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TRP通道药物筛选与通道特性研究

致谢第4-5页
摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第1章 引言第13-31页
    1.1 TRPC通道第13-19页
        1.1.1 TRPC通道的起源和分类第14-15页
        1.1.2 TRPC通道的生理特性及调节机制第15-19页
        1.1.3 TRPC通道在组织中的表达以及相关疾病第19页
        1.1.4 已知的一些TRPC通道小分子调节剂第19页
    1.2 TRPV1通道简介第19-27页
        1.2.1 TRPV1通道的离子通透性第20页
        1.2.2 TRPV1通道的结构第20-21页
        1.2.3 TRPV1通道的电压依赖性第21-23页
        1.2.4 TRPV1通道的门控机制假说第23-24页
        1.2.5 TRPV1通道的脱敏第24页
        1.2.6 质子和阳离子对TRPV1通道的影响第24-25页
        1.2.7 TRPV1通道活性的调节第25页
        1.2.8 TRPV1通道的激动剂第25-26页
        1.2.9 TRPV1通道的拮抗剂第26-27页
    1.3 TRPV4通道和钙敏感受体第27-31页
        1.3.1 钙敏感受体简介第27-28页
        1.3.2 钙敏感受体的结构第28页
        1.3.3 钙敏感受体的磷酸化调节第28-29页
        1.3.4 与钙敏感受体相互作用的蛋白第29页
        1.3.5 与钙敏感受体相关的疾病第29-30页
        1.3.6 TRPV4离子通道简介第30-31页
第2章 TRPC通道小分子调节剂的筛选第31-38页
    2.1 实验材料第31-32页
        2.1.1 细胞第31页
        2.1.2 药品和试剂第31页
        2.1.3 缓冲液配制第31-32页
    2.2 实验方法第32-34页
        2.2.1 细胞培养与传代第32-33页
        2.2.2 全细胞电生理实验第33-34页
    2.3 先导化合物CID 5308428 (4o)对TRPC6通道的激动作用第34页
    2.4 先导化合物CID 5308428 (4o)对TRPC3通道的激动作用第34-36页
    2.5 先导化合物CID 5308428 (4o)对TRPC7通道的激动作用第36页
    2.6 小结第36-38页
第3章 TRPV1通道pore helix区带电荷氨基酸的电生理特性第38-64页
    3.1 实验材料第38-39页
        3.1.1 质粒和细胞第38页
        3.1.2 药品和试剂第38页
        3.1.3 缓冲液配制第38-39页
    3.2 实验方法第39-44页
        3.2.1 PCR及点突变第39-42页
        3.2.2 提取质粒及转染第42页
        3.2.3 细胞传代第42页
        3.2.4 全细胞电生理实验第42页
        3.2.5 免疫印迹实验第42-44页
    3.3 大鼠TRPV1孔道(pore)区氨基酸参与酸调节第44-58页
        3.3.1 删除掉pore区前的一段氨基酸第45页
        3.3.2 将pore区带电荷氨基酸突变为丙氨酸第45-49页
        3.3.3 以C634A为模板分别将pore helix区其他带电氨基酸突变为丙氨酸第49-51页
        3.3.4 探究C634A/K639C和C634A/K639E,C634A/E636K的酸敏感性和电流整流特征第51-58页
    3.4 大鼠TRPV1 pore helix区带电荷氨基酸残基参与通道的电压门控第58-61页
    3.5 野生型与突变体TRPV1在CHO细胞中的蛋白表达情况第61-62页
    3.6 小结第62-64页
第4章 TRPV4在胃癌细胞钙敏感受体(CaSR)诱导的钙内流过程中发挥主要的作用第64-71页
    4.1 实验材料第64页
        4.1.1 细胞第64页
        4.1.2 药品和试剂第64页
        4.1.3 缓冲液配制第64页
    4.2 实验方法第64-65页
    4.3 MKN45胃癌细胞上TRPV4通道的电流第65-66页
    4.4 MKN45胃癌细胞与GES正常胃细胞TRPV4通道功能比较第66-68页
    4.5 MKN45胃癌细胞中细胞外钙离子引发的电流第68-69页
    4.6 GES正常胃细胞中细胞外钙离子引发的电流第69-70页
    4.7 小结第70-71页
第5章 结论与讨论第71-75页
    5.1 结论第71-72页
    5.2 讨论第72-75页
参考文献第75-88页
附录第88-90页
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果第90页

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