致谢 | 第6-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
缩略词表 | 第12-19页 |
1 绪论 | 第19-29页 |
1.1 果实质地变化与细胞壁代谢 | 第19-24页 |
1.1.1 果胶降解相关酶 | 第20-21页 |
1.1.2 纤维素和半纤维素解聚相关酶(细胞壁松弛酶) | 第21-23页 |
1.1.3 次生细胞壁与果实质地变化 | 第23-24页 |
1.2 果实质地的转录调控概况 | 第24-26页 |
1.2.1 番茄果实软化转录调控研究 | 第24页 |
1.2.2 其他果实软化转录调控研究 | 第24-25页 |
1.2.3 次生细胞壁合成的转录调控 | 第25-26页 |
1.3 LOB家族简介 | 第26-28页 |
1.3.1 LOB蛋白结构与分类 | 第26-27页 |
1.3.2 LOB蛋白生物学功能 | 第27页 |
1.3.3 LOB蛋白下游基因及互作蛋白 | 第27-28页 |
1.4 研究的目标和内容 | 第28-29页 |
2 SlLOB1表达分析及转基因研究 | 第29-42页 |
2.1 材料与方法 | 第29-33页 |
2.1.1 植物材料 | 第29页 |
2.1.2 LOB1 RNAi与过表达质粒构建及番茄转基因研究 | 第29-30页 |
2.1.3 转基因植株筛选 | 第30页 |
2.1.4 果实乙烯与硬度测定 | 第30-31页 |
2.1.5 类胡萝卜素HPLC分析 | 第31-32页 |
2.1.6 RNA及提取Q-RT | 第32页 |
2.1.7 统计分析及做图 | 第32-33页 |
2.2 结果与分析 | 第33-42页 |
2.2.1 SlLOB1果实特异性表达 | 第33-34页 |
2.2.2 SlLOB1在果实不同部位表达分析 | 第34页 |
2.2.3 SlLOB1 RNAi果实软化进程减缓 | 第34-37页 |
2.2.4 SlLOB1过表达导致果实软化加速 | 第37-38页 |
2.2.5 其他成熟相关表型 | 第38-42页 |
3 SlLOB1调控靶标鉴定 | 第42-55页 |
3.1 材料与方法 | 第42-43页 |
3.1.1 植物材料 | 第42页 |
3.1.2 RNA-seq文库建立和测序数据分析及实时定量PCR | 第42-43页 |
3.1.3 总蛋白提取与免疫印迹分析 | 第43页 |
3.2 结果与分析 | 第43-55页 |
3.2.1 RNA-seq鉴定SlLOB1RNAi果实中差异表达基因 | 第43-47页 |
3.2.2 Q-RT验证细胞壁相关基因基因表达 | 第47-51页 |
3.2.3 35S: LOB1 OE2细胞壁基因表达分析 | 第51-52页 |
3.2.4 转基因番茄类胡萝卜素生物合成基因表达分析 | 第52-55页 |
4 LOB1生物学功能与调控机理研究 | 第55-65页 |
4.1 材料与方法 | 第55-57页 |
4.1.1 进化树分析 | 第55页 |
4.1.2 基因互作 | 第55-57页 |
4.2 结果与分析 | 第57-65页 |
4.2.1 SlLOB1结构域及进化树分析 | 第57-59页 |
4.2.2 LOB1与下游目标基因互作研究 | 第59-60页 |
4.2.3 EXP1启动子删剪鉴定顺式元件 | 第60-61页 |
4.2.4 LOB1下游转录因子筛选 | 第61-65页 |
5 番茄SlMYB1/2转录调控纤维素合成 | 第65-74页 |
5.1 材料与方法 | 第65-68页 |
5.1.1 植物材料 | 第65页 |
5.1.2 纤维素定量与光学显微镜 | 第65-66页 |
5.1.3 基因分离和序列分析 | 第66页 |
5.1.4 RNA分离和Q-RT | 第66-68页 |
5.1.5 SlMYB1/2过表达质粒构建与烟草转基因 | 第68页 |
5.1.6 基因互作 | 第68页 |
5.2 结果与分析 | 第68-74页 |
5.2.1 SlMYB1/2和SlCESA4/5/6表达分析 | 第68-69页 |
5.2.2 SlMYB1/2转录激活功能 | 第69-71页 |
5.2.3 SlMYB1/2过表达分析 | 第71-74页 |
6 讨论与展望 | 第74-80页 |
6.1 讨论 | 第74-79页 |
6.1.1 LOB1通过转录调控一系列细胞壁代谢相关基因,调控果实软化速率 | 第74-75页 |
6.1.2 EXP1为LOB1蛋白的直接调控目标,LOB对伸展蛋白的转录调控具有一定的广泛性 | 第75-76页 |
6.1.3 SlLOB1一个转化激活子,位于整个软化转录调控网络的中端 | 第76-77页 |
6.1.4 SlLOB1不影响番茄果实的成熟进程,对果实硬度的调控非乙烯依赖 | 第77-78页 |
6.1.5 抑制SlLOB1提高果实类胡萝卜素积累 | 第78-79页 |
6.1.6 SlMYB1/2参与纤维素转录调控 | 第79页 |
6.2 展望 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-91页 |
附录 | 第91-99页 |
作者学习经历及在学期间所取得的科研成果 | 第99-100页 |