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猪SERPINA1和MRC1基因的表达调控及其与抗PCV2感染的关系

中文摘要第8-10页
Abstract第10-12页
1 前言第13-25页
    1.1 猪圆环病毒第13-15页
        1.1.1 猪圆环病毒Ⅱ型的生物学特征第13-14页
        1.1.2 猪圆环病毒Ⅱ型的研究进展第14-15页
    1.2 丝氨酸蛋白酶抑制剂第15-20页
        1.2.1 SERPINA1基因的生物学特征第17-19页
        1.2.2 SERPINA1基因的研究进展第19-20页
    1.3 甘露糖受体家族第20-23页
        1.3.1 甘露糖受体的生物学特征第20-22页
        1.3.2 甘露糖受体的研究进展第22-23页
    1.4 本研究的目的和意义第23-25页
2 材料与方法第25-45页
    2.1 试验材料第25-29页
        2.1.1 攻毒试验及样品采集第25页
        2.1.2 猪基因组来源第25页
        2.1.3 毒株第25页
        2.1.4 主要实验仪器和设备第25-26页
        2.1.5 主要试剂及其来源第26-28页
        2.1.6 主要数据库及生物软件第28页
        2.1.7 常用试剂的配制第28-29页
    2.2 试验方法第29-44页
        2.2.1 引物序列及Tm值第29-30页
        2.2.2 总RNA的提取和反转录第30-32页
        2.2.3 实时荧光定量PCR第32-33页
        2.2.4 总蛋白的提取和浓度检测第33页
        2.2.5 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹分析(Western blotting)第33-35页
        2.2.6 ELISA法检测猪SERPINA1和NE的血清含量第35-36页
        2.2.7 猪基因组DNA的提取第36-37页
        2.2.8 猪SERPINA1和MRC1基因 5′调控区分析第37-43页
        2.2.9 猪SERPINA1基因编码区SNP检测第43-44页
        2.2.10 猪MRC1基因启动子区SNP检测第44页
    2.3 统计分析第44-45页
3 结果与分析第45-64页
    3.1 基因组DNA和总RNA的提取第45-46页
        3.1.1 基因组DNA的提取结果第45页
        3.1.2 总RNA的提取结果第45-46页
    3.2 猪SERPINA1基因的表达分析第46-52页
        3.2.1 猪SERPINA1基因的mRNA表达分析第46-50页
        3.2.2 猪SERPINA1基因在肺脏中的蛋白含量分析第50-51页
        3.2.3 猪SERPINA1和NE蛋白血清含量分析第51-52页
    3.3 受猪SERPINA1调控的基因的mRNA表达分析第52-53页
    3.4 猪SERPINA1基因的表达调控第53-56页
        3.4.1 猪SERPINA1基因启动子区荧光素酶表达载体的构建第53-55页
        3.4.2 不同长度启动子片段的荧光素酶活性检测第55-56页
    3.5 猪SERPINA1基因编码区的多态性分析第56-58页
        3.5.1 猪SERPINA1基因编码区的扩增及多态位点的查找第56页
        3.5.2 猪SERPINA1基因编码区突变的群体检测第56-57页
        3.5.3 不同基因型与猪SERPINA1血清含量的关系第57-58页
    3.6 猪MRC1基因的mRNA表达分析第58-59页
    3.7 猪MRC1基因的表达调控第59-64页
        3.7.1 猪MRC1基因启动子区荧光素酶表达载体的构建第59-61页
        3.7.2 不同长度启动子片段的荧光素酶活性检测第61页
        3.7.3 猪MRC1基因启动子区多态位点的查找及群体检测第61-63页
        3.7.4 猪MRC1基因突变载体萤光素酶活性检测第63-64页
4 讨论第64-69页
    4.1 PCV2感染对猪SERPINA1和MRC1基因表达的影响第64-65页
        4.1.1 PCV2感染对猪SERPINA1基因表达的影响第64-65页
        4.1.2 PCV2感染对猪MRC1基因表达的影响第65页
    4.2 受猪SERPINA1基因调控的基因表达分析第65-66页
    4.3 猪SERPINA1和MRC1基因的启动子区分析第66-67页
        4.3.1 猪SERPINA1基因的启动子区分析第66页
        4.3.2 猪MRC1基因的启动子区分析第66-67页
    4.4 猪SERPINA1基因编码区多态与PCV2的关系第67-68页
    4.5 下一步的工作计划第68-69页
5 结论第69-70页
6 参考文献第70-79页
7 致谢第79-80页
8 攻读硕士期间发表论文情况第80页

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