| 符号说明 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第14-30页 |
| 1.1 维生素C在生物体内的生理功能 | 第14-18页 |
| 1.2 抗坏血酸的生物合成途径 | 第18-22页 |
| 1.2.1 植物合成抗坏血酸的途径 | 第18-19页 |
| 1.2.2 动物合成抗坏血酸的途径 | 第19-20页 |
| 1.2.3 微生物合成抗坏血酸的途径 | 第20-22页 |
| 1.3 抗坏血酸合成代谢相关酶基因的研究概况 | 第22-26页 |
| 1.3.1 抗坏血酸从头合成途径中催化的最后一步反应的酶 | 第23-25页 |
| 1.3.1.1 L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶（GLDH） | 第23-24页 |
| 1.3.1.2 L-古洛糖酸-1,4-内酯氧化酶（GULO） | 第24页 |
| 1.3.1.3 D-阿拉伯糖酸-1,4-内酯氧化酶（ALO） | 第24页 |
| 1.3.1.4 L-半乳糖酸-1,4-内酯氧化酶（GALO） | 第24-25页 |
| 1.3.1.5 L-古洛糖酸-1,4-内酯脱氢酶（GULDH） | 第25页 |
| 1.3.2 抗坏血酸从头合成途径催化倒数第二步反应的酶 | 第25-26页 |
| 1.4 生物维持体内抗坏血酸含量的其他代谢酶 | 第26-27页 |
| 1.4.1 抗坏血酸再生途径的还原酶 | 第26-27页 |
| 1.4.1.1 单脱氢抗坏血酸还原酶（MDHAR） | 第26-27页 |
| 1.4.1.2 脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR） | 第27页 |
| 1.4.2 抗坏血酸再生途径的氧化酶 | 第27页 |
| 1.4.2.1 抗坏血酸氧化酶（AAO） | 第27页 |
| 1.4.2.2 抗坏血酸过氧化酶（APX） | 第27页 |
| 1.5 家蚕抗坏血酸合成关键酶的同源基因研究概况 | 第27-28页 |
| 1.6 无脊椎动物和家蚕对维生素C的营养需求及本研究的目的与意义 | 第28-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-41页 |
| 2.1 试验材料 | 第30-33页 |
| 2.1.1 供试蚕品种（品系） | 第30页 |
| 2.1.2 主要试剂、缓冲液及其配制 | 第30-32页 |
| 2.1.2.1 主要试剂 | 第30页 |
| 2.1.2.2 常用试剂及缓冲液的配制 | 第30-32页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第32-33页 |
| 2.2 试验方法 | 第33-40页 |
| 2.2.1 抗坏血酸含量测定的样品的处理与取样 | 第33-34页 |
| 2.2.1.1 蚕卵取样 | 第33页 |
| 2.2.1.2 正常桑叶育幼虫取样 | 第33页 |
| 2.2.1.3 饥饿幼虫取样 | 第33页 |
| 2.2.1.4 不同人工饲料饲养的幼虫取样 | 第33-34页 |
| 2.2.1.5 蚕蛹取样 | 第34页 |
| 2.2.1.6 成虫取样 | 第34页 |
| 2.2.2 AsA和TAA含量的测定方法 | 第34-35页 |
| 2.2.3 家蚕中AsA合成酶基因的同源性检索和进化分析 | 第35-36页 |
| 2.2.3.1 分析所用生物信息学数据库 | 第35页 |
| 2.2.3.2 本研究所用软件 | 第35页 |
| 2.2.3.3 AsA合成相关酶的同源基因序列的获得 | 第35-36页 |
| 2.2.3.4 家蚕中AsA合成关键酶基因的同源性检索 | 第36页 |
| 2.2.3.5 序列的多重比对 | 第36页 |
| 2.2.3.6 系统发生树的构建 | 第36页 |
| 2.2.4 荧光定量PCR检测家蚕AsA合成关键酶同源基因的表达 | 第36-40页 |
| 2.2.4.1 家蚕组织总RNA提取及cDNA第一链合成 | 第36-38页 |
| 2.2.4.2 RT-qPCR | 第38-40页 |
| 2.3 试验数据统计分析 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-58页 |
| 3.1 人工饲料育条件下VC的家蚕生长发育的影响 | 第41页 |
| 3.2 家蚕不同发育阶段及不同处理体内的AsA和TAA含量的变化 | 第41-49页 |
| 3.2.1 抗坏血酸标准曲线的建立 | 第41-43页 |
| 3.2.2 不同处理的不同发育阶段蚕卵内AsA和TAA含量的变化 | 第43-45页 |
| 3.2.2.1 不同处理的蚕卵中AsA含量随发育的变化 | 第43页 |
| 3.2.2.2 不同处理蚕卵中TAA含量随发育的变化 | 第43-45页 |
| 3.2.3 不同处理家蚕幼虫体内AsA和TAA的含量变化 | 第45-48页 |
| 3.2.3.1 正常桑叶饲养的家蚕幼虫体内AsA和TAA的含量变化 | 第45页 |
| 3.2.3.2 4 龄起蚕饥饿处理对蚕体内AsA和TAA含量的影响 | 第45-46页 |
| 3.2.3.3 不同人工饲料饲养的家蚕幼虫体内的AsA和TAA含量的变化 | 第46-48页 |
| 3.2.4 不同发育阶段家蚕蛹体内AsA和TAA含量的变化 | 第48-49页 |
| 3.2.5 不同发育阶段家蚕成虫体内AsA和TAA含量的变化 | 第49页 |
| 3.3 抗坏血酸合成关键酶基因的进化分析 | 第49-52页 |
| 3.3.1 抗坏血酸合成最后一步反应的酶（GULO）基因的进化分析 | 第49-51页 |
| 3.3.2 抗坏血酸合成倒数第二步反应的酶（ALase）基因的进化分析 | 第51-52页 |
| 3.4 家蚕不同发育阶段AsA合成代谢关键酶同源基因的表达变化 | 第52-58页 |
| 3.4.1 总RNA和cDNA的完整性检测结果 | 第52-53页 |
| 3.4.2 定量引物的最适退火温度及其特异性检测 | 第53-54页 |
| 3.4.3 定量引物的标准曲线的制作 | 第54-56页 |
| 3.4.4 家蚕不同发育阶段AsA合成代谢关键酶同源基因的表达变化 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-61页 |
| 4.1 关于家蚕不同发育阶段体内抗坏血酸的含量变化及其来源 | 第58-59页 |
| 4.2 关于家蚕基因组中AsA合成关键酶的同源基因 | 第59-60页 |
| 4.3 家蚕AsA合成关键酶同源基因的表达特征 | 第60-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 读硕士期间发表论文情况 | 第71页 |
