致谢 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 引言 | 第13-31页 |
1.1 TRPC通道 | 第13-19页 |
1.1.1 TRPC通道的起源和分类 | 第14-15页 |
1.1.2 TRPC通道的生理特性及调节机制 | 第15-19页 |
1.1.3 TRPC通道在组织中的表达以及相关疾病 | 第19页 |
1.1.4 已知的一些TRPC通道小分子调节剂 | 第19页 |
1.2 TRPV1通道简介 | 第19-27页 |
1.2.1 TRPV1通道的离子通透性 | 第20页 |
1.2.2 TRPV1通道的结构 | 第20-21页 |
1.2.3 TRPV1通道的电压依赖性 | 第21-23页 |
1.2.4 TRPV1通道的门控机制假说 | 第23-24页 |
1.2.5 TRPV1通道的脱敏 | 第24页 |
1.2.6 质子和阳离子对TRPV1通道的影响 | 第24-25页 |
1.2.7 TRPV1通道活性的调节 | 第25页 |
1.2.8 TRPV1通道的激动剂 | 第25-26页 |
1.2.9 TRPV1通道的拮抗剂 | 第26-27页 |
1.3 TRPV4通道和钙敏感受体 | 第27-31页 |
1.3.1 钙敏感受体简介 | 第27-28页 |
1.3.2 钙敏感受体的结构 | 第28页 |
1.3.3 钙敏感受体的磷酸化调节 | 第28-29页 |
1.3.4 与钙敏感受体相互作用的蛋白 | 第29页 |
1.3.5 与钙敏感受体相关的疾病 | 第29-30页 |
1.3.6 TRPV4离子通道简介 | 第30-31页 |
第2章 TRPC通道小分子调节剂的筛选 | 第31-38页 |
2.1 实验材料 | 第31-32页 |
2.1.1 细胞 | 第31页 |
2.1.2 药品和试剂 | 第31页 |
2.1.3 缓冲液配制 | 第31-32页 |
2.2 实验方法 | 第32-34页 |
2.2.1 细胞培养与传代 | 第32-33页 |
2.2.2 全细胞电生理实验 | 第33-34页 |
2.3 先导化合物CID 5308428 (4o)对TRPC6通道的激动作用 | 第34页 |
2.4 先导化合物CID 5308428 (4o)对TRPC3通道的激动作用 | 第34-36页 |
2.5 先导化合物CID 5308428 (4o)对TRPC7通道的激动作用 | 第36页 |
2.6 小结 | 第36-38页 |
第3章 TRPV1通道pore helix区带电荷氨基酸的电生理特性 | 第38-64页 |
3.1 实验材料 | 第38-39页 |
3.1.1 质粒和细胞 | 第38页 |
3.1.2 药品和试剂 | 第38页 |
3.1.3 缓冲液配制 | 第38-39页 |
3.2 实验方法 | 第39-44页 |
3.2.1 PCR及点突变 | 第39-42页 |
3.2.2 提取质粒及转染 | 第42页 |
3.2.3 细胞传代 | 第42页 |
3.2.4 全细胞电生理实验 | 第42页 |
3.2.5 免疫印迹实验 | 第42-44页 |
3.3 大鼠TRPV1孔道(pore)区氨基酸参与酸调节 | 第44-58页 |
3.3.1 删除掉pore区前的一段氨基酸 | 第45页 |
3.3.2 将pore区带电荷氨基酸突变为丙氨酸 | 第45-49页 |
3.3.3 以C634A为模板分别将pore helix区其他带电氨基酸突变为丙氨酸 | 第49-51页 |
3.3.4 探究C634A/K639C和C634A/K639E,C634A/E636K的酸敏感性和电流整流特征 | 第51-58页 |
3.4 大鼠TRPV1 pore helix区带电荷氨基酸残基参与通道的电压门控 | 第58-61页 |
3.5 野生型与突变体TRPV1在CHO细胞中的蛋白表达情况 | 第61-62页 |
3.6 小结 | 第62-64页 |
第4章 TRPV4在胃癌细胞钙敏感受体(CaSR)诱导的钙内流过程中发挥主要的作用 | 第64-71页 |
4.1 实验材料 | 第64页 |
4.1.1 细胞 | 第64页 |
4.1.2 药品和试剂 | 第64页 |
4.1.3 缓冲液配制 | 第64页 |
4.2 实验方法 | 第64-65页 |
4.3 MKN45胃癌细胞上TRPV4通道的电流 | 第65-66页 |
4.4 MKN45胃癌细胞与GES正常胃细胞TRPV4通道功能比较 | 第66-68页 |
4.5 MKN45胃癌细胞中细胞外钙离子引发的电流 | 第68-69页 |
4.6 GES正常胃细胞中细胞外钙离子引发的电流 | 第69-70页 |
4.7 小结 | 第70-71页 |
第5章 结论与讨论 | 第71-75页 |
5.1 结论 | 第71-72页 |
5.2 讨论 | 第72-75页 |
参考文献 | 第75-88页 |
附录 | 第88-90页 |
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第90页 |