| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一部分 实验研究 | 第12-39页 |
| 第一章 TALENs、CRISPR/Cas9以及打靶载体的构建 | 第12-24页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 1 试剂和设备 | 第13页 |
| 1.1 实验试剂和材料 | 第13页 |
| 1.2 仪器和设备 | 第13页 |
| 2 方法 | 第13-16页 |
| 2.1 TALENs载体的构建 | 第13页 |
| 2.2 CRISPR/Cas9载体的构建 | 第13-14页 |
| 2.3 pFlrkt打靶载体的构建 | 第14-15页 |
| 2.4 pGlrkt载体的构建 | 第15-16页 |
| 3 结果 | 第16-20页 |
| 3.1 同源臂扩增结果 | 第16页 |
| 3.2 载体构建结果 | 第16页 |
| 3.3 EGFP基因的扩增和pGlrkt载体的构建结果 | 第16-20页 |
| 4 讨论 | 第20-22页 |
| 5 小结 | 第22-23页 |
| 参考文献 | 第23-24页 |
| 第二章 CRISPR/Cas9和TALENs介导的外源基因在奶山羊β-酪蛋白基因位点的整合 | 第24-38页 |
| 前言 | 第24-25页 |
| 1 试剂和设备 | 第25页 |
| 1.1 实验试剂和材料 | 第25页 |
| 1.2 仪器设备 | 第25页 |
| 2 方法 | 第25-27页 |
| 2.1 打靶细胞的制备和筛选 | 第25-26页 |
| 2.2 基因组的提取 | 第26-27页 |
| 2.3 转基因细胞的鉴定 | 第27页 |
| 3 结果 | 第27-34页 |
| 3.1 TALENs、CRISPR/Cas9分别与Glrkt共转染后转染效率的比较 | 第27-28页 |
| 3.2 同源臂PCR鉴定结果 | 第28-34页 |
| 3.3 打靶细胞的外源基因表达检测 | 第34页 |
| 4 讨论 | 第34-35页 |
| 5 小结 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-38页 |
| 实验结论 | 第38-39页 |
| 第二部分 文献综述 基因组编辑技术的研究进展 | 第39-48页 |
| 前言 | 第39页 |
| 1 ZFNs基因编辑技术 | 第39-40页 |
| 1.1 ZFNs的结构与工作原理 | 第39-40页 |
| 1.2 ZFNs的构建 | 第40页 |
| 1.3 ZFNs技术的应用 | 第40页 |
| 1.4 ZFNs的优势和局限 | 第40页 |
| 2 TALENs基因编辑技术 | 第40-42页 |
| 2.1 TALENs的结构和工作原理 | 第40-41页 |
| 2.2 TALENs的构建 | 第41页 |
| 2.3 TALENs技术的应用 | 第41-42页 |
| 2.4 TALENs的优势和局限 | 第42页 |
| 3 CRISPR/Cas9基因编辑技术 | 第42-44页 |
| 3.1 CRISPR/Cas系统的结构和作用原理 | 第42页 |
| 3.2 CRISPRs系统的构建 | 第42-43页 |
| 3.3 CRISPR/Cas9在基因编辑中的应用 | 第43页 |
| 3.4 CRISPR/Cas9系统的优势和局限 | 第43-44页 |
| 4 展望 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 攻读学位期间申请的专利 | 第49页 |
