比较 | 第49-54页 |
| 5.1 引言 | 第49页 |
| 5.2 实验材料 | 第49页 |
| 5.3 实验方法 | 第49-50页 |
| 5.3.1 斑点杂交 | 第49页 |
| 5.3.2 LAMP | 第49-50页 |
| 5.4 实验结果 | 第50-51页 |
| 5.4.1 斑点杂交 | 第50-51页 |
| 5.4.2 环介导等温扩增技术 | 第51页 |
| 5.5 讨论 | 第51-53页 |
| 5.6 本章小结 | 第53-54页 |
| 第6章 结论、创新点与展望 | 第54-56页 |
| 6.1 结论 | 第54-55页 |
| 6.2 创新点 | 第55页 |
| 6.3 展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文和专利 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
