中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第13-25页 |
1.1 猪圆环病毒 | 第13-15页 |
1.1.1 猪圆环病毒Ⅱ型的生物学特征 | 第13-14页 |
1.1.2 猪圆环病毒Ⅱ型的研究进展 | 第14-15页 |
1.2 丝氨酸蛋白酶抑制剂 | 第15-20页 |
1.2.1 SERPINA1基因的生物学特征 | 第17-19页 |
1.2.2 SERPINA1基因的研究进展 | 第19-20页 |
1.3 甘露糖受体家族 | 第20-23页 |
1.3.1 甘露糖受体的生物学特征 | 第20-22页 |
1.3.2 甘露糖受体的研究进展 | 第22-23页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
2 材料与方法 | 第25-45页 |
2.1 试验材料 | 第25-29页 |
2.1.1 攻毒试验及样品采集 | 第25页 |
2.1.2 猪基因组来源 | 第25页 |
2.1.3 毒株 | 第25页 |
2.1.4 主要实验仪器和设备 | 第25-26页 |
2.1.5 主要试剂及其来源 | 第26-28页 |
2.1.6 主要数据库及生物软件 | 第28页 |
2.1.7 常用试剂的配制 | 第28-29页 |
2.2 试验方法 | 第29-44页 |
2.2.1 引物序列及Tm值 | 第29-30页 |
2.2.2 总RNA的提取和反转录 | 第30-32页 |
2.2.3 实时荧光定量PCR | 第32-33页 |
2.2.4 总蛋白的提取和浓度检测 | 第33页 |
2.2.5 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹分析(Western blotting) | 第33-35页 |
2.2.6 ELISA法检测猪SERPINA1和NE的血清含量 | 第35-36页 |
2.2.7 猪基因组DNA的提取 | 第36-37页 |
2.2.8 猪SERPINA1和MRC1基因 5′调控区分析 | 第37-43页 |
2.2.9 猪SERPINA1基因编码区SNP检测 | 第43-44页 |
2.2.10 猪MRC1基因启动子区SNP检测 | 第44页 |
2.3 统计分析 | 第44-45页 |
3 结果与分析 | 第45-64页 |
3.1 基因组DNA和总RNA的提取 | 第45-46页 |
3.1.1 基因组DNA的提取结果 | 第45页 |
3.1.2 总RNA的提取结果 | 第45-46页 |
3.2 猪SERPINA1基因的表达分析 | 第46-52页 |
3.2.1 猪SERPINA1基因的mRNA表达分析 | 第46-50页 |
3.2.2 猪SERPINA1基因在肺脏中的蛋白含量分析 | 第50-51页 |
3.2.3 猪SERPINA1和NE蛋白血清含量分析 | 第51-52页 |
3.3 受猪SERPINA1调控的基因的mRNA表达分析 | 第52-53页 |
3.4 猪SERPINA1基因的表达调控 | 第53-56页 |
3.4.1 猪SERPINA1基因启动子区荧光素酶表达载体的构建 | 第53-55页 |
3.4.2 不同长度启动子片段的荧光素酶活性检测 | 第55-56页 |
3.5 猪SERPINA1基因编码区的多态性分析 | 第56-58页 |
3.5.1 猪SERPINA1基因编码区的扩增及多态位点的查找 | 第56页 |
3.5.2 猪SERPINA1基因编码区突变的群体检测 | 第56-57页 |
3.5.3 不同基因型与猪SERPINA1血清含量的关系 | 第57-58页 |
3.6 猪MRC1基因的mRNA表达分析 | 第58-59页 |
3.7 猪MRC1基因的表达调控 | 第59-64页 |
3.7.1 猪MRC1基因启动子区荧光素酶表达载体的构建 | 第59-61页 |
3.7.2 不同长度启动子片段的荧光素酶活性检测 | 第61页 |
3.7.3 猪MRC1基因启动子区多态位点的查找及群体检测 | 第61-63页 |
3.7.4 猪MRC1基因突变载体萤光素酶活性检测 | 第63-64页 |
4 讨论 | 第64-69页 |
4.1 PCV2感染对猪SERPINA1和MRC1基因表达的影响 | 第64-65页 |
4.1.1 PCV2感染对猪SERPINA1基因表达的影响 | 第64-65页 |
4.1.2 PCV2感染对猪MRC1基因表达的影响 | 第65页 |
4.2 受猪SERPINA1基因调控的基因表达分析 | 第65-66页 |
4.3 猪SERPINA1和MRC1基因的启动子区分析 | 第66-67页 |
4.3.1 猪SERPINA1基因的启动子区分析 | 第66页 |
4.3.2 猪MRC1基因的启动子区分析 | 第66-67页 |
4.4 猪SERPINA1基因编码区多态与PCV2的关系 | 第67-68页 |
4.5 下一步的工作计划 | 第68-69页 |
5 结论 | 第69-70页 |
6 参考文献 | 第70-79页 |
7 致谢 | 第79-80页 |
8 攻读硕士期间发表论文情况 | 第80页 |